TIM-3配體galectin-9誘導(dǎo)NK/T細(xì)胞淋巴瘤凋亡作用的初步研究
發(fā)布時(shí)間：2021-10-10 14:09
目的:NK/T細(xì)胞淋巴瘤（NK/TCL）是一種高度侵襲性血液系統(tǒng)惡性腫瘤,在中國(guó)人群中相對(duì)高發(fā)�，F(xiàn)有治療方案下,仍有部分NK/TCL患者治療反應(yīng)不佳,迫切需要新的治療手段。新近發(fā)現(xiàn)阻斷免疫檢查點(diǎn)的治療如PD-1抗體對(duì)NKT/CL有顯著活性,提示免疫治療可能是一個(gè)重要的發(fā)展方向。本研究觀察另一免疫檢查點(diǎn)分子TIM3在NK/TCL的表達(dá),及其配體對(duì)NK/TCL的生物學(xué)效應(yīng)。方法:Western-blot測(cè)定NK/TCL細(xì)胞株SNK-1、SNK-6、SNT-8和健康人外周血NK細(xì)胞中TIM-3的表達(dá);采用不同濃度重組人galectin-9（rhGAL-9）作用于NK/TCL細(xì)胞株24h后,通過(guò)CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活力;流式細(xì)胞術(shù)Annexin-V/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡;Western-blot檢測(cè)caspase-3、PARP及其剪接體和MAPK信號(hào)通路蛋白磷酸化表達(dá)水平變化。結(jié)果:NK/TCL細(xì)胞株SNK-1、SNK-6和SNT-8的TIM-3表達(dá)較健康人外周血NK細(xì)胞顯著增高,分別是健康人外周血NK細(xì)胞的3.13±0.04、2.77±0.64和3.3±1.04倍;CCK-8檢測(cè)結(jié)果顯示,...
【文章來(lái)源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
TIM-3在NK/TCL中的表達(dá)Fig1ExpressionofTIM-3inNK/TCLcelllinesA.Western-blot檢測(cè)三株細(xì)胞中TIM-3蛋白的表達(dá)情況；B.根據(jù)Western-blot條帶灰度值計(jì)算的相對(duì)表達(dá)量
上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文三株細(xì)胞存活率均下降，分別為（49.80±7.91）%、（74.09±9.±4.64）%。當(dāng) rhGAL-9 濃度提高至 5.0 μg/mL 時(shí)，三株細(xì)胞存活25.70±5.70）%、（31.33±9.22）%和（19.24±4.96）%。上述結(jié)果提示制 NK/TCL 細(xì)胞株細(xì)胞活力，并具有濃度依賴(lài)性。其中 2.5 μg 組與對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。
圖 3.1 不同濃度 rhGal-9 處理 NK/TCL24h 后細(xì)胞凋亡率Fig 3.1 apoptotic rate of NK/TCL cell lines treatedwith rhGAL-9 at various concentrations for 24hA. 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) NK/TCL 凋亡情況；B.與對(duì)照組比較 NK/TCL 凋亡比例注：Control：對(duì)照組，* P＜0.05，和對(duì)照組比較；*** P＜0.001，和對(duì)照組比較；# P＜0.05，和 1.0 μg/mL 組比較；### P＜0.001，和 1.0 μg/mL 組比較。3.2 Western Blot 法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)不同濃度 rhGal-9 處理三種細(xì)胞株后，采用 Western-blot 檢測(cè) caspase-3 和PARP 等凋亡相關(guān)蛋白變化情況（圖 4），結(jié)果顯示，caspase-3 和 PARP 剪切蛋白（cleaved-caspase-3 和 cleaved-PARP）表達(dá)水平隨 rhGAL-9 劑量增加而升高，，當(dāng)rhGal-9 濃度為 1.0 μg/mL 時(shí)，SNK-1、SNK-6 和 SNT-8 三株細(xì)胞 cleaved-caspase-3 表達(dá)量分別是對(duì)照組（Con）的 2.26±0.33、2.31±0.24、2.85±0.38 倍cleaved-PARP 表達(dá)量分別是對(duì)照組的 3.46±0.86、1.20±0.57、2.18±0.77 倍，當(dāng) rhGal-
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The role of T-cell immunoglobulin mucin-3 and its ligand galectin-9 in antitumor immunity and cancer immunotherapy[J]. Riyao Yang,Mien-Chie Hung. Science China（Life Sciences）. 2017(10)
本文編號(hào)：3428528
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【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
TIM-3在NK/TCL中的表達(dá)Fig1ExpressionofTIM-3inNK/TCLcelllinesA.Western-blot檢測(cè)三株細(xì)胞中TIM-3蛋白的表達(dá)情況；B.根據(jù)Western-blot條帶灰度值計(jì)算的相對(duì)表達(dá)量
上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文三株細(xì)胞存活率均下降，分別為（49.80±7.91）%、（74.09±9.±4.64）%。當(dāng) rhGAL-9 濃度提高至 5.0 μg/mL 時(shí)，三株細(xì)胞存活25.70±5.70）%、（31.33±9.22）%和（19.24±4.96）%。上述結(jié)果提示制 NK/TCL 細(xì)胞株細(xì)胞活力，并具有濃度依賴(lài)性。其中 2.5 μg 組與對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。
圖 3.1 不同濃度 rhGal-9 處理 NK/TCL24h 后細(xì)胞凋亡率Fig 3.1 apoptotic rate of NK/TCL cell lines treatedwith rhGAL-9 at various concentrations for 24hA. 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) NK/TCL 凋亡情況；B.與對(duì)照組比較 NK/TCL 凋亡比例注：Control：對(duì)照組，* P＜0.05，和對(duì)照組比較；*** P＜0.001，和對(duì)照組比較；# P＜0.05，和 1.0 μg/mL 組比較；### P＜0.001，和 1.0 μg/mL 組比較。3.2 Western Blot 法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)不同濃度 rhGal-9 處理三種細(xì)胞株后，采用 Western-blot 檢測(cè) caspase-3 和PARP 等凋亡相關(guān)蛋白變化情況（圖 4），結(jié)果顯示，caspase-3 和 PARP 剪切蛋白（cleaved-caspase-3 和 cleaved-PARP）表達(dá)水平隨 rhGAL-9 劑量增加而升高，，當(dāng)rhGal-9 濃度為 1.0 μg/mL 時(shí)，SNK-1、SNK-6 和 SNT-8 三株細(xì)胞 cleaved-caspase-3 表達(dá)量分別是對(duì)照組（Con）的 2.26±0.33、2.31±0.24、2.85±0.38 倍cleaved-PARP 表達(dá)量分別是對(duì)照組的 3.46±0.86、1.20±0.57、2.18±0.77 倍，當(dāng) rhGal-
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The role of T-cell immunoglobulin mucin-3 and its ligand galectin-9 in antitumor immunity and cancer immunotherapy[J]. Riyao Yang,Mien-Chie Hung. Science China（Life Sciences）. 2017(10)
本文編號(hào)：3428528
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