發(fā)布時間：2021-10-10 14:09

　　目的:NK/T細胞淋巴瘤（NK/TCL）是一種高度侵襲性血液系統(tǒng)惡性腫瘤,在中國人群中相對高發(fā)�，F(xiàn)有治療方案下,仍有部分NK/TCL患者治療反應不佳,迫切需要新的治療手段。新近發(fā)現(xiàn)阻斷免疫檢查點的治療如PD-1抗體對NKT/CL有顯著活性,提示免疫治療可能是一個重要的發(fā)展方向。本研究觀察另一免疫檢查點分子TIM3在NK/TCL的表達,及其配體對NK/TCL的生物學效應。方法:Western-blot測定NK/TCL細胞株SNK-1、SNK-6、SNT-8和健康人外周血NK細胞中TIM-3的表達;采用不同濃度重組人galectin-9（rhGAL-9）作用于NK/TCL細胞株24h后,通過CCK-8法檢測細胞活力;流式細胞術Annexin-V/PI雙染法檢測細胞凋亡;Western-blot檢測caspase-3、PARP及其剪接體和MAPK信號通路蛋白磷酸化表達水平變化。結果:NK/TCL細胞株SNK-1、SNK-6和SNT-8的TIM-3表達較健康人外周血NK細胞顯著增高,分別是健康人外周血NK細胞的3.13±0.04、2.77±0.64和3.3±1.04倍;CCK-8檢測結果顯示,... 

【文章來源】：上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

TIM-3在NK/TCL中的表達Fig1ExpressionofTIM-3inNK/TCLcelllinesA.Western-blot檢測三株細胞中TIM-3蛋白的表達情況；B.根據(jù)Western-blot條帶灰度值計算的相對表達量

上海交通大學醫(yī)學碩士學位論文三株細胞存活率均下降，分別為（49.80±7.91）%、（74.09±9.±4.64）%。當 rhGAL-9 濃度提高至 5.0 μg/mL 時，三株細胞存活25.70±5.70）%、（31.33±9.22）%和（19.24±4.96）%。上述結果提示制 NK/TCL 細胞株細胞活力，并具有濃度依賴性。其中 2.5 μg 組與對照組相比，差異具有統(tǒng)計學顯著性。

圖 3.1 不同濃度 rhGal-9 處理 NK/TCL24h 后細胞凋亡率Fig 3.1 apoptotic rate of NK/TCL cell lines treatedwith rhGAL-9 at various concentrations for 24hA. 流式細胞術檢測 NK/TCL 凋亡情況；B.與對照組比較 NK/TCL 凋亡比例注：Control：對照組，* P＜0.05，和對照組比較；*** P＜0.001，和對照組比較；# P＜0.05，和 1.0 μg/mL 組比較；### P＜0.001，和 1.0 μg/mL 組比較。3.2 Western Blot 法檢測凋亡相關蛋白表達不同濃度 rhGal-9 處理三種細胞株后，采用 Western-blot 檢測 caspase-3 和PARP 等凋亡相關蛋白變化情況（圖 4），結果顯示，caspase-3 和 PARP 剪切蛋白（cleaved-caspase-3 和 cleaved-PARP）表達水平隨 rhGAL-9 劑量增加而升高，，當rhGal-9 濃度為 1.0 μg/mL 時，SNK-1、SNK-6 和 SNT-8 三株細胞 cleaved-caspase-3 表達量分別是對照組（Con）的 2.26±0.33、2.31±0.24、2.85±0.38 倍cleaved-PARP 表達量分別是對照組的 3.46±0.86、1.20±0.57、2.18±0.77 倍，當 rhGal-

【參考文獻】：
期刊論文
[1]The role of T-cell immunoglobulin mucin-3 and its ligand galectin-9 in antitumor immunity and cancer immunotherapy[J]. Riyao Yang,Mien-Chie Hung.  Science China（Life Sciences）. 2017(10)



本文編號：3428528