目的:探討circFBLIM1在胃癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及功能,并分析其在胃癌中的臨床意義。方法:采用qRT-PCR法檢測circFBLIM1在胃癌組織與非癌胃粘膜組織以及不同胃癌細(xì)胞與正常胃上皮細(xì)胞中的表達(dá),并分析circFBLIM1在胃癌組織的表達(dá)與胃癌患者不同病理參數(shù)之間的相關(guān)性;轉(zhuǎn)染si-circFBLIM1敲低胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞中circFBLIM1的表達(dá),轉(zhuǎn)染si-NC作為對照組,采用qRT-PCR驗證轉(zhuǎn)染效率。分別采用MTT實驗、細(xì)胞劃痕實驗、Transwell實驗以及AnnexinV-FITC和PI染色法檢測circFBLIM1對胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。采用Western blot檢測circFBLIM1對FBLIM1蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果:qRT-PCR檢測結(jié)果顯示,circFBLIM1在胃癌組織中的表達(dá)明顯高于非癌胃粘膜組織（P<0.01）;相關(guān)性分析顯示,circFBLIM1與胃癌患者的TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān);circFBLIM1在胃癌MGC-803、SGC-7901及AGS細(xì)胞中的表達(dá)均高于GES-1細(xì)胞（P&... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

劃痕實驗檢測si-circFBLIM1對胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞遷移能力的影響

15第3章結(jié)果圖4劃痕實驗檢測si-circFBLIM1對胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞遷移能力的影響。A：轉(zhuǎn)染si-circFBLIM1后SGC-7901與AGS細(xì)胞0h、48h傷口寬度的顯微設(shè)攝像照片（×200）；B：轉(zhuǎn)染si-circFBLIM1后SGC-7901與AGS細(xì)胞傷口愈合寬度的統(tǒng)計分析*與對照組比較，P<0.05。3.6敲低circFBLIM1抑制胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞侵襲Transwell結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染si-circFBLIM1組36h后胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞穿過基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)量明顯低于各自si-NC組，（P<0.01，圖5）。表明抑制circFBLIM1的表達(dá)，能夠抑制胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞的侵襲。圖5Transwell侵襲實驗檢測si-circFBLIM1對SGC-7901與AGS細(xì)胞侵襲能力的影響。A：穿過基底膜的SGC-7901與AGS細(xì)胞顯微照片（×200）；B：轉(zhuǎn)染si-circFBLIM1后SGC-7901與AGS細(xì)胞穿出數(shù)量統(tǒng)計分析，**與對照組比，P<0.01。

16南華大學(xué)碩士學(xué)位論文3.7敲低circFBLIM1促進(jìn)胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞凋亡凋亡實驗結(jié)果顯示，si-circFBLIM1組SGC-7901與AGS細(xì)胞發(fā)生凋亡的細(xì)胞率明顯高于各自si-NC組，（P<0.01，圖6）。表明抑制circFBLIM1的表達(dá)，能夠促進(jìn)胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞凋亡。圖6流式細(xì)胞術(shù)分析si-circFBLIM1對SGC-7901與AGS細(xì)胞凋亡的影響。A：轉(zhuǎn)染si-circFBLIM1后SGC-7901與AGS細(xì)胞的凋亡分析圖；B：轉(zhuǎn)染si-circFBLIM1后SGC-7901與AGS細(xì)胞的凋亡率統(tǒng)計分析**與對照組比較，P<0.01。3.8敲低circFBLIM1下調(diào)FBLIM1蛋白表達(dá)Westernblot檢測結(jié)果顯示，在胃癌SGC-7901與AGS細(xì)胞中，si-circFBLIM1組FBLIM1的蛋白表達(dá)水平明顯低于si-NC組（圖7），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。提示敲低circFBLIM1表達(dá)水平能顯著抑制FBLIM1的表達(dá)。圖7Westernblot法檢測si-circFBLIM1對FBLIM1蛋白表達(dá)的影響，與si-NC組相比，*P<0.01


本文編號：3417399