發(fā)布時間：2021-09-27 23:21

　　目的明確miR-130a與ZEB1和ZEB2的靶向關(guān)系,分析miR-130a在肝癌組織、肝癌細胞株中表達水平變化。通過體內(nèi)、體外實驗檢測miR-130a對肝癌細胞增殖、轉(zhuǎn)移能力的影響。方法1.Real-time PCR檢測不同肝癌細胞株（SMMC-7721、Hep3B及Hep G2）及正常肝細胞株（L02）中miR-130a、ZEB1和ZEB2的表達。收集36例肝癌組織及配對癌旁組織,同樣的方法檢測體內(nèi)miR-130a、ZEB1和ZEB2的表達情況,并分析其表達的相關(guān)性。2.MiR-130a與ZEB1和ZEB2的靶向關(guān)系。利用miRNA mimics和miRNA inhibitor上調(diào)和下調(diào)miR-130a表達,通過Real-time PCR及western blot檢測ZEB1和ZEB2 m RNA及蛋白表達水平變化。同時,利用雙熒光素酶報告基因質(zhì)粒明確miR-130a對ZEB1和ZEB2的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。3.MiR-130a對肝癌細胞惡性生物學(xué)表型的影響。瞬時增強或降低miR-130a的表達,利用MTT、克隆形成、劃痕實驗、transwell遷移侵襲實驗分別檢測miR-130a對肝癌... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

Real-timePCR檢測36例人HCC組織/癌旁組織miR-130a表達差異

圖 1-1 Real-time PCR 檢測 36 例人 HCC 組織/癌旁組織 miR-130a 表達差異*P < 0.05，**P < 0.013.2 ZEB1、ZEB2 在人肝癌組織中表達較癌旁組織明顯上升利用 Real-time PCR 方法比較 36 對人肝癌組織/癌旁組織 ZEB1、ZEB2 表達情果顯示：肝癌組織中 ZEB1、ZEB2 平均表達量較癌旁組織顯著升高（ZEB1, 5.34,8.26, Vs 1.02, 0.24-3.93, P < 0.01, 圖 1-2 左; ZEB2, 5.28, 2.25-8.22, Vs 1.07,3.89, P < 0.01, 圖 1-2 右），以 β-actin 作為內(nèi)在參照物。

MiR-130a 通過下調(diào) E 盒結(jié)合鋅指蛋白 1/2 抑制肝癌細胞癌組織標(biāo)本中 miR-130a 和 ZEB1 表達成負相關(guān)eal-time RT-PCR方法檢測36例人肝癌組織中miR-130a與ZEB1表man 相關(guān)性分析統(tǒng)計，結(jié)果顯示：在人肝癌組織中，miR-130a 和 相關(guān)（ r = -0.884, P < 0.01, 圖 1-3）。


本文編號：3410806