目的明確miR-130a與ZEB1和ZEB2的靶向關(guān)系,分析miR-130a在肝癌組織、肝癌細(xì)胞株中表達(dá)水平變化。通過(guò)體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-130a對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移能力的影響。方法1.Real-time PCR檢測(cè)不同肝癌細(xì)胞株（SMMC-7721、Hep3B及Hep G2）及正常肝細(xì)胞株（L02）中miR-130a、ZEB1和ZEB2的表達(dá)。收集36例肝癌組織及配對(duì)癌旁組織,同樣的方法檢測(cè)體內(nèi)miR-130a、ZEB1和ZEB2的表達(dá)情況,并分析其表達(dá)的相關(guān)性。2.MiR-130a與ZEB1和ZEB2的靶向關(guān)系。利用miRNA mimics和miRNA inhibitor上調(diào)和下調(diào)miR-130a表達(dá),通過(guò)Real-time PCR及western blot檢測(cè)ZEB1和ZEB2 m RNA及蛋白表達(dá)水平變化。同時(shí),利用雙熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒明確miR-130a對(duì)ZEB1和ZEB2的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。3.MiR-130a對(duì)肝癌細(xì)胞惡性生物學(xué)表型的影響。瞬時(shí)增強(qiáng)或降低miR-130a的表達(dá),利用MTT、克隆形成、劃痕實(shí)驗(yàn)、transwell遷移侵襲實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)miR-130a對(duì)肝癌... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

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Real-timePCR檢測(cè)36例人HCC組織/癌旁組織miR-130a表達(dá)差異

圖 1-1 Real-time PCR 檢測(cè) 36 例人 HCC 組織/癌旁組織 miR-130a 表達(dá)差異*P < 0.05，**P < 0.013.2 ZEB1、ZEB2 在人肝癌組織中表達(dá)較癌旁組織明顯上升利用 Real-time PCR 方法比較 36 對(duì)人肝癌組織/癌旁組織 ZEB1、ZEB2 表達(dá)情果顯示：肝癌組織中 ZEB1、ZEB2 平均表達(dá)量較癌旁組織顯著升高（ZEB1, 5.34,8.26, Vs 1.02, 0.24-3.93, P < 0.01, 圖 1-2 左; ZEB2, 5.28, 2.25-8.22, Vs 1.07,3.89, P < 0.01, 圖 1-2 右），以 β-actin 作為內(nèi)在參照物。

MiR-130a 通過(guò)下調(diào) E 盒結(jié)合鋅指蛋白 1/2 抑制肝癌細(xì)胞癌組織標(biāo)本中 miR-130a 和 ZEB1 表達(dá)成負(fù)相關(guān)eal-time RT-PCR方法檢測(cè)36例人肝癌組織中miR-130a與ZEB1表man 相關(guān)性分析統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示：在人肝癌組織中，miR-130a 和 相關(guān)（ r = -0.884, P < 0.01, 圖 1-3）。


本文編號(hào)：3410806