胃癌是一種常發(fā)生在人體消化系統(tǒng)上的惡性腫瘤,癌癥發(fā)病率數據分析表明,每年胃癌新增病例約為100萬人。其中,我國胃癌每年新確診病例約占全球發(fā)病病例的百分之五十,對國民生命健康構成了嚴重危害。黃豆黃素（Glycitein）作為一類主要的非營養(yǎng)素組分普遍存在于大豆的種子、根、莖、葉及其他豆科植物中。黃豆黃素具有多種生物活性,因其表現了良好的活性而受到各國學者關注。但其防癌抗癌作用機制及有效濃度尚未明確。因此,本研究通過食品毒理學,分子生物學和細胞生物學等方法,以黃豆黃素作為研究對象,并以12種人胃癌細胞作為體外研究模型,從細胞及分子水平上,揭示黃豆黃素對胃癌細胞的毒性作用,對正常細胞的毒理作用,周期阻滯,誘導細胞凋亡信號傳導途徑及其潛在的分子作用機制,為研制治療胃癌的功能因子和開發(fā)新型抗腫瘤功能型食品提供新的思路和理論依據。本實驗利用Cell Counting Kit-8（CCK-8）法進行檢測黃豆黃素對12種人胃癌細胞的殺傷作用以及對4種人正常細胞的毒理作用;通過Hochest 33342/PI雙染色法、Annexin V-FITC/PI雙染法、JC-1線粒體膜電位熒光染色法及流式細胞術檢... 

【文章來源】：黑龍江八一農墾大學黑龍江省

【文章頁數】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

019年全球范圍內的癌癥發(fā)病率

第一章文獻綜述7制細胞色素C的釋放及產生caspase聯級反應[67]。TNF-α活化促凋亡途徑，抑制NF-κB信號通路，促使抗凋亡Bcl-2家族的蛋白表達，激活caspase家族誘導凋亡。cIAP1/2與TRAF2復合物參與抑制TNF-α信號傳導，同時FLIP能抑制caspase-8的激活[68,69]。圖1-2細胞凋亡信號途徑Fig.1-2Cellapoptosissignalingpathways[Modelingcancerglycolysis.2011,Jun;1806:555-567]1.4.2活性氧簇反應性氧類物質（Reactiveoxygenspecies，ROS）是氧的代謝產物在人體內的各種生理和病理進程中都能產生�；钚匝鹾胁怀蓪﹄娮雍踉踊鶊F，會導致DNA等生物分子損傷[70,71]。ROS的生理效應通過與大量易氧化的胞內物質反應來發(fā)揮，這些物質包括NADH，NADPH，抗壞血酸，組胺，色氨酸，酪氨酸，半胱氨酸，谷胱甘肽，蛋白質和核酸。ROS還能氧化膽固醇和不飽和脂肪酸，引起膜脂質氧化[72,73]。ROS在生物系統(tǒng)中處于不斷產生和不斷消除的動態(tài)平衡中[76]。癌細胞內活性氧的大量增加會觸發(fā)癌細胞凋亡途徑，抑制腫瘤進一步生長。此外，癌細胞過度增殖引起細胞相對空間位置發(fā)生變化，使部分癌細胞離開生存的位置，而人體環(huán)境能給以轉移細胞生存所必要的營養(yǎng)。這些轉移的癌細胞始終處于一種缺乏營養(yǎng)的饑餓狀態(tài)，有氧代謝不足，增加活

難跣?迫極限。癌細胞中SOD酶的過量表達會抑制癌細胞增殖和轉移[79]。近年來一些成分因子通過上調細胞內ROS含量被看做是誘導腫瘤細胞凋亡的一個有效途徑。比如臨床上廣泛使用的治療因子都與直接或間接地刺激來提高癌細胞內ROS含量達到誘導癌細胞凋亡有關�？傊�，一方面癌細胞內ROS含量與胃癌細胞的增殖、胃癌的進程都存在密切關系[80]。近年的研究表明通過有效的外界因素刺激可以改變癌細胞內ROS的水平這也許能夠達預防和治療胃癌目的，因此，更深入地探究ROS與胃癌的關系對胃癌的防治有著重要意義（圖1-3）[81]。圖1-3活性氧與細胞凋亡途徑Fig.1-3Reactiveoxygenspeciesandapoptosis[BiochimBiophysActa.2016,1223(2):2870-2878]1.4.3Mitogen-activatedproteinkinases（MAPK）信號通路MAPK是調控細胞刺激反應的重要信號傳導通路。作為一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶它會受到細胞內外信號分子刺激后發(fā)生磷酸化而活化，如氧化應激，細胞因子，自由基，重金屬，紫外線照射，神經遞質、激素等�；罨蟮腗APK激酶參與調控細胞增殖、分化、遷移、凋亡等生理過程[82]。MAPK信號通路主要由ERK通路、JNK通路和P38通路組成，其蛋白激酶有MAP3K、MAPKK和MAPK及上游和下游組件MAPKAPK和MAP4K，激

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本文編號：3406492