目的:通過建立BALB/c小鼠結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型,觀察肌醇六磷酸（Inositol hexaphosphate,IP₆）、肌醇（Inositol,Ins）以及二者聯(lián)用對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移發(fā)生發(fā)展的抑制作用,同時(shí)從分子生物學(xué)角度探討其對肝轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制。方法:通過脾膜注射并割脾法建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型。將48只雌性BALB/c小鼠按體重隨機(jī)區(qū)組為4組,每組12只,分別為IP₆干預(yù)組（IP₆ 80mg/kg）、肌醇干預(yù)組（Ins 80mg/kg）、IP₆和肌醇聯(lián)用干預(yù)組（IP₆和Ins 80mg/kg）、對照組（生理鹽水）。各組均采用灌胃方式給予,術(shù)后第二天開始,每日一次,連續(xù)給予20d后處死小鼠,觀察瘤重和肝轉(zhuǎn)移抑制率。采用RT-PCR方法和Western-blot方法分別檢測膠原蛋白（collagen IV）,纖維連接蛋白（FN）,層黏連蛋白（LN）m RNA和蛋白的表達(dá)。采用RT-PCR和免疫組化法分別檢測小鼠肝臟腫瘤組織中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）;堿性成纖維生長因子（b F... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

BCA法測蛋白濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線

第 2 章 結(jié)果第 2 章 結(jié)果2.1 IP6和 Ins 對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移小鼠腫瘤生長的抑制作用實(shí)驗(yàn)結(jié)束后解剖分離小鼠肝臟，可見大小不等的結(jié)節(jié)分布于肝臟表面(見圖 1-1) ：IP6組結(jié)節(jié)分布廣，數(shù)量較多；Ins 組結(jié)節(jié)體積較大；聯(lián)用組結(jié)節(jié)局限于血管周圍，體積最�。粚φ战M結(jié)節(jié)最多，覆蓋整個(gè)肝臟。肝結(jié)節(jié)經(jīng)病理切片確診為低分化腺癌。剔除各組死亡以及因手術(shù)因素導(dǎo)致無肝轉(zhuǎn)移的小鼠，最終各組小鼠數(shù)量、腫瘤質(zhì)量和腫瘤抑制率如表 1-1 所示。

圖 2-1 HE 染色觀察各組肝轉(zhuǎn)移腫瘤染色結(jié)果2.3 Western-blot 方法檢測 IP6和 Ins 干預(yù)對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移小鼠肝組織中 Collagen IV、LN 、FN 蛋白表達(dá)的影響如圖 3-1、表 3-1、圖 3-2 所示，與對照組相比，IP6、Ins 以及二者聯(lián)用都能夠降低細(xì)胞外基質(zhì)蛋白 Collagen IV、LN 和 FN 的表達(dá)，IP6和 Ins 聯(lián)用的效果是最明顯的（P <0.05)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Effects of Down-regulation of Integrin-β1 Expression on Migration and Hepatic Metastasis of Human Colon Carcinoma[J]. 張建立,高軍,譚曉杰,王敏,秦仁義.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2010(04)
[2]植酸對胃癌細(xì)胞惡性增殖的抑制作用研究[J]. 王路,楊志平,崔洪斌.  衛(wèi)生研究. 2008(03)



本文編號：3393670