研究背景及目的頭頸癌是指一組發(fā)生在包括口腔、口咽、下咽、喉等部位的惡性腫瘤。根據(jù)2018GLOBECAN的統(tǒng)計,僅2018年全球就有705781例新發(fā)頭頸癌病例,并有358144例患者死于頭頸癌,分別占全身惡性腫瘤發(fā)病率的3.9%和死亡率的3.7%。我們常將頭頸部不同部位但有相同病理來源的腫瘤作為一類疾病進行研究,而頭頸鱗狀細胞癌是其中發(fā)生率最高的一類。我國目前有超過50%的頭頸鱗狀細胞癌患者在就診時已發(fā)生局部轉(zhuǎn)移或者處于臨床晚期,對于這部分患者傳統(tǒng)治療方式?jīng)]有增加他們的長期生存率。小分子靶向藥日益成為重要的輔助治療手段。它能夠特異性的識別并殺傷腫瘤細胞,有潛在的應(yīng)用前景。在過去的十幾年中,蛋白酶體抑制劑在血液系統(tǒng)惡性腫瘤治療中的應(yīng)用已大大擴展,2003年硼替佐米（萬珂）被FDA批準(zhǔn)用于復(fù)發(fā)性多發(fā)性骨髓瘤和套細胞淋巴瘤治療,至今它已在骨髓瘤和小兒/成人急性白血病患者的療效上取得重大進步,但是在頭頸腫瘤等實體瘤的治療上卻進展緩慢。導(dǎo)致這一結(jié)果的原因很多,實體腫瘤細胞內(nèi)固有的耐藥機制可能是其最主要的原因。一般來說,細胞內(nèi)的某些蛋白質(zhì)的突變,過表達或者持續(xù)性激活都可能會促使耐藥產(chǎn)生。這些蛋白... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

硼替佐米作用頭頸鱗癌細胞株24小時，通過CCK8法檢測細胞毒性（二）ΔNp63α在頭頸鱗癌細胞株中的表達

ΔNp63α在頭頸鱗狀細胞癌中對硼替佐米耐藥的作用及機制研究-23-圖1.1硼替佐米作用頭頸鱗癌細胞株24小時，通過CCK8法檢測細胞毒性（二）ΔNp63α在頭頸鱗癌細胞株中的表達ΔNp63α在四株頭頸鱗癌細胞株中均有表達，根據(jù)Western-Blot檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)各株表達量高低有明顯差異。依據(jù)灰度值表達量由高到低依次為：HN31、UM-SCC-11、UM-SCC-17A和UM-SCC-17B，其中HN31和UM-SCC-11相較于UM-SCC-17A和UM-SCC-17B明顯高表達（見圖1.2）。細胞免疫熒光檢測提示，ΔNp63α高表達于細胞核內(nèi)，熒光強度依次由強到弱依次為：HN31、UM-SCC-11、UM-SCC-17A和UM-SCC-17B，和Western-Blot結(jié)果趨勢一致（見圖1.3）。圖1.2Western-Blot檢測四株頭頸鱗癌細胞株ΔNp63α蛋白表達。

海軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文-24-圖1.3四株頭頸鱗癌細胞株免疫熒光檢測ΔNp63α蛋白的表達及分布，熒光場400倍鏡下觀察（綠色熒光為ΔNp63α，藍色熒光為DAPI）。上述四株頭頸鱗狀細胞癌的ΔNp63α表達量和硼替佐米藥物敏感性有明顯的對應(yīng)關(guān)系：ΔNp63α表達量高的細胞株（HN31和UM-SCC-11）對硼替佐米相對耐藥，Np63α表達量低的細胞株（UM-SCC-17A和UM-SCC-17B）對硼替佐米相對敏感。（三）相對敏感株UM-SCC-17B逐步誘導(dǎo)耐藥經(jīng)過大約240天逐步誘導(dǎo)耐藥培養(yǎng)，培養(yǎng)出能在含有10nM硼替佐米培養(yǎng)基中正常傳代、增殖的耐藥細胞株17B-R-10nM。耐藥株17B-R-10nM形態(tài)特征為鵝卵石樣，大小不一，排列無序，易聚團生長，而親本株UM-SCC-17B排列規(guī)則，大小較均一，如蜂房一般生長（如圖1.4）。無藥培養(yǎng)兩周后測得其IC50為：412.9nM（如圖1.5）。根據(jù)耐藥指數(shù)=耐藥株IC50/親本株IC50，我們得到的頭頸鱗狀細胞癌誘導(dǎo)耐藥株的耐藥指數(shù)為113。圖1.4左圖為親本組UM-SCC-17B，右圖耐藥株17B-R-10nM，均在光鏡下400倍鏡下觀察。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]蛋白質(zhì)組學(xué)研究進展及在頭頸腫瘤標(biāo)志物篩選中的應(yīng)用[J]. 程磊,周梁.  國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2006(01)



本文編號：3392898