惡性腫瘤在轉(zhuǎn)移的過程中通常會有惡性細(xì)胞進(jìn)入體液、血液等循環(huán)系統(tǒng),在這些樣本中檢測到惡性細(xì)胞能夠直接判定腫瘤的轉(zhuǎn)移,具有重要的臨床意義。當(dāng)前主要依靠細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)檢查、細(xì)胞侵襲實驗以及小鼠成瘤等方法,根據(jù)細(xì)胞異形性、低分化程度、快速增殖和高侵襲性等特點鑒定惡性細(xì)胞,但是在體液中惡性細(xì)胞數(shù)量稀少,依靠形態(tài)學(xué)與功能學(xué)方法鑒定稀有惡性細(xì)胞費(fèi)時費(fèi)力。因此本文希望找到一種更為靈敏、簡便的稀有惡性細(xì)胞檢測方法。能量代謝異常是腫瘤細(xì)胞的基本特征之一,Warburg效應(yīng)是最主要的腫瘤代謝異常現(xiàn)象:腫瘤細(xì)胞在有氧條件下大量攝取葡萄糖并通過糖酵解途徑快速獲取能量并提供生物合成的原料。惡性細(xì)胞與正常細(xì)胞的葡萄糖攝取水平差異顯著,放射標(biāo)記的葡萄糖類似物FDG在臨床已被廣泛用于惡性腫瘤組織的檢測。因此本文根據(jù)惡性細(xì)胞具有高糖代謝活性這一特征,利用熒光葡萄糖類似物2-NBDG建立了一種快速、高靈敏度的單細(xì)胞檢測技術(shù),并用于惡性胸腔積液的鑒定。在胸腔積液中檢測到腫瘤細(xì)胞稱之為惡性胸腔積液,它是癌癥存在及轉(zhuǎn)移的直接病理證據(jù),患者確診為IV期一般預(yù)后較差。靈敏、準(zhǔn)確的診斷出胸腔積液的良惡性,對于患者的及時合理治療非常重要... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英漢縮寫名詞對照
第一章 緒論
    1.1 惡性胸腔積液
        1.1.1 影像學(xué)檢查
        1.1.2 胸腔穿刺術(shù)
        1.1.3 胸腔積液細(xì)胞學(xué)診斷
        1.1.4 胸腔積液中的腫瘤標(biāo)志物
        1.1.5 免疫組織化學(xué)染色診斷
        1.1.6 胸膜組織活檢
        1.1.7 胸腔鏡檢查
        1.1.8 支氣管鏡檢查
        1.1.9 新型檢測技術(shù)
    1.2 稀有細(xì)胞檢測方法
        1.2.1 基于細(xì)胞表面標(biāo)志物的分離技術(shù)
        1.2.2 基于物理性質(zhì)的分離技術(shù)
    1.3 腫瘤糖代謝
    1.4 葡萄糖熒光類似物
        1.4.1 6-NBDG的開發(fā)
        1.4.2 2-NBDG的開發(fā)與應(yīng)用
        1.4.3 近紅外熒光葡萄糖類似物
        1.4.4 Cy3 標(biāo)記的熒光葡萄糖類似物
    1.5 本論文研究的內(nèi)容及意義
第二章 基于腫瘤細(xì)胞糖代謝異常檢測肺癌患者胸腔積液中稀有惡性腫瘤細(xì)胞·
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 主要材料與試劑
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 可尋址微孔陣列芯片模板的制作
        2.2.4 可尋址微孔陣列芯片制做及表面修飾
        2.2.5 可尋址微孔陣列芯片表面修飾
        2.2.6 細(xì)胞系培養(yǎng)
        2.2.7 患者信息及樣本收集
        2.2.8 胸腔積液中鑒定疑似腫瘤細(xì)胞
        2.2.9 外周血液中鑒定疑似腫瘤細(xì)胞
        2.2.10 單細(xì)胞顯微操作及疑似腫瘤細(xì)胞測序
        2.2.11 免疫熒光檢測胸腔積液中腫瘤細(xì)胞
    2.3 實驗結(jié)果與討論
        2.3.1 可尋址微孔陣列芯片模板的設(shè)計和制作
        2.3.2 微孔陣列芯片的細(xì)胞捕獲效率
        2.3.3 2-NBDG用于高代謝活性腫瘤細(xì)胞的檢測
        2.3.4 肺癌患者胸腔積液中檢測高代謝活性腫瘤細(xì)胞
        2.3.5 肺癌患者胸腔積液中各類細(xì)胞的熒光強(qiáng)度分析
        2.3.6 顯微操作取出高代謝活性疑似腫瘤細(xì)胞
        2.3.7 疑似腫瘤細(xì)胞的基因鑒定
        2.3.8 檢測方法優(yōu)于傳統(tǒng)的細(xì)胞學(xué)檢查
        2.3.9 高葡萄糖攝取肺癌細(xì)胞CK表達(dá)的異質(zhì)性
        2.3.10 肺癌患者外周血樣本中檢測循環(huán)腫瘤細(xì)胞
    2.4 本章小結(jié)
第三章 總結(jié)與展望
    3.1 主要工作總結(jié)
    3.2 本工作的主要創(chuàng)新點
    3.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表或錄用的論文



本文編號：3352249