目的:用微滴式數(shù)字PCR（ddPCR）對miR-155、miR-99b和let-7a進行絕對定量,檢測miR-155、miR-99b和let-7a在原發(fā)性結(jié)直腸癌患者及結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿中的表達量,探討miR-155、miR-99b和let-7a三種miRNA在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移（CRLM）早期診斷方面的價值,為CRLM的監(jiān)測提供新思路。方法:選取14例健康體檢者,16例原發(fā)性結(jié)直腸癌患者和11例結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿標本采用探針法實時熒光定量PCR技術(shù)（qPCR）檢測患者血漿中miR-155、miR-99b和let-7a的表達情況,檢測TaqMan探針的效果。選取30例原發(fā)性結(jié)直腸癌患者和34例結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿標本,采用ddPCR的方法檢測2組患者血漿中miR-155、miR-99b和let-7a三種miRNA的表達情況,并結(jié)合臨床資料進行分析。最后,將qPCR和ddPCR檢測所得數(shù)據(jù)進行對比分析。結(jié)果:1.qPCR檢測結(jié)果:以健康體檢者為對照組（CG）,與CG相比,miR-155在原發(fā)性結(jié)直腸癌患者和結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿中高表達（P<0.05）,而miR-99b和le... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

探針法實時熒光定量PCR檢測探針的特異性Figure1-1SpecificityofTaqManReal-timePCR

圖 1-2 探針法實時熒光定量 PCR miRNA 的擴增曲線（A：miR-16; B：miR-155; C：let-7a; D：miR-99b; CG：健康對照組；CRC：原發(fā)性結(jié)直腸癌組；CRLM：結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移組）Figure 1-2 Amplification curve of TaqMan Real-time PCR(A:miR-16; B:miR-155; C:let-7a; D:miR-99b; CG:control group; CRC:colorectal cancers;CRLM:colorectalmetastasis).2 健康體檢者、原發(fā)性結(jié)直腸癌患者、結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者 miRNA 表達況結(jié)果分析利用 SPSS statistics20.0 軟件對 qPCR 數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，結(jié)果均數(shù)±標準差(Mean±SD)來表示。統(tǒng)計分析表明，miR-155，miR-99b，let-7a間差異均 P<0.05；與健康體檢者相比，miR-155 在原發(fā)性結(jié)直腸癌患者結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿中表達上調(diào)，而 let-7a 和 miR-99b 在原發(fā)性結(jié)

PCR 技術(shù)探討結(jié)直腸癌血漿中 miR-155、miR-99b、let-7a 的表達與肝轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究 2018 屆 健康對照組，原發(fā)性結(jié)直腸癌患者和結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿 miRNA 的表le 1-1 miRNA expression level in CRC and CRLM patients and heathy control g康對照組相比，P<0.05；b:與原發(fā)性結(jié)直腸癌組相比，P<0.05；c:與結(jié)直腸癌 CG CRC CRLM 1.39 ±1.02bc3.42±2.17a3.27±3.12a1.30±0.99bc0.32±0.38a0.33±0.25a 1.82±.2.28bc0.33±0.27a0.34±0.25a

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本文編號：3347800