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基于微滴式數(shù)字PCR技術(shù)探討結(jié)直腸癌血漿中miR-155、miR-99b、let-7a的表達(dá)與肝轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-17 12:50
  目的:用微滴式數(shù)字PCR(ddPCR)對(duì)miR-155、miR-99b和let-7a進(jìn)行絕對(duì)定量,檢測(cè)miR-155、miR-99b和let-7a在原發(fā)性結(jié)直腸癌患者及結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿中的表達(dá)量,探討miR-155、miR-99b和let-7a三種miRNA在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移(CRLM)早期診斷方面的價(jià)值,為CRLM的監(jiān)測(cè)提供新思路。方法:選取14例健康體檢者,16例原發(fā)性結(jié)直腸癌患者和11例結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿標(biāo)本采用探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(qPCR)檢測(cè)患者血漿中miR-155、miR-99b和let-7a的表達(dá)情況,檢測(cè)TaqMan探針的效果。選取30例原發(fā)性結(jié)直腸癌患者和34例結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿標(biāo)本,采用ddPCR的方法檢測(cè)2組患者血漿中miR-155、miR-99b和let-7a三種miRNA的表達(dá)情況,并結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析。最后,將qPCR和ddPCR檢測(cè)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果:1.qPCR檢測(cè)結(jié)果:以健康體檢者為對(duì)照組(CG),與CG相比,miR-155在原發(fā)性結(jié)直腸癌患者和結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿中高表達(dá)(P<0.05),而miR-99b和le... 

【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】:83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

基于微滴式數(shù)字PCR技術(shù)探討結(jié)直腸癌血漿中miR-155、miR-99b、let-7a的表達(dá)與肝轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究


探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)探針的特異性Figure1-1SpecificityofTaqManReal-timePCR

擴(kuò)增曲線,探針?lè)?實(shí)時(shí)熒光定量PCR,患者


圖 1-2 探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量 PCR miRNA 的擴(kuò)增曲線(A:miR-16; B:miR-155; C:let-7a; D:miR-99b; CG:健康對(duì)照組;CRC:原發(fā)性結(jié)直腸癌組;CRLM:結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移組)Figure 1-2 Amplification curve of TaqMan Real-time PCR(A:miR-16; B:miR-155; C:let-7a; D:miR-99b; CG:control group; CRC:colorectal cancers;CRLM:colorectalmetastasis).2 健康體檢者、原發(fā)性結(jié)直腸癌患者、結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者 miRNA 表達(dá)況結(jié)果分析利用 SPSS statistics20.0 軟件對(duì) qPCR 數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,結(jié)果均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)來(lái)表示。統(tǒng)計(jì)分析表明,miR-155,miR-99b,let-7a間差異均 P<0.05;與健康體檢者相比,miR-155 在原發(fā)性結(jié)直腸癌患者結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿中表達(dá)上調(diào),而 let-7a 和 miR-99b 在原發(fā)性結(jié)

散點(diǎn)圖,結(jié)直腸癌,表達(dá)水平,散點(diǎn)圖


PCR 技術(shù)探討結(jié)直腸癌血漿中 miR-155、miR-99b、let-7a 的表達(dá)與肝轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究 2018 屆 健康對(duì)照組,原發(fā)性結(jié)直腸癌患者和結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿 miRNA 的表le 1-1 miRNA expression level in CRC and CRLM patients and heathy control g康對(duì)照組相比,P<0.05;b:與原發(fā)性結(jié)直腸癌組相比,P<0.05;c:與結(jié)直腸癌 CG CRC CRLM 1.39 ±1.02bc3.42±2.17a3.27±3.12a1.30±0.99bc0.32±0.38a0.33±0.25a 1.82±.2.28bc0.33±0.27a0.34±0.25a

【參考文獻(xiàn)】:
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博士論文
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碩士論文
[1]miRNA let-7及其相關(guān)蛋白HMGA2、C-Myc在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及意義[D]. 陶濤.蚌埠醫(yī)學(xué)院 2012



本文編號(hào):3347800

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