目的 探討高糖對肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、細(xì)胞凋亡的影響及其分子機(jī)制,并通過高脂飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素注射構(gòu)建2型糖尿�。═2DM）模型大鼠探討褪黑素和西格列汀對T2DM大鼠肝臟的保護(hù)作用。 方法 高糖培養(yǎng)HepG2細(xì)胞作為細(xì)胞模型：Hoechst 33258染色檢測細(xì)胞凋亡情況,caspase-3活性檢測測定促凋亡蛋白caspase-3的活性,western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白procaspase-9、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress, ERS）相關(guān)蛋白（GRP78、CHOP、PERK）、氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白p47phox、MAPKs及ASK1的表達(dá)情況。HepG2細(xì)胞給予抗氧化劑α-硫辛酸、JNK和p38抑制劑（分別為SP600125、SB203580）2 h后聯(lián)合40 mM葡萄糖刺激,Hoechst33258染色、western blot、細(xì)胞免疫熒光分別檢測細(xì)胞凋亡、凋亡及ERS相關(guān)蛋白（Bcl-2、Grim19、GRP78）、CHOP的表達(dá)和定位情況。T2DM大鼠模型：37只SPF級(jí)雄性SD大鼠隨機(jī)分配到正常對照（NC）、高脂對照（... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１高濃度葡萄糖誘導(dǎo)ＨｅｐＧ２細(xì)胞調(diào)亡??Ａ，?Ｂ，?Ｃ，?Ｄ，?Ｅ?和?Ｆ?葡萄糖濃度分別為?５．５，２５，４０，１００，１５０?和?２００

Ｐｒｏａｓｐａｓｅ－９是ｃａｓｐａｓｅ－９的前體蛋白，經(jīng)自身裂解而活化。Ｗｅｓｔｅｒ凸ｂｌｏｔ檢測結(jié)??果顯示：隨著葡萄糖濃度升高，ｐｒｏｃａｓｐａｓｅ－９蛋白水平遲漸降低，４０ｍＭ葡萄糖刺??激４８?ｈ后，ｐｒｏｃａｓｐａｓｅ－９蛋白表達(dá)水平下降約４２％，見圖３。??２１??

３．５高濃度葡萄糖對ＨｅｐＧ２細(xì)胞氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白ｐ４７ｐｈｏｘ表達(dá)的影響??Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ結(jié)果顯示高濃度荀萄糖刺激后，ＨｅｐＧ２細(xì)胞中氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白??ｐ４７ｐｈｏｘ表達(dá)量明思增加，且其表達(dá)呈葡萄糖濃度依賴性，見圖５。此外Ｋａｒｔｈｉｋｅｙａｎ??也報(bào)告高糖經(jīng)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)ＨｅｐＧ２細(xì)胞調(diào)亡，這些結(jié)果均說明高糖刺激下ＨｅｐＧ２??細(xì)胞發(fā)生了氧化應(yīng)激ＰＷ。??１?２?３?４?５?６??］）４郵呪?－４６ｋＤａ??Ｍｉｎ?漏??５．５?２５?４１）?１００?１５０?２００?’??１．４「?Ｄ￣ｇｌｉ似）ｓｅ?（ｎｉＭ）??１．２?－?？？?ｔｆ??ｔｉｘＬｉｉｉ??１２?３?４?５?６??與細(xì)胞對照組比較；＊ｐ＜〇．〇５，＊＊ｐ＜０．０１??圖５高濃度葡萄糖對ＨｅｐＧ２細(xì)胞氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)的影響??Ｆｉｇ?５?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎｖｏｌｖｅｄ?ｉｎ?ｏｘｉｄａｔｉｖｅ?ｓｔｒｅｓｓ?ｉｎ?ＨｅｐＧ２?ｃｅｌｌｓ?ｅｘｐｏｓｅｄ?ｔｏ?ｈｉｇｈ?ｇｌｕｃｏｓｅ．??３．６高巧度葡萄糖對ＨｅｐＧ２細(xì)胞ＭＡＰＫ信號(hào)通路的影響??Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?結(jié)果蟲示，高糖（２５，４０，１００，１５０，２００?ｍＭ）刺激?４８?ｈ?后，ｐ３８??和ＪＮＫ稱酸化水平明思上升，而ＥＲＫ礎(chǔ)酸化水平則保持穩(wěn)定，未發(fā)生明思變化，??見圖６ａ。因此，ｐ３８和ＪＮＫ信號(hào)通路可能參與高糖誘導(dǎo)的ＨｅｐＧ２細(xì)胞調(diào)亡。有研??巧表明，６民５可通過激活乂５反１拆８／腳１＾信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡１１３’１７’２５］

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]檢測人群胰島素敏感性的一項(xiàng)新指數(shù)[J]. 李光偉,潘孝仁,Stephen Lillioja,Peter H. Bennett.  中華內(nèi)科雜志. 1993 (10)

碩士論文
[1]高濃度葡萄糖誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞株HepG2凋亡與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的關(guān)聯(lián)及其相關(guān)機(jī)制的初步探討[D]. 袁育珺.安徽醫(yī)科大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3343678