肺癌——作為一種全球常見的惡性腫瘤疾病,其超高的發(fā)病率和死亡率,嚴重威脅人類的健康和生命。作為其兩種亞型之一占比最多的非小細胞肺癌,一經確診就處于不能通過手術治療的晚期階段或轉移階段,只能通過放療或化療的手段治療,如:順鉑、卡鉑及依托泊苷等化療藥物,但這些藥物毒性較大,且長期使用易產生藥物耐受性,因此尋找一種高效、低毒的抗癌藥物迫切需求。因為海洋生物生存在獨特的高鹽、高壓、低溫、暗光、缺氧和強腐蝕性的惡劣環(huán)境,其酶的氨基酸組成或序列都與陸地生物蛋白有很大不同,在種類繁多的海洋蛋白酶的氨基酸序列中,潛在著許多具有生物活性的氨基酸序列的活性蛋白酶。因此,基于PI3K/AKT/mTOR和ERK/MAPK信號通路,本碩士學位論文探討沙蠶蛋白酶（NAP）對抗肺癌機制研究。首先,采用轉錄組測序法進行研究,根據研究結果我們選擇了PI3K/AKT/mTOR和MAPK這兩條信號通路作為本文的研究方向。接著通過體外實驗的細胞劃痕、細胞周期和Western Blotting等實驗,得知NAP可能是通過抑制PI3K/AKT/mTOR通路來誘導細胞凋亡的。隨后我們檢測了不同時間段p-ERK,p-AKT和clea... 

【文章來源】：浙江海洋大學浙江省

【文章頁數】：71 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

技術路線流程圖

表 3-1 RNA 純度Tab.3-1 Purity of RNA膠圖編號樣品名稱濃度(ng/μl)總量(μg)OD260/280OD260/230RIN 檢測結果1H1299(空白組 1)737.80 10.31 2.00 1.72 8.10 A2H1299(空白組 2)735.00 9.97 1.90 1.67 8.80 A3H1299(30 μg/m LNAP 1)703.60 9.81 1.94 1.73 7.90 A4H1299(30 μg/m LNAP 2)660.40 7.21 1.92 1.72 9.30 A

第三章沙蠶蛋白酶對H1299細胞基因轉錄組的影響153.3.2Heatmap結果分析NAP處理H1299前后，有顯著性差異表達的基因共有219個，如下圖所示，選用紅色、綠色和黑色來反映相對較高或較低的表達水平。圖3-2NAP處理（NAP1-3）和對照細胞（Con1-3）之間基因具有顯著性差異的熱圖Fig.3.2thermogramofsignificantdifferencebetweennaptreatment(nap1-3)andcontrolcell(con1-3)3.3.3GO功能注釋分析分別將實驗組含NAP和不含NAP兩種樣品的差異基因進行GO注釋，并通過軟件進行GO注釋統(tǒng)計，根據意義的不同獲得20個GO項，分為三類，如圖3-3所示：生物過程組11項（綠色柱體）、細胞組7項（紅色柱體）、分子功能組2項（藍色柱體）。表3-2H1299細胞gene部分差異基因的GO富集結果Tab.3-2GOEnrichmentResultsofGenePartialDifferentialGenesinH1299CellsTermTypeGOTermGOIDD219numD219percentbiological_processmulticellularorganismalprocessGO:00325012020/219biological_processregulationofbiologicalprocessGO:00507893535/219biological_processgrowthGO:004000755/219biological_processreproductiveprocessGO:002241488/219biological_processresponsetostimulusGO:00508962222/219

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]沙蠶纖溶蛋白酶的生化與分子生物學研究[D]. 張云龍.吉林大學 2007

碩士論文
[1]酸性絲氨酸蛋白酶ASPNJ抗急性淋巴細胞白血病Jurkat細胞作用與膜蛋白表達相關機制[D]. 張建一.吉林大學 2016
[2]酸性絲氨酸蛋白酶對淋巴細胞白血病Jurkat細胞的抑制作用及可能的機制[D]. 李春花.吉林大學 2015
[3]酸性絲氨酸蛋白酶抗白血病細胞作用機制的研究[D]. 姜雪.吉林大學 2014
[4]酸性絲氨酸蛋白酶ASPNJ抑制急性髓細胞白血病NB4細胞的實驗研究[D]. 葛鑫.吉林大學 2012



本文編號：3328002