研究背景及目的長(zhǎng)非編碼RNA（Lnc RNAs）已成為多種癌癥新的基因調(diào)控因子和預(yù)后標(biāo)志物。lnc RNA核豐富轉(zhuǎn)錄本1（NEAT1）與腫瘤的發(fā)生有關(guān),已有研究報(bào)道NEAT1在腎透明細(xì)胞癌（Clear cell renal cell carcinoma,cc RCC）表達(dá)上調(diào)。在腎癌患者中,NEAT1的高表達(dá)與腫瘤進(jìn)展和生存不良有關(guān)。NEAT1基因敲除抑制腎癌細(xì)胞增殖,通過(guò)抑制上皮向間充質(zhì)轉(zhuǎn)化表型抑制腎癌細(xì)胞遷移和侵襲。目前在生物體內(nèi)已發(fā)現(xiàn)100多種RNA修飾。一些研究已經(jīng)廣泛地報(bào)道了某些類(lèi)型的RNA修飾有核m RNA,包括N1-甲基腺苷（m1A）、N6-甲基腺苷（m6A）和5-甲基胞嘧啶（m5C）,其中m6A是在20世紀(jì)70年代首次發(fā)現(xiàn)的。目前,m6A的表位轉(zhuǎn)錄修飾引起了人們的關(guān)注。m6A RNA修飾是大多數(shù)真核生物中最豐富的m RNA和非編碼RNA的內(nèi)部修飾,m6A RNA修飾的生理重要性已被其在組織發(fā)育和分化中的關(guān)鍵作用所證實(shí)。m6A RNA修飾在不同的水平上調(diào)節(jié)m RNA,如結(jié)構(gòu)、成熟、穩(wěn)定、剪接、輸出、翻譯和衰退。此外,m6A RNA修飾還參與細(xì)胞命運(yùn)的決定、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

腎癌組織芯片中METTL14的表達(dá)水平*p<0.05，n=64

METTL14介導(dǎo)的LncRNANEAT1的m6A甲基化在腎癌發(fā)展和轉(zhuǎn)移中的作用及機(jī)制研究-21-圖1D腎癌組織芯片中METTL14的表達(dá)水平*p<0.05，n=64圖1ETCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中METTL14腎癌和正常腎組織表達(dá)水平及METTL14在腎癌不同分級(jí)的表達(dá)水平

圖1F TCGA 數(shù)據(jù)庫(kù)中METTL14對(duì)腎癌總生存期和無(wú)疾病生存期的影響 （二）干擾 METTL14 促進(jìn)腎癌細(xì)胞的增殖、遷移表型 為了探究METTL14是否影響腎癌細(xì)胞的表型，我們?cè)O(shè)計(jì)了METTL14的兩個(gè)siRNA，成功干擾786-O、769-P腎癌細(xì)胞并PCR驗(yàn)證其干擾效率（圖2A），進(jìn)一步通過(guò)WB驗(yàn)證對(duì)METTL14蛋白的干擾效率（圖2B）。成功干擾腎癌細(xì)胞系后，我們通過(guò)CCK8實(shí)驗(yàn)、平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到干擾METTL14相對(duì)于對(duì)照組促進(jìn)腎癌細(xì)胞的增殖（圖2C、2D），通過(guò)transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到相對(duì)于對(duì)照組干擾METTL14促進(jìn)腎癌細(xì)胞的遷移（圖2E），通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)抑制METTL14在腎癌細(xì)胞中的表達(dá)可以促進(jìn)腎癌的增殖和遷移表型。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The RNA Modification N6-methyladenosine and Its Implications in Human Disease[J]. Pedro J.Batista.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2017(03)



本文編號(hào)：3319736