目的通過構(gòu)建納米微球靶向性地提高巨噬細(xì)胞中的鐵濃度來增強(qiáng)抗腫瘤免疫。方法采用W/O/W復(fù)乳化溶劑擴(kuò)散法制備CD206單克隆抗體表面修飾的載Fe₃O₄聚乳酸羥基乙酸（PLGA）納米微球。使用馬爾文粒徑檢測儀測定微粒直徑,Zeta電位法測定Zeta電位。用鐵測定試劑盒測定Fe₃O₄的包封率。采用免疫熒光實驗檢測CD206抗體與巨噬細(xì)胞的結(jié)合及靶向性。Western blot、qRT-PCR檢測巨噬細(xì)胞的極化指數(shù)。并用BALB/C-57小鼠皮下腫瘤模型驗證納米微球促進(jìn)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）的極化狀態(tài)。結(jié)果納米微球的平均直徑在260～95 nm,Zeta電位值在-19～-33 MV。Fe₃O₄的包封率在65%～75%。流式細(xì)胞術(shù)檢測CD206單克隆抗體與PLGA微球偶聯(lián)率為65%～70%,免疫熒光實驗證實了PLGA微球與CD206高表達(dá)巨噬細(xì)胞的靶向結(jié)合能力。Western blot和qRT-PCR證實了偶聯(lián)CD206抗體載Fe₃O

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,40(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

納米微粒的特性

我們采用Western blotting、q-RT PCR驗證納米顆粒是否具有促進(jìn)巨噬細(xì)胞極化的作用。結(jié)果顯示，CD206-Fe3O4-PLGA和Fe3O4-PLGA納米微粒均能促進(jìn)M1巨噬細(xì)胞極化標(biāo)記物的表達(dá)（TNF-α，IL-1β，iNOS)(P<0.05），同時抑制了M2巨噬細(xì)胞的標(biāo)記物的表達(dá)。PLGA納米微粒不具有促進(jìn)巨噬細(xì)胞極化的功能（圖3A、B）。通過活性氧探針檢測巨噬細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生水平，結(jié)果顯示CD206-Fe3O4-PLGA和Fe3O4-PLGA納米微粒的預(yù)處理，細(xì)胞內(nèi)鐵含量升高的巨噬細(xì)胞內(nèi)伴有ROS生成水平升高（圖3C）。圖3 納米微球促進(jìn)巨噬細(xì)胞極化和細(xì)胞活性氧產(chǎn)生

納米微球促進(jìn)巨噬細(xì)胞極化和細(xì)胞活性氧產(chǎn)生

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鐵離子通過ROS-乙�；疨53促進(jìn)巨噬細(xì)胞M1型極化[J]. 周赟,易竹君,闕克婷,張震,劉作金.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2018(01)



本文編號：3283918