背景與目的:胃癌是十分常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一。在我國胃癌發(fā)病率和死亡率都較高,而且由于其缺乏早期的特異性臨床表現(xiàn),不易察覺,導致通常診斷出的胃癌都已進入中晚期,發(fā)生了浸潤和轉移。目前,治療胃癌主要是通過手術、化療、放療的方法,但是整體效果并不理想,轉移率和術后復發(fā)率都很高,5年生存率低至20%～30%。胃癌的發(fā)病機理是眾多基因長期突變積累,導致一系列基因表達及信號通路調(diào)節(jié)發(fā)生異常。所以,研究有關的基因在胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及其調(diào)節(jié)仍然是胃癌發(fā)病機制基礎理論研究的重要環(huán)節(jié),這類研究對胃癌未來的診療及治療方面新技術的開發(fā)有重要意義。ARHGEF28（Rho guanine nucleotide exchange factor 28）,又稱為:Rgnef、p190RHOGEF、RIP2,是一種蛋白編碼基因,位于人類染色體5q13.2,315836bp,共含有44個外顯子和45個內(nèi)含子。由于基因的不同剪切方式,一共有十四種轉錄變異體,其中最長的一個轉綠變異體mRNA共6351bp,ORF（開放閱讀框）長5196bp,含有36個外顯子。Rgnef基因是Rho鳥苷酸交換因子（RhoGEF... 

【文章來源】：陜西師范大學陜西省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?Ｒｇｎｅｆ結構域圖［７９］??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?Ｒｇｎｅｆ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｏｍａｉｎｓ１７９１??

圖１－５ＣＲＩＳＰＲ結構圖［１５５】??Ｆｉｇ．?１－５?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＣＲ１ＳＰＲ［１５５］???ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系統(tǒng)的作用機芾丨Ｊ??ＣＲ丨ＳＰＲ／Ｃａｓ系統(tǒng)的作用過程共包括三個階：第一步是得到新的ｓｐａｃｅｒ，候首先是尋找到ＰＡＭ結構，將噬菌體ＤＮＡ或者外源質(zhì)粒中含有ＰＡＭ的為Ｐｒｏｔｏｓｐｃｅｒ，經(jīng)過核酸切割形成新的Ｓｐａｃｅｒ，進入到ＣＲＩＳＰＲ序列的５’方步是ＣＲ１ＳＰＲ基因座在菌體內(nèi)的大量進行復制及轉錄，再對產(chǎn)物進行切割ｔｒａｃｒＲＮＡ和ｃｒＲＮＡ，兩者會結合在一起，然后再與Ｃａｓ結合；第三ＰＲ／Ｃａｓ，在ｃｒＲＮＡ的作用下，找到靶位點，Ｃａｓ發(fā)揮剪刀的功能，使得斷裂，破壞外來遺傳物質(zhì)１１５５，｜５６］。??ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９中，成熟的ｔｒａｃｒＲＮＡ和ｃｒＲＮＡ有部分區(qū)域是互補的，所以穩(wěn)定的雙鏈ＲＮＡ，與Ｃａｓ９的特定結構域結合，形成核糖蛋白復合物。ｃｒＲ用就是特異性的尋找靶基因，在結構上與之完全貼合，解開ＤＮＡ雙ＮＡ則作為支架結構，呈游離狀態(tài)，這時，它們攜帶的Ｃａｓ９蛋白開始發(fā)的作用，其中ＲｕｖＣ切割與ｃｒＲＮＡ序列一致的ＤＮＡ，ＨＮＨ切割對應的

ｓｃｔｌｕｃｎｃｃ?ＣＪ５??圖１－５ＣＲＩＳＰＲ結構圖［１５５】??Ｆｉｇ．?１－５?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＣＲ１ＳＰＲ［１５５］??１．３．２?ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系統(tǒng)的作用機芾丨Ｊ??ＣＲ丨ＳＰＲ／Ｃａｓ系統(tǒng)的作用過程共包括三個階：第一步是得到新的ｓｐａｃｅｒ，在這??個時候首先是尋找到ＰＡＭ結構，將噬菌體ＤＮＡ或者外源質(zhì)粒中含有ＰＡＭ的序列??確定為Ｐｒｏｔｏｓｐｃｅｒ，經(jīng)過核酸切割形成新的Ｓｐａｃｅｒ，進入到ＣＲＩＳＰＲ序列的５’方向；??第二步是ＣＲ１ＳＰＲ基因座在菌體內(nèi)的大量進行復制及轉錄，再對產(chǎn)物進行切割后，??產(chǎn)生ｔｒａｃｒＲＮＡ和ｃｒＲＮＡ，兩者會結合在一起，然后再與Ｃａｓ結合；第三步是??ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ，在ｃｒＲＮＡ的作用下，找到靶位點，Ｃａｓ發(fā)揮剪刀的功能，使得外來??基因斷裂，破壞外來遺傳物質(zhì)１１５５，｜５６］。??ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９中

【參考文獻】：
期刊論文
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[5]Rho小G蛋白相關激酶的結構與功能[J]. 閆慧娟,勿呢爾,莫日根,范麗菲.  中國細胞生物學學報. 2014(07)



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