背景與目的:胃癌是十分常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一。在我國胃癌發(fā)病率和死亡率都較高,而且由于其缺乏早期的特異性臨床表現(xiàn),不易察覺,導(dǎo)致通常診斷出的胃癌都已進(jìn)入中晚期,發(fā)生了浸潤和轉(zhuǎn)移。目前,治療胃癌主要是通過手術(shù)、化療、放療的方法,但是整體效果并不理想,轉(zhuǎn)移率和術(shù)后復(fù)發(fā)率都很高,5年生存率低至20%～30%。胃癌的發(fā)病機(jī)理是眾多基因長期突變積累,導(dǎo)致一系列基因表達(dá)及信號通路調(diào)節(jié)發(fā)生異常。所以,研究有關(guān)的基因在胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及其調(diào)節(jié)仍然是胃癌發(fā)病機(jī)制基礎(chǔ)理論研究的重要環(huán)節(jié),這類研究對胃癌未來的診療及治療方面新技術(shù)的開發(fā)有重要意義。ARHGEF28（Rho guanine nucleotide exchange factor 28）,又稱為:Rgnef、p190RHOGEF、RIP2,是一種蛋白編碼基因,位于人類染色體5q13.2,315836bp,共含有44個(gè)外顯子和45個(gè)內(nèi)含子。由于基因的不同剪切方式,一共有十四種轉(zhuǎn)錄變異體,其中最長的一個(gè)轉(zhuǎn)綠變異體mRNA共6351bp,ORF（開放閱讀框）長5196bp,含有36個(gè)外顯子。Rgnef基因是Rho鳥苷酸交換因子（RhoGEF... 

【文章來源】：陜西師范大學(xué)陜西省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?Ｒｇｎｅｆ結(jié)構(gòu)域圖［７９］??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?Ｒｇｎｅｆ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｏｍａｉｎｓ１７９１??

圖１－５ＣＲＩＳＰＲ結(jié)構(gòu)圖［１５５】??Ｆｉｇ．?１－５?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＣＲ１ＳＰＲ［１５５］???ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系統(tǒng)的作用機(jī)芾丨Ｊ??ＣＲ丨ＳＰＲ／Ｃａｓ系統(tǒng)的作用過程共包括三個(gè)階：第一步是得到新的ｓｐａｃｅｒ，候首先是尋找到ＰＡＭ結(jié)構(gòu)，將噬菌體ＤＮＡ或者外源質(zhì)粒中含有ＰＡＭ的為Ｐｒｏｔｏｓｐｃｅｒ，經(jīng)過核酸切割形成新的Ｓｐａｃｅｒ，進(jìn)入到ＣＲＩＳＰＲ序列的５’方步是ＣＲ１ＳＰＲ基因座在菌體內(nèi)的大量進(jìn)行復(fù)制及轉(zhuǎn)錄，再對產(chǎn)物進(jìn)行切割ｔｒａｃｒＲＮＡ和ｃｒＲＮＡ，兩者會結(jié)合在一起，然后再與Ｃａｓ結(jié)合；第三ＰＲ／Ｃａｓ，在ｃｒＲＮＡ的作用下，找到靶位點(diǎn)，Ｃａｓ發(fā)揮剪刀的功能，使得斷裂，破壞外來遺傳物質(zhì)１１５５，｜５６］。??ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９中，成熟的ｔｒａｃｒＲＮＡ和ｃｒＲＮＡ有部分區(qū)域是互補(bǔ)的，所以穩(wěn)定的雙鏈ＲＮＡ，與Ｃａｓ９的特定結(jié)構(gòu)域結(jié)合，形成核糖蛋白復(fù)合物。ｃｒＲ用就是特異性的尋找靶基因，在結(jié)構(gòu)上與之完全貼合，解開ＤＮＡ雙ＮＡ則作為支架結(jié)構(gòu)，呈游離狀態(tài)，這時(shí)，它們攜帶的Ｃａｓ９蛋白開始發(fā)的作用，其中ＲｕｖＣ切割與ｃｒＲＮＡ序列一致的ＤＮＡ，ＨＮＨ切割對應(yīng)的

ｓｃｔｌｕｃｎｃｃ?ＣＪ５??圖１－５ＣＲＩＳＰＲ結(jié)構(gòu)圖［１５５】??Ｆｉｇ．?１－５?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＣＲ１ＳＰＲ［１５５］??１．３．２?ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系統(tǒng)的作用機(jī)芾丨Ｊ??ＣＲ丨ＳＰＲ／Ｃａｓ系統(tǒng)的作用過程共包括三個(gè)階：第一步是得到新的ｓｐａｃｅｒ，在這??個(gè)時(shí)候首先是尋找到ＰＡＭ結(jié)構(gòu)，將噬菌體ＤＮＡ或者外源質(zhì)粒中含有ＰＡＭ的序列??確定為Ｐｒｏｔｏｓｐｃｅｒ，經(jīng)過核酸切割形成新的Ｓｐａｃｅｒ，進(jìn)入到ＣＲＩＳＰＲ序列的５’方向；??第二步是ＣＲ１ＳＰＲ基因座在菌體內(nèi)的大量進(jìn)行復(fù)制及轉(zhuǎn)錄，再對產(chǎn)物進(jìn)行切割后，??產(chǎn)生ｔｒａｃｒＲＮＡ和ｃｒＲＮＡ，兩者會結(jié)合在一起，然后再與Ｃａｓ結(jié)合；第三步是??ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ，在ｃｒＲＮＡ的作用下，找到靶位點(diǎn)，Ｃａｓ發(fā)揮剪刀的功能，使得外來??基因斷裂，破壞外來遺傳物質(zhì)１１５５，｜５６］。??ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９中

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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