胰腺癌是世界上最具破壞性和致死率的消化道惡性腫瘤之一,發(fā)病率逐年增高,由于胰腺癌起病隱匿,早期缺乏特征性臨床表現(xiàn),導(dǎo)致早期診斷困難,大多數(shù)胰腺癌患者確診時(shí)已經(jīng)是晚期,喪失了手術(shù)治療的最佳時(shí)機(jī),并且放化療對(duì)胰腺癌治療效果欠佳,當(dāng)前有效的免疫治療手段匱乏,同時(shí)由于胰腺癌發(fā)病機(jī)制不明,疾病進(jìn)展迅速,早期易發(fā)生轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致預(yù)后極差,5年生存率不足5%。因此,探索胰腺癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)分子機(jī)制,為臨床進(jìn)一步研究胰腺癌基因靶向治療奠定基礎(chǔ)顯得尤為重要。腫瘤干細(xì)胞（CSCs）是指腫瘤細(xì)胞中極少數(shù)的處于分裂靜止?fàn)顟B(tài)的未分化細(xì)胞,具有一定的自我更新能力,并且具有獨(dú)特的可塑性、代謝能力以及增強(qiáng)的放化療抵抗能力。研究表明,在胰腺癌中,胰腺癌干細(xì)胞（PCSCs）驅(qū)動(dòng)了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展,并且在腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)以及耐藥中起到了重要作用,胰腺癌高度惡性生物學(xué)行為可能由胰腺癌組織內(nèi)的PCSCs所決定。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一類200個(gè)以上核苷酸組成的不編碼蛋白的RNA分子,多項(xiàng)研究表明lncRNA是胚胎發(fā)育、細(xì)胞代謝等多種細(xì)胞生物學(xué)行為中的關(guān)鍵調(diào)控因子,其異常表達(dá)與腫瘤的... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Wnt/β-catenin信號(hào)通路示意圖

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文21圖2.1熒光定量PCR檢測(cè)人胰腺癌細(xì)胞中Linc-RoR表達(dá)Fig.2.1DetectionoftheexpressionofLinc-RoRinhumanpancreaticcancercellsbyqRT-PCR2.2.2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率2.2.2.1驗(yàn)證pCDH-RoR質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率依據(jù)Linc-RoR在不同胰腺癌細(xì)胞株中的差異性表達(dá)，我們通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染技術(shù)在Linc-RoR表達(dá)量相對(duì)較低的BxPC-3、SW1990細(xì)胞中轉(zhuǎn)入pCDH-RoR及其對(duì)照pCDH-Vector，采用熒光定量PCR的方法檢測(cè)顯示轉(zhuǎn)入pCDH-RoR的胰腺癌細(xì)胞中Linc-RoR的相對(duì)表達(dá)量明顯高于對(duì)照組（圖2.2），轉(zhuǎn)染有效，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。圖2.2BxPC-3和SW1990細(xì)胞株中上調(diào)Linc-RoR表達(dá)（*P<0.05）Fig.2.2Up-regulatingLinc-RoRinBxPC-3andSW1990cells(*P<0.05)2.2.2.2驗(yàn)證sh-RoR質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率依據(jù)Linc-RoR在不同胰腺癌細(xì)胞株中的差異性表達(dá)，我們通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染技術(shù)在Linc-RoR表達(dá)量相對(duì)較高的SW1990、PaTu-8988細(xì)胞中轉(zhuǎn)入sh-RoR與sh-NC，結(jié)果表明轉(zhuǎn)入sh-RoR后胰腺癌細(xì)胞中Linc-RoR的相對(duì)表達(dá)量明顯低于對(duì)照組（圖2.3），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

長鏈非編碼RNARoR通過Wnt/β-catenin信號(hào)通路增強(qiáng)胰腺癌細(xì)胞干性22圖2.3SW1990和PaTu-8988細(xì)胞株中下調(diào)Linc-RoR表達(dá)（*P<0.05）Fig.2.3Down-regulatingLinc-RoRinSW1990andPaTu-8988cells(*P<0.05)2.2.3Linc-RoR調(diào)節(jié)胰腺癌細(xì)胞干性2.2.3.1Westernblot技術(shù)檢測(cè)干性相關(guān)基因的表達(dá)通過Westernblot技術(shù)從蛋白水平檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的胰腺癌細(xì)胞中干性相關(guān)基因CD133、C-myc、Nanog、Oct4、Sox2的表達(dá)，結(jié)果表明上調(diào)胰腺癌細(xì)胞BxPC-3和SW1990中Linc-RoR的表達(dá)后，干性相關(guān)基因的蛋白表達(dá)量與對(duì)照組（pCDH-Vector組）相比明顯增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（圖2.4）；同時(shí)，下調(diào)胰腺癌細(xì)胞SW1990和PaTu-8988中Linc-RoR的表達(dá)后，干性相關(guān)基因的蛋白表達(dá)量與對(duì)照組（sh-NC組）相比明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（圖2.5）。2.4上調(diào)Linc-RoR，WesternBlot檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞中干性相關(guān)基因的表達(dá)BA

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Cancer stem cell plasticity and tumor hierarchy[J]. Marina Carla Cabrera,Robert E Hollingsworth,Elaine M Hurt.  World Journal of Stem Cells. 2015(01)
[2]Function of lncRNAs and approaches to lncRNA-protein interactions[J]. ZHU JuanJuan,FU HanJiang,WU YongGe,ZHENG XiaoFei.  Science China（Life Sciences）. 2013(10)



本文編號(hào)：3273278