【研究背景與目的】肺癌是全世界最常見的惡性腫瘤之一,其中很大部分（85%）是非小細(xì)胞肺癌（Non-small-cell lung cancer,NSCLC）。目前NSCLC的遠(yuǎn)期治療效果仍然不理想,NSCLC進(jìn)展期發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致治療失敗的主要原因。因此發(fā)現(xiàn)并闡明肺癌發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移過程中的分子機(jī)制對(duì)提高患者的生存率非常重要。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-beta信號(hào)通路（TGF-βsignal pathway）介導(dǎo)的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）在肺癌的侵襲轉(zhuǎn)移過程中起到了十分關(guān)鍵的作用。TGF-β信號(hào)通路在腫瘤細(xì)胞中的作用受到多種機(jī)制調(diào)節(jié),近年來非編碼RNA（non-coding RNA,ncRNA）在基因表達(dá)調(diào)控中的作用日益受到重視。X染色體失活基因（X inactivate-specific transcript,XIST）與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),有研究表明XIST在NSCLC中表達(dá)上調(diào),且在促進(jìn)NSCLC細(xì)胞遷移和侵襲過程中發(fā)揮作用。本研究旨在探討XIST促進(jìn)TGF-β誘導(dǎo)的NSCLC細(xì)胞EMT過程的作用機(jī)制,闡明XIST與... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

psiCHECK-2載體圖譜和多克隆位點(diǎn)

1. XIST 和 ZEB2 在不同轉(zhuǎn)移狀態(tài)的非小細(xì)胞肺癌患者中的表達(dá)情況為了明確在不同轉(zhuǎn)移狀態(tài)的 NSCLC 患者中 XIST 和 ZEB2 的表達(dá)情況，我們收集了 40 例 NSCLC 患者的手術(shù)切除腫瘤組織樣本，并根據(jù)不同的腫瘤轉(zhuǎn)移程度將所有樣本分為 2 組：無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（N0，包括 UICC 分期 Ia，Ib，以及部分IIa 期的患者組織）20 例；伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（N1-2，包括 UICC 分期 IIIa，部分 IIIb以及 IV 期的患者組織）20 例。采用實(shí)時(shí)定量 PCR 法檢測(cè)全部 40 例非小細(xì)胞肺癌患者腫瘤組織中 XIST 和 ZEB2 的表達(dá)水平，結(jié)果顯示 XIST 在伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的NSCLC 組織中的表達(dá)明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.01），與此同時(shí) ZEB2 在伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的 NSCLC 組織中的表達(dá)也明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.01）（圖 2）。以上結(jié)果表明，XIST 及 ZEB2 均在高轉(zhuǎn)移狀態(tài)的 NSCLC 表達(dá)上調(diào)，可能與 NSCLC腫瘤組織的轉(zhuǎn)移性存在相關(guān)性。

2. MiR-367-3p、miR-141-3p 及 ZEB2 在 NSCLC 細(xì)胞株與正常支氣管上皮細(xì)胞株中的表達(dá)情況我們選取了 5 株不同的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株 A549 (腺癌)，H226（鱗癌），95(巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移株), 95D (巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移株), H1299 (非小細(xì)胞癌)以及 1 株人正常支氣管上皮細(xì)胞（HBE）為研究對(duì)象，運(yùn)用實(shí)時(shí)定量 PCR 方法檢測(cè)其中miR-367-3p、miR-141-3p （內(nèi)參：U6）的表達(dá)以及 ZEB2 mRNA（內(nèi)參：β-actin的表達(dá)水平。檢測(cè)結(jié)果顯示：與正常支氣管上皮細(xì)胞比較，miR-367-3p、miR-141-3的表達(dá)水平在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中呈現(xiàn)出不同程度的下調(diào)，且在高轉(zhuǎn)移的 95細(xì)胞表達(dá)水平較低轉(zhuǎn)移的 95C 細(xì)胞更低。ZEB2 mRNA 的表達(dá)水平在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中呈現(xiàn)出不同程度的上調(diào)（圖 3）。ZEB2 mRNA 與 miR-367-3p、miR-141-3呈現(xiàn)為相反的表達(dá)趨勢(shì)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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