[目的]（1）利用基因高通量Miseq測序技術對比分析結直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織中miRNA的差異表達。（2）應用實時熒光定量PCR（Quantitative Real time PCR RT-qPCR）技術驗證 miRNA452-5p 和 miRNA215-5p 在結直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織中表達,并通過分析其與臨床病理資料之間的關系,為進一步研究miRNA 452-5p和miRNA215-5p在結直腸癌中生物學功能及其調控下游靶基因機制奠定基礎。（3）繪制 ROC 曲線（Receiver operating characteristic,ROC）和曲線下面積（Area under the ROC curve,AUC）評估 miRNA452-5p、miRNA215-5p及2-miRNA panel的診斷價值,期望探索出潛在的結直腸癌診斷價值的分子標志物和治療靶點。[方法]（1）收集3例結直腸癌組織及配對癌旁正常腸粘膜組織送至上�？党缮镉邢薰具M行基因高通量Miseq測序篩選差異表達miRNA。（2）收集2017年7月至2017年10月在昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院消化內鏡中... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學云南省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

高通量Miseq測序實驗流程

１．２結直腸癌組織差異表達的ｍｉＲＮＡ??結直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織差異表達ｍｉＲＮＡ中４０種ｍｉＲＮＡ表達上調，??４８種ｍｉＲＮＡ表達下調（表１，圖３）。??１．３?ｍｉＲＮＡ在染色體上的分布差異結果見圖４??１．４?ｍｉＲＮＡ對其耙基因的調節(jié)??采用Ｍｉｒｄｂｖ５和Ｔａｒｇｅｔｓｃａｎ７．１兩種耙基因預測軟件預測結直腸癌組織與癌??旁正常腸粘膜組織間差異表達ｍｉＲＮＡ的靶基因。測出上調ｍｉＲＮＡＳ靶基因共４１２，??下調ｍｉＲＮＡＳ靶基因３７２，其中上調ｍｉＲ－３７５耙基因２個，ｍｉＲ２１５－５ｐ靶基因９??個，ｍｉＲｌ－３ｐ靶基因１１５個，ｍｉＲ９９ａ－５ｐ靶基因１２個，ｍｉＲ２１８－５ｐ靶基因１４９??個，ｍｉＲ１００－５ｐ靶基因１２個，ｍｉＲ１９５－５ｐ靶基因１１３個；下調ｍｉＲ７－５ｐ耙基因??２０?個，ｍｉＲ３３５－３ｐ?靶基因?２８?個，ｍｉＲ１３５ｂ－５ｐ?靶基因?１０４?個，ｍｉＲ－１２４６?靶基因??２０?個，ｍｉＲ２２３－３ｐ?耙基因?３８?個，ｍｉＲ－７９７４?耙基因?８６?個，ｍｉＲ４５２－５ｐ?耙基因?２６??個（表２－３）。??１．５差異表達ｍｉＲＮＡ的ＧＯ生物過程和ＫＥＧＧ通路??結直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織間差異表達ｍｉＲＮＡ的ＧＯ分析結果表明，??在這些變化的ｍｉＲＮＡ中

結直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織差異表達ｍｉＲＮＡ中４０種ｍｉＲＮＡ表達上調，??４８種ｍｉＲＮＡ表達下調（表１，圖３）。??１．３?ｍｉＲＮＡ在染色體上的分布差異結果見圖４??１．４?ｍｉＲＮＡ對其耙基因的調節(jié)??采用Ｍｉｒｄｂｖ５和Ｔａｒｇｅｔｓｃａｎ７．１兩種耙基因預測軟件預測結直腸癌組織與癌??旁正常腸粘膜組織間差異表達ｍｉＲＮＡ的靶基因。測出上調ｍｉＲＮＡＳ靶基因共４１２，??下調ｍｉＲＮＡＳ靶基因３７２，其中上調ｍｉＲ－３７５耙基因２個，ｍｉＲ２１５－５ｐ靶基因９??個，ｍｉＲｌ－３ｐ靶基因１１５個，ｍｉＲ９９ａ－５ｐ靶基因１２個，ｍｉＲ２１８－５ｐ靶基因１４９??個，ｍｉＲ１００－５ｐ靶基因１２個，ｍｉＲ１９５－５ｐ靶基因１１３個；下調ｍｉＲ７－５ｐ耙基因??２０?個，ｍｉＲ３３５－３ｐ?靶基因?２８?個，ｍｉＲ１３５ｂ－５ｐ?靶基因?１０４?個，ｍｉＲ－１２４６?靶基因??２０?個，ｍｉＲ２２３－３ｐ?耙基因?３８?個，ｍｉＲ－７９７４?耙基因?８６?個，ｍｉＲ４５２－５ｐ?耙基因?２６??個（表２－３）。??１．５差異表達ｍｉＲＮＡ的ＧＯ生物過程和ＫＥＧＧ通路??結直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織間差異表達ｍｉＲＮＡ的ＧＯ分析結果表明，??在這些變化的ｍｉＲＮＡ中

【參考文獻】：
期刊論文
[1]microRNA-200c靶向抑制轉錄因子激活蛋白2α表達增強結腸癌細胞增殖能力的體外研究[J]. 樊麗君,李美寧,王爽,孫建文,牛萬通,程牛亮.  腫瘤研究與臨床. 2015 (04)
[2]Early stage colon cancer[J]. Hugh James Freeman.  World Journal of Gastroenterology. 2013(46)
[3]結直腸癌病因與發(fā)病機制最新研究進展[J]. 張濤濤,閻巖.  科協(xié)論壇(下半月). 2009(07)

博士論文
[1]血清microRNA作為生物標記物在結直腸腺癌早期診斷中的應用[D]. 鄭桂喜.山東大學 2014
[2]microRNA在結腸癌上皮間質轉化中的作用與機制研究[D]. 張志勇.第四軍醫(yī)大學 2012



本文編號：3261619