發(fā)布時(shí)間：2021-07-03 01:51

　　[目的]（1）利用基因高通量Miseq測(cè)序技術(shù)對(duì)比分析結(jié)直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織中miRNA的差異表達(dá)。（2）應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Real time PCR RT-qPCR）技術(shù)驗(yàn)證 miRNA452-5p 和 miRNA215-5p 在結(jié)直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織中表達(dá),并通過(guò)分析其與臨床病理資料之間的關(guān)系,為進(jìn)一步研究miRNA 452-5p和miRNA215-5p在結(jié)直腸癌中生物學(xué)功能及其調(diào)控下游靶基因機(jī)制奠定基礎(chǔ)。（3）繪制 ROC 曲線（Receiver operating characteristic,ROC）和曲線下面積（Area under the ROC curve,AUC）評(píng)估 miRNA452-5p、miRNA215-5p及2-miRNA panel的診斷價(jià)值,期望探索出潛在的結(jié)直腸癌診斷價(jià)值的分子標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。[方法]（1）收集3例結(jié)直腸癌組織及配對(duì)癌旁正常腸粘膜組織送至上�？党缮镉邢薰具M(jìn)行基因高通量Miseq測(cè)序篩選差異表達(dá)miRNA。（2）收集2017年7月至2017年10月在昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)鏡中... 

【文章來(lái)源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：48 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

高通量Miseq測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程

１．２結(jié)直腸癌組織差異表達(dá)的ｍｉＲＮＡ??結(jié)直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織差異表達(dá)ｍｉＲＮＡ中４０種ｍｉＲＮＡ表達(dá)上調(diào)，??４８種ｍｉＲＮＡ表達(dá)下調(diào)（表１，圖３）。??１．３?ｍｉＲＮＡ在染色體上的分布差異結(jié)果見(jiàn)圖４??１．４?ｍｉＲＮＡ對(duì)其耙基因的調(diào)節(jié)??采用Ｍｉｒｄｂｖ５和Ｔａｒｇｅｔｓｃａｎ７．１兩種耙基因預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌組織與癌??旁正常腸粘膜組織間差異表達(dá)ｍｉＲＮＡ的靶基因。測(cè)出上調(diào)ｍｉＲＮＡＳ靶基因共４１２，??下調(diào)ｍｉＲＮＡＳ靶基因３７２，其中上調(diào)ｍｉＲ－３７５耙基因２個(gè)，ｍｉＲ２１５－５ｐ靶基因９??個(gè)，ｍｉＲｌ－３ｐ靶基因１１５個(gè)，ｍｉＲ９９ａ－５ｐ靶基因１２個(gè)，ｍｉＲ２１８－５ｐ靶基因１４９??個(gè)，ｍｉＲ１００－５ｐ靶基因１２個(gè)，ｍｉＲ１９５－５ｐ靶基因１１３個(gè)；下調(diào)ｍｉＲ７－５ｐ耙基因??２０?個(gè)，ｍｉＲ３３５－３ｐ?靶基因?２８?個(gè)，ｍｉＲ１３５ｂ－５ｐ?靶基因?１０４?個(gè)，ｍｉＲ－１２４６?靶基因??２０?個(gè)，ｍｉＲ２２３－３ｐ?耙基因?３８?個(gè)，ｍｉＲ－７９７４?耙基因?８６?個(gè)，ｍｉＲ４５２－５ｐ?耙基因?２６??個(gè)（表２－３）。??１．５差異表達(dá)ｍｉＲＮＡ的ＧＯ生物過(guò)程和ＫＥＧＧ通路??結(jié)直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織間差異表達(dá)ｍｉＲＮＡ的ＧＯ分析結(jié)果表明，??在這些變化的ｍｉＲＮＡ中

結(jié)直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織差異表達(dá)ｍｉＲＮＡ中４０種ｍｉＲＮＡ表達(dá)上調(diào)，??４８種ｍｉＲＮＡ表達(dá)下調(diào)（表１，圖３）。??１．３?ｍｉＲＮＡ在染色體上的分布差異結(jié)果見(jiàn)圖４??１．４?ｍｉＲＮＡ對(duì)其耙基因的調(diào)節(jié)??采用Ｍｉｒｄｂｖ５和Ｔａｒｇｅｔｓｃａｎ７．１兩種耙基因預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌組織與癌??旁正常腸粘膜組織間差異表達(dá)ｍｉＲＮＡ的靶基因。測(cè)出上調(diào)ｍｉＲＮＡＳ靶基因共４１２，??下調(diào)ｍｉＲＮＡＳ靶基因３７２，其中上調(diào)ｍｉＲ－３７５耙基因２個(gè)，ｍｉＲ２１５－５ｐ靶基因９??個(gè)，ｍｉＲｌ－３ｐ靶基因１１５個(gè)，ｍｉＲ９９ａ－５ｐ靶基因１２個(gè)，ｍｉＲ２１８－５ｐ靶基因１４９??個(gè)，ｍｉＲ１００－５ｐ靶基因１２個(gè)，ｍｉＲ１９５－５ｐ靶基因１１３個(gè)；下調(diào)ｍｉＲ７－５ｐ耙基因??２０?個(gè)，ｍｉＲ３３５－３ｐ?靶基因?２８?個(gè)，ｍｉＲ１３５ｂ－５ｐ?靶基因?１０４?個(gè)，ｍｉＲ－１２４６?靶基因??２０?個(gè)，ｍｉＲ２２３－３ｐ?耙基因?３８?個(gè)，ｍｉＲ－７９７４?耙基因?８６?個(gè)，ｍｉＲ４５２－５ｐ?耙基因?２６??個(gè)（表２－３）。??１．５差異表達(dá)ｍｉＲＮＡ的ＧＯ生物過(guò)程和ＫＥＧＧ通路??結(jié)直腸癌組織與癌旁正常腸粘膜組織間差異表達(dá)ｍｉＲＮＡ的ＧＯ分析結(jié)果表明，??在這些變化的ｍｉＲＮＡ中

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]microRNA-200c靶向抑制轉(zhuǎn)錄因子激活蛋白2α表達(dá)增強(qiáng)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖能力的體外研究[J]. 樊麗君,李美寧,王爽,孫建文,牛萬(wàn)通,程牛亮.  腫瘤研究與臨床. 2015 (04)
[2]Early stage colon cancer[J]. Hugh James Freeman.  World Journal of Gastroenterology. 2013(46)
[3]結(jié)直腸癌病因與發(fā)病機(jī)制最新研究進(jìn)展[J]. 張濤濤,閻巖.  科協(xié)論壇(下半月). 2009(07)

博士論文
[1]血清microRNA作為生物標(biāo)記物在結(jié)直腸腺癌早期診斷中的應(yīng)用[D]. 鄭桂喜.山東大學(xué) 2014
[2]microRNA在結(jié)腸癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的作用與機(jī)制研究[D]. 張志勇.第四軍醫(yī)大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3261619