發(fā)布時間：2021-07-02 12:44

　　目的探討缺氧條件對胰腺癌PANC-1細胞遷移和侵襲能力、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化、細胞外基質(zhì)、Hippo信號通路的影響,以及沉默HIF-1α對胰腺癌細胞侵襲、遷移的影響以及作用機制,為臨床上進一步預(yù)防、治療胰腺癌提供理論依據(jù)。方法1、將胰腺癌PANC-1細胞分為對照組和缺氧組,分別在常氧（5%CO2、95%O2）和缺氧（5%CO2、2%O2、93%N2）條件下培養(yǎng)24h,采用Transwell小室和細胞劃痕實驗檢測胰腺癌細胞遷移能力的變化;Western blot和q RT-PCR技術(shù)檢測上皮細胞間充質(zhì)化（EMT）相關(guān)蛋白、MMP2和MMP-9、Hippo信號通路相關(guān)蛋白的表達水平;2、將PANC-1細胞分為對照組、缺氧組、缺氧空轉(zhuǎn)組、缺氧干擾組。通過脂質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)染法將Si RNA、Si RNA HIF-1α轉(zhuǎn)入胰腺癌細胞中,Western blot檢測轉(zhuǎn)染效果。采用細胞劃痕和Transwell小室檢測胰腺癌細胞遷移能力和侵襲能力的變化;Western blot檢測EMT相關(guān)蛋白以及MMP2、MMP-9、Hippo信號通路相關(guān)蛋白的表達水平;3、實驗結(jié)果采用SPSS22.0進行t檢驗和單因素方差分... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2兩組細胞Transwell遷移實驗結(jié)果（結(jié)晶紫染色，200倍）

-101.2結(jié)果1.2.1細胞劃痕實驗和細胞遷移實驗結(jié)果結(jié)果顯示，與對照組相比，缺氧組細胞的劃痕面積和遷移細胞數(shù)明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見圖1、圖2和表1圖1兩組胰腺癌細胞劃痕實驗結(jié)果（100倍）圖2兩組細胞Transwell遷移實驗結(jié)果（結(jié)晶紫染色，200倍）表1細胞劃痕實驗和遷移實驗結(jié)果（x±s）組別劃痕面積（%）遷移細胞數(shù)（個）對照組35.247±5.612135.268±12.323缺氧組69.586±7.235a268.249±23.147a注：與對照組相比，aP<0.05對照組缺氧組對照組缺氧組培養(yǎng)0h培養(yǎng)24h

-11-1.2.2Transwell細胞侵襲實驗結(jié)果與對照組相比，缺氧組侵襲細胞數(shù)明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見圖3和表2。圖3Transwell侵襲實驗檢結(jié)果（結(jié)晶紫染色，200倍）表2兩組細胞Transwell細胞侵襲實驗結(jié)果（x±s）組別侵襲細胞數(shù)（個）對照組412.362±11.246缺氧組652.314±15.862a注：與對照組相比，aP<0.051.2.3缺氧對胰腺癌細胞功能的影響（1）對EMT相關(guān)蛋白E-cadherin、Vimentin表達的影響與對照組相比，缺氧組E-cadherin蛋白和mRNA表達水平明顯降低，Vimentin蛋白和mRNA表達水平明顯升高，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見圖4、圖5和表3。對照組缺氧組

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：3260489