研究背景和研究目的:甲狀腺癌作為內(nèi)分泌系統(tǒng)常見的惡性腫瘤,在頭頸部腫瘤中占有很大比率,居女性惡性腫瘤第四位,其中乳頭狀甲狀腺癌占絕大多數(shù)。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶1（CPT1）作為一種β-氧化途徑的關(guān)鍵酶,對脂肪酸分解代謝具有重要調(diào)控作用。目前CPT1主要有CPT1A、CPT1B、CPT1C三個家族成員存在。作為調(diào)控代謝的限速酶,越來越多研究發(fā)現(xiàn),在腫瘤的代謝過程中CPT1同樣起著重要調(diào)節(jié)作用。CPT1在各個組織和細(xì)胞中表達(dá)有很大差異,具有一定組織特異性:其中CPT1A分布較為廣泛,在多數(shù)組織中存在,在肝臟部位高表達(dá);CPT1B則是主要分布在肌肉部位;CPT1C則主要分布在腦部,主要集中在中樞神經(jīng)系統(tǒng),例如海馬體、杏仁核和下丘腦核,在認(rèn)知和學(xué)習(xí),攝食行為和身體能量消耗以及情緒應(yīng)對的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)中都起著很重要的作用。CPT1C是CPT1家族中唯一能被p53調(diào)控的蛋白質(zhì),腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）是細(xì)胞能量代謝調(diào)節(jié)的關(guān)鍵分子。為了維持增殖和侵襲能力,腫瘤細(xì)胞會對其能量代謝過程進(jìn)行調(diào)節(jié),在這些過程中,AMPK發(fā)揮非常重要的作用。研究發(fā)現(xiàn),AMPK的激活能夠誘導(dǎo)c AMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）的... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
縮略詞表
前言
第一章 代謝應(yīng)激條件下CPT1C表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞的存活關(guān)系研究
    一、實驗儀器和材料
        (一)主要試劑
        (二)主要儀器及耗材
        (三)溶液配制
    二、方法
        (一)收集腫瘤患者臨床樣本
        (二)提取組織中總RNA
        (三)逆轉(zhuǎn)錄
        (四)熒光實時定量PCR
        (五)細(xì)胞株培養(yǎng)和瞬時轉(zhuǎn)染
        (六)CCK-8細(xì)胞增殖檢測
        (七)細(xì)胞周期檢測
        (八)細(xì)胞凋亡檢測
        (九)細(xì)胞遷移檢測
        (十)統(tǒng)計學(xué)分析
    三、結(jié)果
        (一)CPT1C在人乳頭狀甲狀腺癌組織和癌旁組織中的表達(dá)情況
        (二)CPT1C對乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響
        (三)代謝應(yīng)激對乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞系中CPT1C表達(dá)的影響
        (四)CPT1C表達(dá)水平對乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞在代謝應(yīng)激狀態(tài)下存活的影響。
第二章 代謝應(yīng)激下乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞中CPT1C表達(dá)上調(diào)的分子機(jī)制研究
    一、實驗儀器和材料
        (一)主要試劑
        (二)主要儀器及耗材
        (三)溶液配制
    二、實驗方法
        (一)細(xì)胞培養(yǎng)
        (二)細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程
        (三)合成基因進(jìn)行測序
        (四)質(zhì)粒提取
        (五)蛋白免疫印跡
        (六)實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)
        (七)細(xì)胞凋亡檢測
        (八)統(tǒng)計學(xué)分析
    三、結(jié)果
        (一)應(yīng)激狀態(tài)下KTC-1 細(xì)胞AMPK、PPARα分子活性改變情況
        (二)激活A(yù)MPK可上調(diào)KTC-1 細(xì)胞中CPT1C的表達(dá)水平
        (三)代謝應(yīng)激條件下,AMPK抑制劑能夠有效削減PPARα、CPT1C的表達(dá)增加,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,降低腫瘤細(xì)胞活力
第三章 代謝應(yīng)激下乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞中PPARα調(diào)控CPT1C表達(dá)影響細(xì)胞的存活
    一、材料和方法
        (一)主要試劑
        (二)主要儀器及耗材
        (三)溶液配制
    二、實驗方法
        (一)細(xì)胞培養(yǎng)
        (二)細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程
        (三)目的基因CDS區(qū)域設(shè)計合成
        (四)合成基因測序鑒定
        (五)質(zhì)粒提取
        (六)蛋白免疫印跡
        (七)實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)
        (八)熒光素酶報告基因檢測
        (九)統(tǒng)計學(xué)分析
    三、結(jié)果
        (一)PPARα對CPT1C表達(dá)水平的影響
        (二)PPARα對CPT1C轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用
    四、討論
參考文獻(xiàn)
綜述 肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶1C介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞生長的分子機(jī)制研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
個人簡歷
博士在讀期間第一作者作者發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3260319