背景:口腔癌是口腔黏膜發(fā)生的最常見的惡性腫瘤,其特點(diǎn)是浸潤(rùn)性廣、進(jìn)程快、預(yù)后較差,5年存活率只有50%⁵5%。腫瘤的進(jìn)展是由上皮和間質(zhì)的相互作用,構(gòu)成的腫瘤與宿主界面微環(huán)境決定的。癌相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）占腫瘤微生態(tài)環(huán)境的主要部分,它能夠促使口腔癌的侵襲和轉(zhuǎn)移,但其來源仍存在爭(zhēng)論。有研究表明腫瘤細(xì)胞的調(diào)控使成纖維細(xì)胞被激活成為CAFs,但作用機(jī)制不明。近年來研究表明,腫瘤細(xì)胞可分泌外泌體,其中含有大量可促進(jìn)其生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移的蛋白質(zhì)、RNA和脂質(zhì),細(xì)胞通過釋放外泌體影響受體細(xì)胞的狀態(tài)和功能。關(guān)于胰腺癌的相關(guān)研究,結(jié)果表明,胰腺癌細(xì)胞分泌的外泌體可以將癌細(xì)胞中的miR-155傳遞給成纖維細(xì)胞,誘導(dǎo)其活化為CAFs。但對(duì)于口腔癌細(xì)胞來源外泌體（Cal27-exo）在成纖維細(xì)胞活化中發(fā)揮的作用尚未見報(bào)道。目的:本研究通過將Cal27-exo與正�？谇火つこ衫w維細(xì)胞（NOMFs）共培養(yǎng),檢測(cè)NOMFs對(duì)Cal27-exo的攝取情況,并測(cè)定與Cal27-exo共培養(yǎng)后NOMFs（NOMFs+Cal27-exo）的增殖和遷移能力以及相關(guān)蛋白的表達(dá)。探討Cal27-exo對(duì)... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

NOMFs原代培養(yǎng)

NOMFs的透射電鏡

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文口腔癌細(xì)胞來源外泌體對(duì)口腔黏膜成纖維細(xì)胞生物學(xué)作用的研究92.2.3NOMFs的細(xì)胞來源鑒定取第3代NOMFs培養(yǎng)進(jìn)行免疫熒光染色（圖3-4），熒光顯微鏡下觀察顯示：細(xì)胞內(nèi)波形蛋白染色為陽性（圖3），角蛋白染色為陰性（圖4），說明培養(yǎng)獲得的細(xì)胞為中胚層細(xì)胞，來源于間充質(zhì)，而非上皮。圖3NOMFs的波形蛋白熒光染色。波形蛋白經(jīng)抗波形蛋白抗體和與Cy3結(jié)合的山羊抗小鼠IgG染色，呈陽性(紅色)。細(xì)胞核用DAPI染色(藍(lán)色)。比例尺為200μm。圖4NOMFs的角蛋白熒光染色。細(xì)胞角蛋白用抗廣譜細(xì)胞角蛋白抗體和預(yù)吸附Cy3的山羊抗兔IgGH&L染色，呈陰性，細(xì)胞核用DAPI染色(藍(lán)色)。比例尺為200μm。2.3討論成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織中產(chǎn)生和維持細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的一組復(fù)雜的多功能細(xì)胞[52]，參與結(jié)締組織的許多細(xì)胞過程，它們廣泛存在于身體的每個(gè)組織和器官中[53]。成纖維細(xì)胞不僅可以產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)（如不同的膠原類型）和細(xì)胞基質(zhì)（如糖胺聚糖），在健康和疾病中也發(fā)揮著不同的作用，是炎癥、血管生成、癌癥以及生理和病理組織纖維化的中樞介質(zhì)[54]。在疾病發(fā)生發(fā)展過程中，許多不同類型的細(xì)胞，尤其是成纖維細(xì)胞，被激活并改變其表型。因此在體外研究不同疾病的進(jìn)程，前提就是成熟的培養(yǎng)出成纖維細(xì)胞。原代培養(yǎng)成纖維細(xì)胞最基本方法是組織塊培養(yǎng)法和酶消化法。雖然兩種方法

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3252300