背景:口腔癌轉(zhuǎn)移已經(jīng)成為全球所面對(duì)的健康問題。制定有效的口腔癌治療策略是降低該疾病死亡率的關(guān)鍵。近年來,microRNA（miRNA）作為一組小的非編碼RNA在腫瘤轉(zhuǎn)移中起著至關(guān)重要的作用。本實(shí)驗(yàn)的目的是研究miR-1207-5p對(duì)口腔癌轉(zhuǎn)移的調(diào)控作用及具體機(jī)制。方法:在本研究中,在臨床組織水平,我們對(duì)24個(gè)口腔癌患者臨床病理組織中的miRNA表達(dá)譜進(jìn)行了系統(tǒng)的評(píng)價(jià),這些臨床樣本包括了8個(gè)癌旁組織樣本,7個(gè)原位癌組織樣本和9個(gè)轉(zhuǎn)移癌組織樣本;采用DChip技術(shù)鑒定臨床口腔腫瘤組織中差異表達(dá)的miRNA,采用LTQ/MS鑒定腫瘤組織中差異表達(dá)的蛋白質(zhì)。在體外細(xì)胞水平,采用生長(zhǎng)曲線、克隆形成、Transwell實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)研究miR-1207-5p對(duì)口腔癌轉(zhuǎn)移的影響;定量實(shí)時(shí)PCR用于研究miR-1207-5p對(duì)靶基因和上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）、Wnt通路、TGF-β通路及干細(xì)胞生成過程等信號(hào)通路標(biāo)志物的表達(dá)水平的影響;Western印跡分析用于檢測(cè)miR-1207-5p對(duì)靶蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果:在臨床組織水平,m... 

【文章來源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述MicroRNAs:口腔癌早期診斷的有效生物標(biāo)志物
    1.1 背景
    1.2 miRNA在口腔癌中的表達(dá)
    1.3 miRNA在口腔癌發(fā)生發(fā)展中的作用
        1.3.1 Ras/MAPK信號(hào)通路
        1.3.2 PI3K/AKT信號(hào)通路
        1.3.3 JAK/STAT信號(hào)通路
        1.3.4 Wnt/β-catenin信號(hào)通路
        1.3.5 Notch信號(hào)通路
        1.3.6 TGF-β/SMAD信號(hào)通路
        1.3.7 細(xì)胞周期相關(guān)的信號(hào)通路
        1.3.8 細(xì)胞凋亡途徑
        1.3.9 轉(zhuǎn)錄因子和DNA甲基化
    1.4 展望
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.3 主要溶液的配置
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 臨床口腔癌組織樣本的獲取
        2.4.2 細(xì)胞水平研究
3 miR-1207-5p在轉(zhuǎn)移與原位口腔癌組織及細(xì)胞中的表達(dá)及對(duì)口腔癌轉(zhuǎn)移的作用
    3.1 引言
    3.2 轉(zhuǎn)移與原位口腔癌組織中的miRNAs差異表達(dá)
    3.3 miR-195對(duì)口腔癌遷移能力的影響
        3.3.1 Primer5.0軟件設(shè)計(jì)miRNA引物
        3.3.2 miR-195轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)
        3.3.3 miR-195對(duì)口腔癌細(xì)胞遷移能力的影響
    3.4 miR-1207-5p對(duì)口腔癌增殖、遷移及侵襲等能力的影響
        3.4.1 qRT-PCR法檢測(cè)口腔癌細(xì)胞中miR-1207-5p的表達(dá)
        3.4.2 miR-1207-5p轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)
        3.4.3 miR-1207-5p對(duì)口腔癌細(xì)胞表型的影響
        3.4.4 miR-1207-5p對(duì)口腔癌細(xì)胞增殖能力的影響
        3.4.5 miR-1207-5p對(duì)口腔癌細(xì)胞克隆形成能力的影響
        3.4.6 miR-1207-5p對(duì)口腔癌細(xì)胞遷移能力的影響
        3.4.7 miR-1207-5p對(duì)口腔癌細(xì)胞侵襲能力的影響
        3.4.8 miR-1207-5p所在cluster中miRNAs對(duì)口腔癌細(xì)胞遷移能力的影響
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
4 miR-1207-5p對(duì)類胰蛋白酶α-1以及轉(zhuǎn)移相關(guān)信號(hào)通路的影響研究
    4.1 引言
    4.2 臨床口腔癌病人組織中差異表達(dá)的蛋白
    4.3 miR-1207-5p對(duì)Tryptase-alpha-1蛋白的影響
        4.3.1 預(yù)測(cè)miR-1207-5p與Tryptase-alpha-1的結(jié)合位點(diǎn)
        4.3.2 細(xì)胞水平miR-1207-5p對(duì)TPSAB1蛋白的影響
    4.4 miR-1207-5p調(diào)控轉(zhuǎn)移的相關(guān)機(jī)制研究
        4.4.1 miR-1207-5p對(duì)EMT信號(hào)通路的調(diào)控作用
        4.4.2 miR-1207-5p與Wnt信號(hào)通路標(biāo)志物的作用關(guān)系
        4.4.3 miR-1207-5p與TGF-β信號(hào)通路標(biāo)志物的作用關(guān)系
        4.4.4 miR-1207-5p與干細(xì)胞表面標(biāo)志物的影響
    4.5 討論
    4.6 本章小結(jié)
5 結(jié)論
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝



本文編號(hào)：3250232