目的：觀察DCLK1和Ki67在正常腸粘膜組織、癌旁組織、腺瘤組織和腺癌組織中的表達(dá)；分析DCLK1和Ki67在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)與臨床病理學(xué)參數(shù)及的意義；著重研究DCLK1+/Ki67-細(xì)胞在實(shí)體瘤和人結(jié)腸癌細(xì)胞株LoVo中的分布、形態(tài)特征、數(shù)量等,探討其在腺癌組織中與臨床病理學(xué)參數(shù)、患者預(yù)后的關(guān)系,進(jìn)而確定結(jié)直腸癌干細(xì)胞的特異性免疫表型及生物學(xué)特征,為抗腫瘤治療提供新靶點(diǎn)。方法：選取150例結(jié)直腸癌組織、34例腺瘤組織、10例正常腸粘膜和10例癌旁組織手工制作組織芯片；HE染色觀察不同病理類型組織和LoVo細(xì)胞中細(xì)胞的形態(tài)特征、排列方式、分布位置等：免疫組織化學(xué)染色顯示DCLK1和Ki67在正常腸粘膜組織、癌旁組織、腺瘤組織和腺癌組織中的表達(dá)情況；免疫組化雙重標(biāo)記腺癌組織中DCLK1和Ki67的表達(dá)并與相鄰切片HE染色的細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行比較；利用免疫組織熒光染色和化學(xué)染色雙重標(biāo)記DCLK1+/Ki67-細(xì)胞在人結(jié)腸癌細(xì)胞株LoVo中的分布、形態(tài)特征、數(shù)量；利用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0分析DCLK1、Ki67及DCLK1+/Ki67細(xì)胞在結(jié)直腸癌組織的表達(dá)與臨床病理學(xué)參數(shù)及預(yù)后的意義... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 正常腸粘膜、腺瘤組織及結(jié)直腸癌組織中DCLK1和Ki67的表達(dá)及其臨床病理學(xué)意義
    材料與方法
        1 研究對象
        2 研究方法與試劑
            2.1 手工制作組織芯片
                2.1.1 方法
                2.1.2 儀器與試劑
            2.2 免疫組織化學(xué)染色(EnliVision plus法)
                2.2.1 方法
                2.2.2 儀器與試劑
        3 結(jié)果判定
        4 數(shù)據(jù)分析
    結(jié)果
        1 Ki67在正常腸黏膜組織、癌旁組織及腺瘤組織中的表達(dá)
        2 DCLK1在正常腸黏膜組織、癌旁組織及病變組織中的表達(dá)
        3 DCLK1和Ki67蛋白的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系
        4 DCLK1和Ki67在結(jié)直腸組織中表達(dá)的相關(guān)性
    討論
第二部分 結(jié)直腸癌組織中DCLK1~+/Ki67~-細(xì)胞的形態(tài)特征、位置、數(shù)量及其病理學(xué)意義
    材料與方法
        1 研究對象
        2 研究方法與試劑
            2.1 免疫組織化學(xué)雙重染色(DouSP法)
                2.1.1 方法
                2.1.2 儀器與試劑
            2.2 蘇木素-伊紅染色(HE)
                2.2.1 方法
                2.2.2 儀器與試劑
        3 結(jié)果判定
        4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    結(jié)果
        1 HE染色下正常腸粘膜組織、腺瘤組織和腺癌組織的組織學(xué)形態(tài)
        2 DCLK1~+/Ki67~-細(xì)胞在結(jié)直腸癌組織中的形態(tài)、分布位置及百分比
        3 DCLK1~+/Ki67~-細(xì)胞的表達(dá)與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系
        4 DCLK1~+/Ki67~-細(xì)胞在正常腸粘膜、腺瘤及腺癌中的表達(dá)
        5 DCLK1~+/Ki67~-細(xì)胞在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系
    討論
第三部分 人結(jié)腸癌細(xì)胞株LoVo中DCLK1~+/Ki67~-細(xì)胞的數(shù)量及細(xì)胞形態(tài)特征
    材料與方法
        1 研究對象
        2 研究方法與試劑
            2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與爬片
                2.1.1 方法
                2.1.2 試劑與儀器
            2.2 免疫組織化學(xué)雙重染色(DouSP法)
                2.2.1 方法
                2.2.2 儀器與試劑
            2.3 蘇木素-伊紅染色(HE)
                2.3.1 方法
                2.3.2 儀器與試劑
            2.4 免疫組織熒光雙重染色
                2.4.1 方法
                2.4.2 儀器與試劑
    結(jié)果
        1 HE染色下人結(jié)腸癌細(xì)胞株LoVo的細(xì)胞組織學(xué)形態(tài)
        2 DCLK1~+/Ki67~-細(xì)胞的形態(tài)及數(shù)量百分比
    討論
結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
英文縮寫
附錄
在校期間的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一種簡便實(shí)用的組織芯片制作方法[J]. 張登才,劉斌,張麗華,董亮,蘇勤軍,史敏,楊艷麗.  診斷病理學(xué)雜志. 2013(11)
[2]Doublecortin-like kinase 1 exhibits cancer stem cell-like characteristics in a human colon cancer cell line[J]. Lianna Li,Charles F. Bellows.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(02)
[3]Report of incidence and mortality in China cancer registries, 2009[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Siwei Zhang,Ping Zhao,Guanglin Li,Lingyou Wu,Jie He.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(01)
[4]Colorectal cancer in inflammatory bowel disease:What is the real magnitude of the risk?[J]. Jessica K Dyson,Matthew D Rutter.  World Journal of Gastroenterology. 2012(29)
[5]結(jié)直腸癌CD44+/ki-67-癌干細(xì)胞特征及其與臨床病理關(guān)系[J]. 韓軍平,劉斌,楊艷麗,蘇勤軍,史敏,錢震,董亮,張彩蘭,哈英娣.  世界華人消化雜志. 2011(34)



本文編號：3248016