(本大論文分為兩個(gè)部分:蛋白酶體抑制劑與拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑,從兩個(gè)方面、兩種系統(tǒng)來研究小細(xì)胞肺癌耐藥機(jī)制以及化療增敏劑。)第一部分:obatoclax能增強(qiáng)蛋白酶體抑制劑對小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的抗腫瘤作用蛋白酶體抑制劑（proteasome inhibitor,PIs）硼替佐米（bortezomib,BTZ）和卡非佐米（carfilzomib,CFZ）已經(jīng)被臨床應(yīng)用于治療血液惡性腫瘤。但是在實(shí)體腫瘤中Pis由于容易產(chǎn)生耐藥性,所以其臨床試驗(yàn)效果并不理想。迄今為止還沒有應(yīng)用于實(shí)體瘤的治療。為了研究PIs治療小細(xì)胞肺癌時(shí)產(chǎn)生耐藥性的機(jī)制以及提高PIs的敏感性,本文首先通過研究兩種PIs BTZ和CFZ對小細(xì)胞肺癌的殺傷作用的不同及其可能的分子機(jī)制,進(jìn)而使用協(xié)同治療手段將MCL-1抑制劑obatoclax（OBX）和PIs聯(lián)合治療小細(xì)胞肺癌。在本篇研究中,我們應(yīng)用了基于質(zhì)譜的蛋白組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)即使硼替佐米和卡非佐米都是PIs,但是二者能誘導(dǎo)完全不同的蛋白組學(xué)變化,進(jìn)而在小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中影響不同的信號(hào)通路。結(jié)果顯示,硼替佐米處理組比較傾向于影響參與細(xì)胞分裂和調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的蛋白,而卡非佐米處理組能夠影響磷... 

【文章來源】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１泛素－蛋白酶體系統(tǒng)示意圖

?第１章緒論???（ＡＳＢＴ）【〗２］。ＵＰＳ降解系統(tǒng)調(diào)節(jié)受體信號(hào)途徑中的蛋白質(zhì)水平，如控制細(xì)胞死亡和細(xì)胞??周期的蛋白質(zhì)［１３＿１５］。??如圖１．２所示，人２６Ｓ蛋白酶體是一個(gè)非常大的（約２．４ｍｄａ）多亞單位蛋白復(fù)合物，??由１９Ｓ的調(diào)節(jié)帽和２０Ｓ的催化核心組成，內(nèi)部含有七個(gè)Ｐ亞基（ＰＩ、Ｐ２、ｐ３等），他們??負(fù)責(zé)蛋白酶體三種蛋白水解活性的催化位點(diǎn)。Ｐ５亞基由ＰＳＭｐ５基因編碼，是硼替佐米的??分子結(jié)合靶點(diǎn)。硼替佐米與ＰＳＭ｜３５的結(jié)合抑制了這種蛋白酶體亞單位的糜蛋白樣活性，??激活下游一系列效應(yīng)通路，包括穩(wěn)定１?ｋ?Ｂ抑制ＮＦｋ?Ｂ信號(hào)以及激活包括未折疊蛋白反應(yīng)??在內(nèi)的多種應(yīng)激反應(yīng)途徑，最終觸發(fā)細(xì)胞死亡｜１６】。??２６Ｓ?Ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ?Ｉ?ｍｍｕｎｏｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ??１９Ｓ?［?＾二?ｐｒ〇ｔｅ〇ｉｙｔｉｃｓｉｔｅｓ：??「ａｓｕｂ祕?ＩＦＮ－ｙ?ｘＪｆｊＣＭ?？?Ｃａｓｐａｓｅ－ｌｉｋｅ??２〇Ｓ?ｐ．ｓｕｂｕｍｔｓ?ＴＮＦ．ａ?Ｔｒｙｐｓｉｒｖｌｉｋｅ??—ａ－ｓ—ｔｓ?ｄ—??％Ｐ?Ｖ??圖１．２?２６Ｓ蛋白酶體抑制劑的分子結(jié)構(gòu)示意圖ｌ１６ｌ。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?２６Ｓ?ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ．??由于ＵＰＳ在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換中的作用以及腫瘤細(xì)胞更依賴ＵＰＳ，前人將蛋白酶體抑制劑??（Ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ?Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，?Ｐｉｓ）應(yīng)用到」腫瘤病人的治療當(dāng)中。Ｐｉｓ最初是作為在預(yù)防癌癥??相關(guān)的惡疾方面的藥物開發(fā)的。如圖１．１所示，Ｐｉｓ的作用會(huì)影響２６Ｓ蛋白酶體識(shí)別泛素??化標(biāo)記的蛋

結(jié)果??３．?１硼替佐米和卡非佐米能夠體外抑制小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的生長??為了驗(yàn)證Ｐｉｓ中硼替佐米和卡非佐米在小細(xì)胞肺癌中的抗腫瘤作用，我們使用６個(gè)小??細(xì)胞肺癌細(xì)胞系（Ｈ８２，?Ｈ５２６，?ＤＭＳ７９，?Ｈ１９６３，?Ｈ１％和Ｈ６９）來進(jìn)行后續(xù)研宄。首先，我??們使用不同濃度的硼替佐米和卡非佐米來處理小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系，然后測量細(xì)胞活性。從??細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果中我們可以看出，小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系對硼替佐米和卡非佐米非常敏感，??硼替佐米和卡非佐米能夠在非常低的濃度下抑制小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的生長（圖３．１．１）。其??中，卡非佐米對于小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的ＩＣ５Ｇ值比硼替佐米對于小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的丨Ｃ５Ｑ值低??很多，這就意味著卡非佐米對小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的殺傷作用比硼替佐米更好（圖３．１．１）。??丨：■丨：動(dòng)??〇■！?１?１?—?０－１—Ｉ?１?＂Ｉ?—??４?－２?０?２?４?－４－２０２４??Ｌｏｇ?｜ＢＴＺ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?｜?ｎＭ?丨ｘ＞ｇ?｜ＣＦＺ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?丨?ｎＭ??ＳＣＬＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?Ｈ８２?Ｈ５２６?ＤＭＳ７９?ＨＩ９６３?ＨＩ９６?Ｈ６９??ＢＴＺ?ＩＣ５０（ｎＭ）?１６．２６±５．８６?１２．８２±２．７３?３２．２４±４．６３?５９．１５±６．３２?１２．２３±１．２３?１３?９１?土?１．５２??ＣＦＺ?ＩＣ５０（ｎＭ）?０．４２土０．２１?３．７２±０．７３?２０．３５±６．７１?７．６８±３．００?０．７１?±０．３５?０．２９土０．２１??圖３．１．１硼替佐米與卡非佐米作用于小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系的生長抑制曲線。??用不同濃度（ｌ〇－３


本文編號(hào)：3232582