研究背景和目的胃癌（Gastric Cancer,GC）是現(xiàn)在全球最為常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率在我國的惡性腫瘤中高居第二位。盡管近年來在胃癌的診斷和治療上取得一定進(jìn)步,但胃癌術(shù)后復(fù)發(fā)率較高,總體預(yù)后仍不樂觀。因此,迫切需要我們進(jìn)一步探索胃癌發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)機(jī)制,發(fā)現(xiàn)新型的胃癌生物標(biāo)志物,從而找到新的胃癌診治的關(guān)鍵突破點,提高目前胃癌早期診斷和治療的水平。EphB6是Eph/ephrin家族的成員之一,屬于酪氨酸激酶受體中的一種激酶缺陷型受體。大量研究提示EphB6表達(dá)的下調(diào)或缺失與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。其在腫瘤中可能發(fā)揮著抑癌基因的作用,但這仍存在一定爭議。相對于胃癌而言,EphB6的表達(dá)和意義目前尚未取得很好的研究。本課題前期通過對胃癌患者外周血樣本ctDNA高通量測序,發(fā)現(xiàn)多例EphB6基因高頻突變�；趪鴥�(nèi)外研究進(jìn)展和前期研究結(jié)果,我們以胃癌為研究對象,將EphB6作為目的基因,明確EphB6在胃癌組織和胃癌細(xì)胞系中的表達(dá),構(gòu)建EphB6穩(wěn)定過表達(dá)的胃癌細(xì)胞系,觀察其對胃癌細(xì)胞特征性生物學(xué)行為的影響,并初步探索相關(guān)分子機(jī)制。研究方法1.應(yīng)用Wester... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Westernblot檢測胃癌細(xì)胞系中EphB6蛋白水平Figure1.1ExpressionofEphB6ingastriccancercelllinesbywesternblot

6 蛋白在上述細(xì)胞系中均存在不同程度表達(dá)，其在所檢測的胃癌細(xì)胞系遍低于正常胃上皮細(xì)胞 GES-1。一步利用 Image J 軟件將 EphB6 蛋白的顯影條進(jìn)行灰度分析，結(jié)果如發(fā)現(xiàn) MGC-803、AGS 和 SGC-7901 細(xì)胞中 EphB6 蛋白的表達(dá)水平顯S-1 細(xì)胞（**P＜0.01；***P＜0.001），其中 AGS 的表達(dá)量相對最低-45 和 GES-1 之間其 EphB6 蛋白的表達(dá)水平無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）圖 1.1 Western blot 檢測胃癌細(xì)胞系中 EphB6 蛋白水平Figure 1.1 Expression of EphB6 in gastric cancer cell lines by western blot

3.2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)檢測 EphB6 蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位分布情況為了解 EphB6 蛋白在胃癌細(xì)胞內(nèi)的定位表達(dá)情況，本研究選擇上述 EphB6 蛋白表達(dá)相對較高的 4 種細(xì)胞系（GES-1、MGC-803、MKN-45 和 SGC-7901），采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)觀察 EphB6 蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位分布情況，結(jié)果如圖 1.3所示：EphB6 在上述 4 株細(xì)胞中均存在不同程度的表達(dá)，陽性表達(dá)位于細(xì)胞質(zhì)中，呈橘黃色顆粒樣彌漫分布；胞膜和胞核未見免疫反應(yīng)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]EphB6在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床病理意義的研究[D]. 彭李博.南方醫(yī)科大學(xué) 2014



本文編號：3228714