[目的]研究表明,NF-κB與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲轉移密切相關,一般認為NF-κB主要起抗凋亡和促腫瘤作用,因此NF-κB被作為治療靶點,其抑制劑被用于癌癥治療。然而,數以千計的NF-κB抑制劑卻未能發(fā)揮預期的臨床效果。隨著研究的深入,人們發(fā)現NF-κB不同位點的磷酸化狀態(tài)可表現出截然相反的功能。國外已有研究表明,NF-κB Rel A/p65第536位絲氨酸位點磷酸化（p-p65 Ser536）對結直腸癌、乳腺癌、前列腺癌有抑制作用。本課題對p-p65 Ser536在胃癌中的表達及作用進行研究。[方法]使用組織芯片結合免疫組織化學法（SP法）檢測NF-κB p-p65 Ser536在正常胃粘膜、癌旁組織及胃癌中的表達,并分析其表達的臨床意義;Western blot檢測胃癌細胞和永生化胃粘膜上皮細胞中的表達情況;使用間接免疫熒光染色法檢測NF-κB p65 Ser536的表達及觀察其磷酸化入核情況;建立NF-κB p65第536位絲氨酸位點磷酸化與非磷酸化細胞模型,通過使用Transwell遷移、侵襲小室實驗和劃痕實驗檢測NF-κB p-p65 Ser536對胃癌細胞遷移與侵襲能力... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第1章 緒論
第2章 實驗材料與試驗方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗主要試劑
        2.1.2 實驗所需主要儀器
        2.1.3 實驗標本
        2.1.4 實驗試劑的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 免疫組化
        2.2.3 Westernblot
        2.2.4 細胞免疫熒光
        2.2.5 遷移實驗
        2.2.6 侵襲實驗
        2.2.7 劃痕實驗
        2.2.8 統(tǒng)計分析
第3章 實驗結果
    3.1 NF-κBp-p65 Ser536在胃癌細胞中低表達
    3.2 NF-κBp-p65 Ser536在胃癌細胞中低表達
    3.3 免疫熒光檢測RelA/p65 Ser536磷酸化蛋白入核情況
    3.4 質粒載體構建及胃癌SGC7901細胞轉染模型建立
    3.5 Transwell遷移與侵襲實驗結果
    3.6 劃痕實驗結果
第4章 討論
第5章 結論
參考文獻
文獻綜述
    1 NF-κB概述
    2 RelA/p65的磷酸化調控
    3 小結與展望
    參考文獻
攻讀碩士學位期間研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Treatment of gastric cancer[J]. Michele Orditura,Gennaro Galizia,Vincenzo Sforza,Valentina Gambardella,Alessio Fabozzi,Maria Maddalena Laterza,Francesca Andreozzi,Jole Ventriglia,Beatrice Savastano,Andrea Mabilia,Eva Lieto,Fortunato Ciardiello,Ferdinando De Vita.  World Journal of Gastroenterology. 2014(07)



本文編號：3201560