目的:觀察PI3K/m TOR雙重抑制劑NVP-BEZ235對體外培養(yǎng)血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞增殖、凋亡及PI3K/AKt/m TOR信號通路中關(guān)鍵分子的影響,探討PI3K/m TOR雙重抑制劑對體外培養(yǎng)血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞的作用及機(jī)制。方法:1.選取手術(shù)切除的嬰幼兒血管瘤標(biāo)本,組織塊結(jié)合酶消化法培養(yǎng)原代血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞,在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長特點(diǎn),繪制生長曲線。細(xì)胞傳至第四代后,采用第Ⅷ凝血因子相關(guān)抗原進(jìn)行鑒定。3.無血清培養(yǎng)基處理血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞24h后,干預(yù)組加入0.50μM、1.00μM NVP-BEZ235,空白對照組加入完全培養(yǎng)基,共同孵育24h。通過CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期,免疫蛋白質(zhì)印跡方法檢測PI3K、p-Akt、m TOR及p70s6k蛋白的表達(dá)水平,分析血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞增殖及凋亡變化與四種蛋白表達(dá)水平的相互關(guān)系。結(jié)果:1.血管瘤原代培養(yǎng)1周后出現(xiàn)少量貼壁細(xì)胞,3周后細(xì)胞由組織塊向周圍成同心圓式分布并且生長速度加快,4周后細(xì)胞基本鋪滿培養(yǎng)瓶底,顯微鏡下觀察可看到梭形或稍不規(guī)則形態(tài)的細(xì)胞,成鋪路石樣排列。第Ⅷ凝血因子相關(guān)抗原鑒呈陽性表達(dá)。2.N... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述:PI3K/AKt/m TOR信號通路與腫瘤的關(guān)系研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號：3199086