乳腺癌的治療是癌癥治療中最有難度的一種。術(shù)后的化學療法和放射療法一直是應(yīng)用最廣泛的傳統(tǒng)療法,但是由于傳統(tǒng)化學療法和放射療法的局限性,其對人體有著嚴重的副作用不利于病人的恢復,并且造成了部分乳腺癌的多耐藥性,這使得一些病例治療失敗。14-3-3τ在乳腺癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移中起著至關(guān)重要的作用,可以用作新的藥物靶蛋白。二咖啡�？鼘幩幔―icaffeoylquinic acid,DCQAs）是天然產(chǎn)物,具有抗氧化劑,抗微生物劑和抗炎活性。一些研究表明,某些二咖啡�？鼘幩釋ξ赴�、結(jié)腸直腸癌、黑色素瘤、乳腺癌等多種類型腫瘤具有很好的抑制作用。二咖啡�？鼘幩岬乃幮W作用的開發(fā)和探索將成為新藥開發(fā)中的另一個熱點。在本研究中,我們研究了DCQA對乳腺癌細胞MCF-7和MDA-MB-231細胞系的抗癌作用以及對三陰性乳腺癌細胞（Triple negative breast cancer,TNBC）的作用機理。首先,我們利用生物學方法和表面等離子共振技術(shù)（Surface Plasmon Resonance,SPR）分析篩選了可以與14-3-3τ結(jié)合并且對乳腺癌細胞具有明顯抑制作用的1,3-DCQA和1,5-DC... 

【文章來源】：安徽大學安徽省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
縮略詞表
第一部分 引言
    1.1 乳腺癌簡介及目前治療現(xiàn)狀
    1.2 乳腺癌靶向治療研究進展
    1.3 天然產(chǎn)物抗腫瘤介紹和研究現(xiàn)狀
    1.4 咖啡�？鼘幩岷喗楹蛻�(yīng)用現(xiàn)狀
    1.5 14 -3-3 蛋白與腫瘤的關(guān)系
    1.6 本研究目的
第二部分 材料與方法
    2.1 材料試劑
    2.2 主要儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細胞培養(yǎng)
        2.3.2 細胞傳代
        2.3.3 細胞凍存
        2.3.4 細胞復蘇
        2.3.5 細胞計數(shù)
        2.3.6 細胞總蛋白質(zhì)的提取
        2.3.7 蛋白濃度的測定
        2.3.8 蛋白免疫印跡(Western Blot分析)
        2.3.9 MTT法
        2.3.10 軟瓊脂克隆形成實驗
        2.3.11 Transwell細胞遷移實驗
        2.3.12 流式細胞儀檢測細胞周期
        2.3.13 流式細胞儀檢測細胞凋亡
        2.3.14 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        2.3.15 挑單克隆搖菌
        2.3.16 質(zhì)粒提取
        2.3.17 細胞轉(zhuǎn)染
        2.3.18 真核細胞轉(zhuǎn)錄組測序分析
        2.3.19 細胞總RNA的提取
        2.3.20 qRT-PCR驗證分析
        2.3.21 統(tǒng)計學分析
第三部分 實驗結(jié)果
    3.1 14 -3-3τ表達特異性檢驗
    3.2 1,3-DCQA與1,5-DCQA對乳腺癌細胞抑制作用比較
        3.2.1 1 ,3-DCQA與1,5-DCQA對乳腺癌細胞增殖的影響
        3.2.2 1 ,3-DCQA與1,5-DCQA對 MCF-7 細胞克隆形成能力的影響
        3.2.3 1 ,3-DCQA與1,5-DCQA對 MDA-MB-231 細胞遷移能力的影響
        3.2.4 1 ,3-DCQA與1,5-DCQA影響乳腺癌細胞凋亡的比較
    3.3 1,3-DCQA誘導乳腺癌細胞凋亡的研究
        3.3.1 1 ,3-DCQA誘導MDA-MB-231 細胞凋亡的形態(tài)學觀察
        3.3.2 1 ,3-DCQA誘導乳腺癌細胞的死亡方式分析
    3.4 14 -3-3τ是1,3-DCQA的靶標蛋白
    3.5 1 ,3-DCQA抑制MDA-MB-231 細胞增值的信號通路分析
    3.6 1 ,3-DCQA對乳腺癌細胞中14-3-3蛋白亞型影響分析
    3.7 1 ,3-DCQA調(diào)節(jié)乳腺癌細胞中PI3K/AKT和RAF/ERK信號通路
第四部分 討論
參考文獻
碩士期間論文發(fā)表情況
致謝



本文編號：3180427