發(fā)布時間：2021-05-09 12:39

　　目的探索長鏈非編碼RNA（lncRNA）肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄子1（metastasis20associated20lung20adenocarcinoma20transcript201,MALAT1）在肝細(xì)胞癌（hepatocellular20carcinoma,HCC;簡稱肝癌）細(xì)胞中是否可作為競爭性內(nèi)源RNA（competing20endogenous20RNA,ceRNA）發(fā)揮促遷移功能。方法在Hep20G2細(xì)胞中通過瞬時轉(zhuǎn)染MALAT1的小干擾RNA（small20interfering20RNA,siRNA）敲低MALAT1的表達(dá);利用Transwell實驗檢測敲低MALAT1后對細(xì)胞遷移能力的影響;利用RNA20pull-down實驗確認(rèn)MALAT1是否可直接吸附miR-126*;熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR（quantitative20reverse20transcription20PCR,qRT-PCR）和Western印跡檢測敲低MALAT1后miR-126*靶基因的mRNA和蛋白水平的變化;利用公共數(shù)據(jù)集癌癥基因組圖譜（The20Cancer20Genome20Atlas,T... 

【文章來源】：軍事醫(yī)學(xué). 2017,41(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞株
    1.2 主要試劑
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.4 siRNA的瞬時轉(zhuǎn)染
    1.5 RNA的提取及qRT-PCR檢測RNA表達(dá)量
    1.6 蛋白提取和Western印跡實驗
    1.7 細(xì)胞遷移實驗
    1.8 載體構(gòu)建
    1.9 RNA pull-down實驗
    1.1 0 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 敲低MALAT1可顯著抑制肝癌細(xì)胞的遷移能力
    2.2 MALAT1可直接吸附miR-126*
    2.3 MALAT1可正向調(diào)控miR-126*的靶基因CXCL12的表達(dá)
    2.4 MALAT1和miR-126*在HCC臨床樣本中異常表達(dá)且與患者預(yù)后顯著相關(guān)
3 討論



本文編號：3177319