發(fā)布時間：2021-04-27 14:18

　　目的:本實驗研究組蛋白去乙�；敢种苿┣乓志谹（Trichostatina A）和帕比司他（Panobinostat LBH589）對遺傳性牙齦纖維瘤來源間充質(zhì)干細胞（H-GMSC）的細胞周期、增殖凋亡是否有影響及其相關分子機制,為遺傳性牙齦纖維瘤病的臨床治療提供新的手段。方法:1.遺傳性牙齦纖維瘤來源間充干細胞（H-GMSC）的分離、培養(yǎng)及鑒定。第三代健康牙齦間充質(zhì)干細胞（N-GMSC）由本課題組內(nèi)提供。H-GMSC分離自遺傳性牙齦纖維瘤病患者牙齦組織,選取生長狀態(tài)良好遺傳性牙齦纖維瘤來源間充質(zhì)干細胞,流式檢測H-GMSC表面的干細胞標記分子的表達情況。并對分離所得牙齦間充質(zhì)干細胞進行成骨成脂分化誘導,分別通過茜素紅染色、油紅O染色鑒定間充質(zhì)干細胞成骨成脂的多潛能分化能力。2.組蛋白去乙�；敢种苿┣乓志谹（Trichostatina A TSA）和帕比司他（Panobinostat LBH589）對H-GMSC的細胞周期、增殖凋亡的調(diào)節(jié)及其分子機制通過MTT和Annexin V法檢測不同濃度TSA和LBH589,即0 nM,50 nM,100 nM,200 nM,500 n... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、遺傳性牙齦纖維瘤來源間充質(zhì)干細胞（H-GMSC）的分離培養(yǎng)鑒定
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實驗設備及試劑
        1.1.2 牙齦組織獲取
        1.1.3 人牙齦間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)
        1.1.4 倒置顯微鏡觀察
        1.1.5 流式細胞術檢測H-GMSC表面抗原
        1.1.6 成骨誘導及染色
        1.1.7 成脂誘導及染色
    1.2 結果
        1.2.1 顯微鏡觀察細胞形態(tài)
        1.2.2 流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)H-GMSC表達干細胞表面標志分子
        1.2.3 H-GMSC體外成骨誘導分化具有礦化結節(jié)形成能力
        1.2.4 H-GMSC體外成脂誘導分化油紅O染色呈陽性
    1.3 討論
    1.4 小結
二、組蛋白去乙�；敢种苿⿲-GMSC細胞周期、增殖凋亡的調(diào)節(jié)作用及其分子機制
    2.1 對象和方法
        2.1.1 主要實驗試劑及設備
        2.1.2 MTT法檢測不同濃度TSA和 LBH589對H-GMSC增殖的影響…
        2.1.3 AnnexinV檢測不同濃度TSA和 LBH589對H-GMSC凋亡的影響
        2.1.4 流式細胞術檢測不同濃度TSA和 LBH589對H-GMSC細胞周期的影響
Waf/Cip1的表達">        2.1.5 半定量RT-PCR及 Western-blot檢測TSA和 LBH589對H-GMSC中p21^Waf/Cip1的表達
    2.2 結果
        2.2.1 MTT法檢測顯示TSA和 LBH589 抑制H-GMSC增殖并具有濃度依賴性
        2.2.2 AnnexinV檢測顯示TSA和 LBH589 促進H-GMSC凋亡并具有濃度依賴性
        2.2.3 流式細胞顯示TSA和 LBH589 影響H-GMSC細胞周期的G1 期
Waf/Cip1調(diào)節(jié)H-GMSC細胞周期抑制細胞增殖">        2.2.4 TSA和 LBH589 通過上調(diào)p21^Waf/Cip1調(diào)節(jié)H-GMSC細胞周期抑制細胞增殖
    2.3 討論
    2.4 小結
結論
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 組蛋白乙�；揎椩谀[瘤發(fā)生、發(fā)展、治療中的作用研究進展
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3163620