【研究背景】腎細(xì)胞癌（簡(jiǎn)稱(chēng)腎癌）是泌尿科常見(jiàn)的腫瘤,近年來(lái)每年新發(fā)病例數(shù)一直顯現(xiàn)逐年上升的情形。腎癌的早期癥狀不明顯,診斷時(shí)約1/4-1/3病人已發(fā)生轉(zhuǎn)移。發(fā)生轉(zhuǎn)移的腎癌往往失去手術(shù)機(jī)會(huì),但發(fā)展至此階段的病人藥物治療效果不佳,因此需要進(jìn)一步研究腎癌的發(fā)生機(jī)制,為治療提供新的方向。CARD10（半胱天冬酶募集結(jié)構(gòu)蛋白10）又叫做CARMA3,已經(jīng)有研究表明CARD10的表達(dá)與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),其作用主要是通過(guò)激活轉(zhuǎn)錄因子NF-κB促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。然而,此信號(hào)通路在腎癌中的是否存在仍不清楚�！狙芯磕康摹緾ARD10是否在腎癌細(xì)胞中高表達(dá),抑制CARD10表達(dá)是否能抑制腎癌細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和促進(jìn)其凋亡,及其能否通過(guò)NF-κB信號(hào)通路進(jìn)行調(diào)節(jié)?【研究方法】1.首先培養(yǎng)ACHN細(xì)胞、786-O細(xì)胞和HK-2細(xì)胞,并提取其總蛋白,使用蛋白免疫印跡法檢測(cè)CARD10在三種細(xì)胞的表達(dá)情況。2.然后用sh RNA進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染腎癌ACHN和786-O細(xì)胞,形成不含目的基因（sh GFP）轉(zhuǎn)染的陰性對(duì)照組和含目的基因（特異性CARD10sh RNA）轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞,在蛋白分子水平檢測(cè)其... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

經(jīng)特異性CARD10shRNA轉(zhuǎn)染后，腎癌細(xì)胞（786-O和ACHN）的增殖活力明顯降低

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文25圖3：經(jīng)轉(zhuǎn)染后，腎癌786-O和ACHN細(xì)胞DNA復(fù)制受到明顯抑制。A,C:786-O-shCARD10與另外兩組細(xì)胞相比，G1期細(xì)胞百分比較高，而S期細(xì)胞百分比減低（*p<0.05，**p<0.05）；786-O和786-O-shGFP組細(xì)胞未見(jiàn)明顯差異。B,D:ACHN-shCARD10與ACHN和ACHN-shGFP組細(xì)胞相比，G1期細(xì)胞比例較高，而S期細(xì)胞比例減低（*p<0.05）。Fig3:GenereplicationofRCCcellswassignificantlyinhibitedbyspecificCARD10shRNAtransfection.A,C:Comparedwith786-O-shCARD10and786-O-shGFP,thepercentageofG1stagecellswashigher,whilethatofSstagecellswaslower(*p<0.05,**p<0.05);therewasnosignificantdifferencebetween786-Oand786-O-shGFP.B,D:comparedwithACHNandACHN-shGFP,theproportionofcellsinG1phasewashigher,whilethatinSphasewaslower(*p<0.05).CDABCDA圖4：經(jīng)特異性CARD10shRNA轉(zhuǎn)染后，腎癌細(xì)胞（786-O和ACHN）凋亡比率明顯升高。

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文25圖3：經(jīng)轉(zhuǎn)染后，腎癌786-O和ACHN細(xì)胞DNA復(fù)制受到明顯抑制。A,C:786-O-shCARD10與另外兩組細(xì)胞相比，G1期細(xì)胞百分比較高，而S期細(xì)胞百分比減低（*p<0.05，**p<0.05）；786-O和786-O-shGFP組細(xì)胞未見(jiàn)明顯差異。B,D:ACHN-shCARD10與ACHN和ACHN-shGFP組細(xì)胞相比，G1期細(xì)胞比例較高，而S期細(xì)胞比例減低（*p<0.05）。Fig3:GenereplicationofRCCcellswassignificantlyinhibitedbyspecificCARD10shRNAtransfection.A,C:Comparedwith786-O-shCARD10and786-O-shGFP,thepercentageofG1stagecellswashigher,whilethatofSstagecellswaslower(*p<0.05,**p<0.05);therewasnosignificantdifferencebetween786-Oand786-O-shGFP.B,D:comparedwithACHNandACHN-shGFP,theproportionofcellsinG1phasewashigher,whilethatinSphasewaslower(*p<0.05).CDABCDA圖4：經(jīng)特異性CARD10shRNA轉(zhuǎn)染后，腎癌細(xì)胞（786-O和ACHN）凋亡比率明顯升高。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[4]表皮生長(zhǎng)因子及其作用機(jī)制[J]. 胡瑩瑩,王琦,陳瑛.  哈爾濱師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào). 2013(03)
[5]CARMA3: A novel scaffold protein in regulation of NF-κB activation and diseases[J]. Jiyuan Sun, Department of Neuro-Oncology, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, Texas, TX 77030, United States.  World Journal of Biological Chemistry. 2010(12)



本文編號(hào)：3143430