發(fā)布時間：2021-04-16 19:00

　　目的:研究miR-937-5p靶向Rab1A基因對于胃癌細胞增殖與侵襲能力的影響,為胃癌的早期診斷提供一定的理論基礎。方法:本研究選用人胃癌細胞SGC 7901,MGC-803及胃正常上皮細胞GES-1,首先采用熒光定量PCR分別檢測三種細胞中miR-937-5p和Rab1A mRNA的表達水平,進一步采用免疫印跡檢測三種細胞中Rab1A蛋白表達水平。其次采用miR-937-5p mimics及miR-937-5p inhibitor轉染人胃癌細胞MGC-803后,熒光定量PCR檢測Rab1A mRNA的表達水平,免疫印跡檢測Rab1A蛋白表達水平。此外,利用雙熒光素酶報告基因實驗驗證miR-937-5p是否靶向結合Rab1A基因的3’-UTR區(qū)。分別采用過表達Rab1A質粒及siRNA-Rab1A轉染人胃癌細胞MGC-803后,CCK-8法檢測細胞增殖能力的變化;流式細胞術檢測凋亡水平的變化;克隆形成實驗檢測細胞克隆能力的改變;transwell檢測細胞侵襲能力的變化;并分別采用熒光定量PCR檢測PCNA、MMP-2、MMP-9及TIMP-1的mRNA表達水平,免疫印跡檢測PCNA、... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)（400倍）

21圖3.2miRNA-937-5p和內參U6擴增曲線及熔點曲線圖3.3miRNA-937-5p在三種細胞中的相對表達量GES-1VSSGC7901，MGC-803，＊P＜0.05miRNA-937-5p熔點曲線U6熔點曲線

21圖3.2miRNA-937-5p和內參U6擴增曲線及熔點曲線圖3.3miRNA-937-5p在三種細胞中的相對表達量GES-1VSSGC7901，MGC-803，＊P＜0.05miRNA-937-5p熔點曲線U6熔點曲線

【參考文獻】：
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本文編號：3141993