目的:研究miR-937-5p靶向Rab1A基因?qū)τ谖赴┘?xì)胞增殖與侵襲能力的影響,為胃癌的早期診斷提供一定的理論基礎(chǔ)。方法:本研究選用人胃癌細(xì)胞SGC 7901,MGC-803及胃正常上皮細(xì)胞GES-1,首先采用熒光定量PCR分別檢測(cè)三種細(xì)胞中miR-937-5p和Rab1A mRNA的表達(dá)水平,進(jìn)一步采用免疫印跡檢測(cè)三種細(xì)胞中Rab1A蛋白表達(dá)水平。其次采用miR-937-5p mimics及miR-937-5p inhibitor轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞MGC-803后,熒光定量PCR檢測(cè)Rab1A mRNA的表達(dá)水平,免疫印跡檢測(cè)Rab1A蛋白表達(dá)水平。此外,利用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-937-5p是否靶向結(jié)合Rab1A基因的3’-UTR區(qū)。分別采用過(guò)表達(dá)Rab1A質(zhì)粒及siRNA-Rab1A轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞MGC-803后,CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡水平的變化;克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞克隆能力的改變;transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力的變化;并分別采用熒光定量PCR檢測(cè)PCNA、MMP-2、MMP-9及TIMP-1的mRNA表達(dá)水平,免疫印跡檢測(cè)PCNA、... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)（400倍）

21圖3.2miRNA-937-5p和內(nèi)參U6擴(kuò)增曲線及熔點(diǎn)曲線圖3.3miRNA-937-5p在三種細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)量GES-1VSSGC7901，MGC-803，＊P＜0.05miRNA-937-5p熔點(diǎn)曲線U6熔點(diǎn)曲線

21圖3.2miRNA-937-5p和內(nèi)參U6擴(kuò)增曲線及熔點(diǎn)曲線圖3.3miRNA-937-5p在三種細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)量GES-1VSSGC7901，MGC-803，＊P＜0.05miRNA-937-5p熔點(diǎn)曲線U6熔點(diǎn)曲線

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3141993