癌癥又稱惡性腫瘤,已成為最為嚴(yán)重的全球公共健康問題之一,每年約有500萬人死亡,因此探究癌癥發(fā)展機(jī)制對于腫瘤治療具有重要意義。半乳凝素（Galectins,簡稱Gals）是一類能夠通過糖識別結(jié)構(gòu)域（CRD）特異性識別并結(jié)合β-D-半乳糖苷的蛋白質(zhì),目前共發(fā)現(xiàn)16個家族成員,參與腫瘤發(fā)生發(fā)展的各個階段,包括誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡,促進(jìn)腫瘤免疫逃逸。目前對半乳凝素誘導(dǎo)的T細(xì)胞凋亡研究只錨定單個家族成員,本論文旨在比較探究各種半乳凝素誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡的強(qiáng)弱及其分子機(jī)制。本論文制備了七種半乳凝素,分別是Gal-1、Gal-2、Gal-3、Gal-7、Gal-8、Gal-10和Gal-13,在不同濃度下孵育T細(xì)胞后通過Western Blotting和流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果表明,Gal-1、Gal-3、Gal-7和Gal-8能夠誘導(dǎo)Jurkat T細(xì)胞凋亡,Gal-8誘導(dǎo)凋亡所需濃度最低;Gal-3和Gal-8也能誘導(dǎo)CCRF-CEM T細(xì)胞凋亡。在此基礎(chǔ)上,研究各半乳凝素誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。鑒于Gal-3通過ROS--ERK和PKC--ERK兩條信號通路誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡,本論文首先檢測了各種半... 

【文章來源】：東北師范大學(xué)吉林省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

半乳凝素家族蛋白結(jié)構(gòu)

一些糖蛋白結(jié)合，如層粘連蛋白、纖連蛋白、彈性蛋白等[63-65]。半乳凝素可以以雙價或多價的方式結(jié)合配體，一些單 CRD 半乳凝素以二聚體形式結(jié)合配體，兩個 CRD 的半乳凝素具有兩個碳水化合物結(jié)合位點(diǎn)，Gal-3 與多價碳水化合物結(jié)合時形成寡聚體。它們可以交聯(lián)細(xì)胞表面的糖復(fù)合物，像其他受體-配體機(jī)制一樣，觸發(fā)跨膜信號的級聯(lián)反應(yīng)（圖 1-2A 所示），半乳凝素能夠引起多種多價糖復(fù)合物的聚集，導(dǎo)致晶格形成[66]。半乳凝素的二價和多價的結(jié)合性質(zhì)還使得它們能夠橋接相同或不同類型的兩個細(xì)胞，允許同型或異型聚集，以及將細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)相連接。通過這種機(jī)制，半乳凝素調(diào)節(jié)包括有絲分裂、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期進(jìn)程的過程。

圖 1-3 半乳凝素與腫瘤表型轉(zhuǎn)化[66]A，Gal-1 和 Gal-3 通過與致癌基因如致癌 Ras（HRAS 和 KRAS）相互作用介導(dǎo)腫瘤轉(zhuǎn)化，并促進(jìn) Ras 介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)（RAF1-ERK1/2 和 PI3K-AKT）；B，半乳凝素通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程來控制腫瘤進(jìn)展。Gal-3 調(diào)節(jié)細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白（細(xì)胞周期蛋白 A、D 和 E）以及細(xì)胞周期抑制劑 p2（WAF1）和 p27（KIP1）的水平，導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯，Gal-1 和 Gal-12 誘導(dǎo)細(xì)胞周期不同階段的停滯；C，半乳凝素調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞凋亡。外源 Gal-1 和 Gal-9 可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，Gal-7 和 Gal-12 通過細(xì)胞內(nèi)機(jī)制促進(jìn)細(xì)胞凋亡，Gal-3 具有抗凋亡功能，可轉(zhuǎn)移至核周膜和線粒體，易位取決于 Gal-相互作用蛋白 synexin（一種磷脂和 Ca2+結(jié)合蛋白），Gal-3 在調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡中的作用取決于其亞細(xì)胞定位：細(xì)胞質(zhì) Gal-3 抗細(xì)胞凋亡，細(xì)胞核 Gal-3 促細(xì)胞凋亡。1.2.2 半乳凝素與腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過程主要包括腫瘤侵入周圍組織，通過血液或淋巴管傳播并在遠(yuǎn)處生長，腫瘤轉(zhuǎn)移的因素包括細(xì)胞粘附的改變、遷移或運(yùn)動性和侵襲性的增加。轉(zhuǎn)移主要涉


本文編號：3139524