目的:研究下調(diào)自噬相關(guān)基因Atg5的表達對人白血病阿霉素耐藥細胞株K562/ADM化療敏感性的影響。方法:1.體外培養(yǎng)K562/ADM細胞、NC-K562/ADM細胞、Atg5siRNA-K562/ADM細胞。2.利用小分子干擾RNA（siRNA）技術(shù)針對自噬相關(guān)基因Atg5設(shè)計合成特異性Atg5siRNA及與基因無同源性的陰性對照組scramble siRNA,然后在Lipofectamine^TM2000介導(dǎo)下分別轉(zhuǎn)染至K562/ADM細胞,繼續(xù)培養(yǎng)48小時后,通過蛋白印跡（Western Blotting）技術(shù)檢測各細胞組（K562/ADM細胞、NC-K562/ADM細胞、Atg5siRNA-K562/ADM細胞）中Atg5蛋白的表達水平,驗證Atg5siRNA沉默Atg5基因表達的效果。3.在Atg5siRNA下調(diào)Atg5蛋白表達的基礎(chǔ)上,同樣條件下予不同濃度組阿霉素處理各組細胞,48小時后再運用細胞增殖-毒性檢測（CCK-8）方法分別檢測K562/ADM細胞組、NC-K562/ADM細胞組、Atg5siRNA-K562/ADM細胞組中細胞的增殖情況。4.下... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Atg5siRNA轉(zhuǎn)染K562/ADM細胞48h后，普通光鏡（×200）下觀察各組細ABC

【參考文獻】：
期刊論文
[1]靶向Atg5的siRNAs促進肝癌細胞HCC-LM3失巢凋亡的實驗研究[J]. 鄧歡,藺朝妮,胡鵬,王志毅,羅敏.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2017(15)
[2]ATG5敲低后抑制人肺癌細胞H1299自噬并增強南蛇藤素誘導(dǎo)的細胞凋亡[J]. 曾曉剛,葛明建.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2017(04)
[3]細胞自噬作用及其在相關(guān)疾病中的重要生理意義——2016年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎解讀[J]. 牛超,金利泰.  中國醫(yī)藥生物技術(shù). 2017(01)
[4]自噬相關(guān)基因5在卵巢腫瘤患者中的表達及對卵巢癌細胞系SKOV3增殖影響的意義研究[J]. 王婷,賴慧玲,朱濤.  中國婦幼保健. 2015(05)
[5]細胞自噬與腫瘤耐藥[J]. 張海亮,唐圣松.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2014(03)
[6]自噬與泛素化蛋白降解途徑的分子機制及其功能[J]. 陳科,程漢華,周榮家.  遺傳. 2012(01)

博士論文
[1]Atg5蛋白調(diào)控晚期胞內(nèi)體和溶酶體的生成[D]. 彭俊雅.清華大學(xué) 2015
[2]HMGB1調(diào)控白血病細胞自噬以及化療耐藥的實驗研究[D]. 劉麗英.中南大學(xué) 2011

碩士論文
[1]自噬基因Atg3和Atg5在兒童急性白血病骨髓單個核細胞中的表達及臨床意義[D]. 敖苗.鄭州大學(xué) 2013
[2]自噬性死亡在結(jié)腸癌化療中的作用及其機制探討[D]. 熊海燕.第二軍醫(yī)大學(xué) 2009



本文編號：3130556