目的:研究下調(diào)自噬相關(guān)基因Atg5的表達(dá)對人白血病阿霉素耐藥細(xì)胞株K562/ADM化療敏感性的影響。方法:1.體外培養(yǎng)K562/ADM細(xì)胞、NC-K562/ADM細(xì)胞、Atg5siRNA-K562/ADM細(xì)胞。2.利用小分子干擾RNA（siRNA）技術(shù)針對自噬相關(guān)基因Atg5設(shè)計(jì)合成特異性Atg5siRNA及與基因無同源性的陰性對照組scramble siRNA,然后在Lipofectamine^TM2000介導(dǎo)下分別轉(zhuǎn)染至K562/ADM細(xì)胞,繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)后,通過蛋白印跡（Western Blotting）技術(shù)檢測各細(xì)胞組（K562/ADM細(xì)胞、NC-K562/ADM細(xì)胞、Atg5siRNA-K562/ADM細(xì)胞）中Atg5蛋白的表達(dá)水平,驗(yàn)證Atg5siRNA沉默Atg5基因表達(dá)的效果。3.在Atg5siRNA下調(diào)Atg5蛋白表達(dá)的基礎(chǔ)上,同樣條件下予不同濃度組阿霉素處理各組細(xì)胞,48小時(shí)后再運(yùn)用細(xì)胞增殖-毒性檢測（CCK-8）方法分別檢測K562/ADM細(xì)胞組、NC-K562/ADM細(xì)胞組、Atg5siRNA-K562/ADM細(xì)胞組中細(xì)胞的增殖情況。4.下... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Atg5siRNA轉(zhuǎn)染K562/ADM細(xì)胞48h后，普通光鏡（×200）下觀察各組細(xì)ABC

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]靶向Atg5的siRNAs促進(jìn)肝癌細(xì)胞HCC-LM3失巢凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 鄧歡,藺朝妮,胡鵬,王志毅,羅敏.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2017(15)
[2]ATG5敲低后抑制人肺癌細(xì)胞H1299自噬并增強(qiáng)南蛇藤素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[J]. 曾曉剛,葛明建.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2017(04)
[3]細(xì)胞自噬作用及其在相關(guān)疾病中的重要生理意義——2016年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)解讀[J]. 牛超,金利泰.  中國醫(yī)藥生物技術(shù). 2017(01)
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[5]細(xì)胞自噬與腫瘤耐藥[J]. 張海亮,唐圣松.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2014(03)
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博士論文
[1]Atg5蛋白調(diào)控晚期胞內(nèi)體和溶酶體的生成[D]. 彭俊雅.清華大學(xué) 2015
[2]HMGB1調(diào)控白血病細(xì)胞自噬以及化療耐藥的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 劉麗英.中南大學(xué) 2011

碩士論文
[1]自噬基因Atg3和Atg5在兒童急性白血病骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)及臨床意義[D]. 敖苗.鄭州大學(xué) 2013
[2]自噬性死亡在結(jié)腸癌化療中的作用及其機(jī)制探討[D]. 熊海燕.第二軍醫(yī)大學(xué) 2009



本文編號：3130556