發(fā)布時間：2021-04-01 11:33

　　肺癌是最常見的惡性腫瘤之一,并且其發(fā)病率逐年遞增,其中大約85%-90%的肺癌病例被診斷為非小細(xì)胞肺癌。非小細(xì)胞肺癌主要分為肺腺癌、鱗狀細(xì)胞癌和大細(xì)胞癌等,其中最常見的是肺腺癌。非小細(xì)胞肺癌患者的5年生存率很低,根據(jù)腫瘤發(fā)生的部位和分期的不同,患者生存率在4%-17%之間。因此,探索新的生物標(biāo)記（癌基因/抑癌基因）對非小細(xì)胞肺癌的預(yù)防、診斷和治療起到重要的作用。Wnt信號通路與癌細(xì)胞的增殖、侵襲相關(guān)。Wnt信號通路中,Wnt蛋白與Frizzled（Fz）家族受體相互結(jié)合,包括脂蛋白受體相關(guān)蛋白LRP5/6,從而抑制GSK3復(fù)合物的活性,促使了β-catenin在細(xì)胞漿中的積聚,并進(jìn)入細(xì)胞核,之后通過與TCF/LEF轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,誘導(dǎo)Wnt通路靶基因的激活。TRIP13是ATPase家族蛋白的成員,是最早在小鼠中發(fā)現(xiàn)的一種有絲分裂檢查點(diǎn)相關(guān)蛋白。大量研究證實(shí),TRIP13可以調(diào)控有絲分裂檢查點(diǎn)相關(guān)蛋白并且對前列腺癌、結(jié)腸直腸癌、上皮性卵巢癌等腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。我們的研究發(fā)現(xiàn)TRIP13在肺鱗癌及肺腺癌中均高表達(dá),且TRIP13的表達(dá)水平與肺癌患者的預(yù)后相關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,TRIP1... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

TRIP13在肺癌中的表達(dá)情況及其與患者生存率的關(guān)系

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10高于對照組（P<0.05）。而干擾TRIP13的表達(dá)后，細(xì)胞的增殖率和菌落數(shù)明顯低于對照組細(xì)胞（P<0.05）（圖3a–b）。Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)測定表明，過表達(dá)TRIP13之后細(xì)胞的侵襲能力明顯高于對照組（P<0.05），而干擾TRIP13之后，細(xì)胞的侵襲能力明顯低于對照組（圖3c）。圖2TRIP13在肺癌細(xì)胞中的定位和表達(dá)情況。（a）通過免疫熒光檢測（400×），發(fā)現(xiàn)在正常支氣管上皮細(xì)胞（HBE）和肺癌細(xì)胞中，TRIP13定位于細(xì)胞質(zhì)。（b）Westernblot分析TRIP13在細(xì)胞系中的蛋白表達(dá)水平，GAPDH作為內(nèi)參。

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文11圖3TRIP13對肺癌細(xì)胞增殖，集落形成和侵襲能力的影響。（a）在A549和H1299細(xì)胞中使用CCK8進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測，（b）集落形成實(shí)驗(yàn)檢測（c）Matrigel侵襲檢測。*，P<0.05，**，P<0.01；NC，陰性對照細(xì)胞；TRIP13，使用TRIP13質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞；SiNC，使用對照siRNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞；SiTRIP13，使用TRIP13-siRNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。3.3TRIP13促進(jìn)Wnt信號通路的激活本研究檢測了Wnt信號通路相關(guān)蛋白在肺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況。與對照組相比，在H1299和A549細(xì)胞系中過表達(dá)TRIP13后，LRP6，Activeβ-catenin和轉(zhuǎn)錄因子TCF4和LEF1的表達(dá)水平上調(diào)，而在干擾TRIP13后，蛋白水平發(fā)生下調(diào)。GSK3β的表達(dá)在TRIP13過表達(dá)后降低，在干擾TRIP13后表達(dá)升高。此外，Wnt信號通路相關(guān)靶蛋白（包括c-Myc，MMP7和CyclinD1）的水平在TRIP13過表達(dá)后表達(dá)升高，而在干擾TRIP13后，蛋白水平發(fā)生下調(diào)。（圖4）


本文編號：3113262