背景:巨噬細(xì)胞是參與固有免疫的重要細(xì)胞,根據(jù)不同的微環(huán)境信號(hào)而表現(xiàn)出極高的可塑性是巨噬細(xì)胞重要的生物學(xué)特點(diǎn)。腫瘤組織招募外周循環(huán)中的單核細(xì)胞后,誘導(dǎo)其成為腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞,主要表現(xiàn)出M2型巨噬細(xì)胞的極化特點(diǎn)和功能特點(diǎn),是參與腫瘤免疫逃逸的重要機(jī)制,也被認(rèn)為與非霍奇金淋巴瘤腫瘤發(fā)生有著密切關(guān)系。而機(jī)體參與腫瘤免疫逃逸的另一關(guān)鍵所在是以PD-1為代表的免疫檢查點(diǎn)。PD-1主要表達(dá)于活化的T細(xì)胞表面,但在B細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、DC細(xì)胞表面均可表達(dá)。PD-1的表達(dá)具有抑制T細(xì)胞活化和活性的作用。但其在巨噬細(xì)胞表面表達(dá)所帶來的影響尚未能完全理解。通過某些疾病模型,我們發(fā)現(xiàn)PD-1陽性的巨噬細(xì)胞的抗炎功能出現(xiàn)缺損,從而促進(jìn)免疫逃逸;PD-1陽性單核細(xì)胞的增多,會(huì)促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞分泌IL-10,造成巨噬細(xì)胞功能紊亂。PD-1陽性的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞比例可能隨著腫瘤分期的進(jìn)展而增加,同時(shí)巨噬細(xì)胞表面PD-1的表達(dá)會(huì)抑制巨噬細(xì)胞吞噬功能�；谝陨侠碚�,我們?cè)噲D通過檢測(cè)非霍奇金淋巴瘤患者病理組織中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞與PD-1的共表達(dá)情況,并初步探索PD-1表達(dá)水平對(duì)非霍奇金淋巴瘤中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞功能的... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１Ｔ－ＮＨＬ病理組織中ＴＡＭｓ表型（ＣＤ６８、ＣＤ２０６）表達(dá)情況??

為１７３０±１３８．６；而作為對(duì)照的ＰＤ－１表達(dá)野生型ＴＨＰ－１細(xì)胞株（ＭＯＣＫ組）中，??ＰＤＣＤ１?的ＡＣｔ?值為?１５．８４士０．１１，其表達(dá)豐度（２＿ＡＡＣｔ）為?１．００±０．０７，因此?ＯＥ?組??中ＰＤＣＤ１基因表達(dá)水平顯著高于ＭＯＣＫ組（；？＝０．００２，見圖３）。??２０００ｎ?Ｉ?Ｉ??ｐ＝０．００２?—ｌｙ—??趔?１５００－??價(jià)??刼醫(yī)??５〇〇－??ｎ??ＵＪ?１?１???圖３?ＯＥ組與ＭＯＣＫ組ＴＨＰ－１細(xì)胞株中ＰＤＣＤ－１基因表達(dá)豐度??３．３流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ＰＤ－１髙表達(dá)ＴＨＰ－１細(xì)胞株ＰＤ－１表達(dá)情況??根據(jù)流式結(jié)果顯示，ＯＥ組ＰＤ－１平均熒光強(qiáng)度為１０３８．０５，ＭＯＣＫ組ＰＤ－１??平均熒光強(qiáng)度為１５．７３，因此ＯＥ組ＰＤ－１表達(dá)強(qiáng)度顯著高于ＭＯＣＫ組（；？＜０．０５，??如圖４。??２８??

組ＰＤ－１表達(dá)的Ｄｏｔ－Ｇｒａｐｈ和Ｈｉｓｔｏｇｒａｍ，?Ｃ和Ｄ分別為ＭＯＣＫ組ＰＤ－１表達(dá)??的?Ｄｏｔ－Ｇｒａｐｈ?和?Ｈｉｓｔｏｇｒａｍ。??４．討論??在本課題的第二部分，我們通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式構(gòu)建了?ＰＤ－１高表達(dá)的單??核細(xì)胞株。我們選擇了?ＴＨＰ－１細(xì)胞株作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，該細(xì)胞株來源于急性單核??細(xì)胞白血病，經(jīng)驗(yàn)證，其野生型ＰＤ－１表達(dá)豐度低，有助于與構(gòu)建的ＰＤ－１高表??達(dá)細(xì)胞株形成有效的對(duì)比。而ＴＨＰ－１細(xì)細(xì)胞再適宜濃度的ＰＭＡ刺激后，會(huì)貼壁??分化為巨噻細(xì)胞，進(jìn)而可以受到細(xì)胞因子、腫瘤分泌因子的影響，分化成不同類??型的巨噬細(xì)胞，并表現(xiàn)出相應(yīng)的巨噬細(xì)胞功能特點(diǎn)。??慢病毒轉(zhuǎn)染則主要利用慢病毒載體，將目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞內(nèi)表達(dá)或復(fù)制，??而慢病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科，以１型人免疫缺陷病毒為代表，不同于普通病毒載??體可能因隨機(jī)整合引起突變、經(jīng)免疫反應(yīng)而迅速降解、外源基因容易發(fā)生基因沉??默等特點(diǎn)［５７］，慢病毒載體具有轉(zhuǎn)移基因片段容量大、不易誘發(fā)宿主免疫反應(yīng)、安??全性較好，不經(jīng)能感染分裂細(xì)胞，且能感染終末分化細(xì)胞和非分裂細(xì)胞的特點(diǎn)，??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]用慢病毒載體制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究進(jìn)展[J]. 鄧?yán)^先,沈偉.  中國生物工程雜志. 2004(09)



本文編號(hào)：3108658