目的：觀察桂皮醛對腸癌細(xì)胞增殖、侵襲與黏附、細(xì)胞凋亡的影響及與PI3K/Akt信號通路的關(guān)系。方法：①MTT法檢測不同濃度桂皮醛（0,20,40,60,80μg/ml）作用于人腸癌細(xì)胞（Lovo、 SW480、HCT116） 12、24、48h后對細(xì)胞增殖能力的影響；②根據(jù)第一部分實驗最終采用(0，20,40,80μg/ml的濃度及給藥后24小時觀察的方式進(jìn)行第二部分實驗。使用基質(zhì)粘附實驗及Transwell小室實驗檢測桂皮醛對細(xì)胞侵襲及粘附能力的影響；Western blot法檢測檢測侵襲粘附相關(guān)蛋白（E-cadherin、MMP-2、MMP-9）的表達(dá)量。③Hoechst33258熒光染色檢測桂皮醛對細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)的影響；流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率；Western blot法檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)基因（Bcl-2、Bax、PARP、cleaved-PARP）的表達(dá)量。④進(jìn)一步探討桂皮醛對于PI3K/Akt通路的影響,使用40μg/ml的中等劑量處理三種細(xì)胞株24h后Western blot法檢測PI3K, p-PI3K, Akt及p-Akt的表達(dá)量。為明確桂皮醛對于該通路的阻斷效果及阻斷位... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 理論研究
    1. 腸癌的中醫(yī)學(xué)認(rèn)識和研究
        1.1 病名溯源
        1.2 腸癌的基本病因病機
    2. 腸癌的中醫(yī)中藥治療研究概況
        2.1 單味中藥在腸癌方面的治療研究進(jìn)展
        2.2 中藥單體誘導(dǎo)腸癌細(xì)胞凋亡、抑制侵襲轉(zhuǎn)移的研究
    3. PI3K/AKT信號傳導(dǎo)通路在腸癌中的研究進(jìn)展
        3.1 PI3K/Akt信號通路的組成與功能
        3.2 PI3K/Akt信號通路在腸癌中的表達(dá)及調(diào)控
第二部分 實驗研究
    1. 實驗材料
        1.1 細(xì)胞株
        1.2 試劑
        1.3 主要儀器及設(shè)備
        1.4 實驗試劑及藥物的配置
    2. 實驗方法
        2.1 四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）實驗方法
        2.2 侵襲實驗的方法與步驟
        2.3 基質(zhì)粘附實驗的方法與步驟
        2.4 Annexin-V/PI雙染法
        2.5 Hochest33258染色
        2.6 蛋白提取以及Western Blot實驗
        2.7 Bradford法測蛋白濃度
        2.8 蛋白電泳及具體Western Bolt實驗步驟
        2.9 統(tǒng)計學(xué)分析
    3. 實驗結(jié)果
        3.1 桂皮醛對HCT116、LoVo、SW480細(xì)胞增殖的影響
        3.2 桂皮醛對HCT116、LoVo、SW480細(xì)胞體外侵襲的抑制作用
        3.3 桂皮醛對HCT116、LoVo、SW480細(xì)胞粘附能力的影響
        3.4 桂皮醛對HCT116、LoVo、SW480侵襲粘附相蛋白表達(dá)的影響
        3.5 桂皮醛對HCT116、LoVo、SW480凋亡的影響
        3.6 桂皮醛對腸癌細(xì)胞PI3K/Akt信號通路的影響
        3.7 桂皮醛通過調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號通路誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡
第三部分 討論
    1. 細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
    2. 細(xì)胞凋亡
    3. PI3K/AKT信號通路與細(xì)胞凋亡
第四部分 結(jié)語
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄一 中英文縮寫對照
    附錄二 攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝



本文編號：3100567