N6-甲基腺苷（m⁶A）是發(fā)生在腺苷N6位的甲基化,這是真核m RNA上最普遍的內(nèi)部修飾。而METTL3作為m⁶A甲基化轉(zhuǎn)移酶的核心成分,介導m⁶A甲基化的“寫入”過程,已被證實在多種癌癥中發(fā)揮著致癌或者抑癌的作用。可謂METTL3之于癌癥是一把雙刃劍。而結(jié)腸癌作為十大惡性腫瘤之一,嚴重威脅人類健康。雖然目前采用手術(shù),化療以及分子靶向治療的方法提高了患者治療效果,但全球每年仍增加超過100萬新病例以及大約60萬人死亡。為了研究METTL3對人結(jié)腸癌HCT-116生物學特性的影響,通過CRISPER/Cas9基因編輯技術(shù),構(gòu)建METTL3敲低載體,轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌HCT-116細胞,有限稀釋法篩選目的克隆,利用Western Blot篩選建立METTL3敲低細胞系。另外,通過構(gòu)建METTL3基因過表達的慢病毒載體,將PLVSIN-METTL3、PLVSINEV載體與輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK-293T細胞,進行慢病毒的包裝。利用包裝好的病毒感染結(jié)腸癌HCT-116細胞系,利用Western Blot篩選建立METTL3過表達細胞系。并... 

【文章來源】：哈爾濱工業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

m6ARNA甲基化的過程和分子功能[35]

RNAm6A修飾對人類癌癥的作用[57]

本研究影響生物學行為的影響

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]DNA甲基化——腫瘤產(chǎn)生的一種表觀遺傳學機制[J]. 張麗麗,吳建新.  遺傳. 2006(07)



本文編號：3082415