發(fā)布時(shí)間：2021-03-08 18:07

　　背景:胰腺癌（Pancreatic cancer,PC）在消化系統(tǒng)中屬于惡性程度很高的腫瘤。早期胰腺癌由于其非典型的臨床癥狀以及早期篩查指標(biāo)缺乏特異性,通常難以診斷,從而失去了進(jìn)行根治性手術(shù)切除的機(jī)會(huì)。而晚期胰腺癌對臨床放射療法和化學(xué)療法的敏感性較低,而且放化療副作用對病人身體影響較大,胰腺癌患者的預(yù)后很差。我們想通過提高抗腫瘤藥物的靶向性,從而提高抗腫瘤藥物對胰腺癌的療效并降低對機(jī)體正常細(xì)胞的損傷。在靶向性問題上,我們利用噬菌體展示技術(shù)進(jìn)行篩選。在抗腫瘤藥物上,我們選擇了KLA（（KLAKLAK）2）凋亡肽作為治療肽段,KLA凋亡肽段與化學(xué)治療藥物相比,具有分子量小、腫瘤穿透能力強(qiáng)、免疫原性低、生物相容性好、毒性作用小、易于合成和修飾等優(yōu)點(diǎn)[12-13],是理想的抗腫瘤藥物。但KLA凋亡肽很難透過細(xì)胞膜,無法進(jìn)入細(xì)胞后就不能破壞線粒體膜以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[16]。因此本研究旨在通過利用噬菌體展示技術(shù),篩選出能特異性作用于胰腺癌細(xì)胞的靶向肽段。利用該肽段的靶向性,實(shí)現(xiàn)對胰腺癌的影像學(xué)診斷。并利用該肽段結(jié)合凋亡肽段KLA,以期實(shí)現(xiàn)融合肽段對胰腺癌細(xì)胞具有靶向性并對胰腺癌細(xì)胞及腫瘤的生長有抑制... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

融合肽段HMNPWSD-KLA在體外細(xì)胞及體內(nèi)腫瘤靶向性評估

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文正文第二部分結(jié)果37圖2.2融合肽段HMNPWSD-KLA對細(xì)胞MTT試驗(yàn)。分別設(shè)立PBS組，KLA組，Control-KLA組及HMNPWSD-KLA組。不同濃度肽段分別與(A)PANC-1細(xì)胞及(B)H1299細(xì)胞共孵育24h后，進(jìn)行MTT測定。MTT結(jié)果測定顯示，KLA、control-KLA在PANC-1細(xì)胞及對照組H1299細(xì)胞中，均未有明顯的細(xì)胞生長抑制作用。HMNPWSD-KLA融合肽段在PANC-1細(xì)胞中有較高的細(xì)胞生長抑制效果，而在對照細(xì)胞H1299則無明顯的生產(chǎn)抑制作用，進(jìn)一步證明了HMNPWSD-KLA融合肽段對PANC-1細(xì)胞的靶向性。2.3.3融合肽段通過破壞線粒體，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞生長我們已經(jīng)驗(yàn)證了融合肽段HMNPWSD-KLA能夠?qū)ANC-1細(xì)胞生長抑制。我們猜想融合肽段發(fā)揮生長抑制作用是通過KLA肽段的線粒體破壞，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。為了進(jìn)一步研究融合肽段HMNPWSD-KLA抑制PANC-1細(xì)胞生長機(jī)制。我們首先用不同濃度的融合肽段作用于PANC-1細(xì)胞，然后進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測。圖2.3A所示，細(xì)胞發(fā)生凋亡程度與融合肽段劑量成依賴性關(guān)系，隨著融合肽段

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文正文第二部分結(jié)果39圖2.3融合肽段抑制PANC-1細(xì)胞生長機(jī)制。(A)流式細(xì)胞凋亡分析。利用不同濃度（0,5M,10Mand20M）融合肽段作用于PANC-1細(xì)胞后，凋亡分析結(jié)果顯示，隨融合肽段HMNPWSD-KLA濃度不斷增加，發(fā)生凋亡的細(xì)胞數(shù)量相

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3071439