胃癌是世界上發(fā)病率第四高的癌癥,每年胃癌會(huì)奪走700,000條生命,超過60%的胃癌由幽門螺桿菌感染引發(fā)。幽門螺桿菌的病原性有多個(gè)來源,其中CagA蛋白對(duì)細(xì)胞的影響尚未被完全揭露。CagA由幽門螺桿菌通過Type IV Secretion System注入宿主細(xì)胞從而影響細(xì)胞正常的信號(hào)通路,從而影響細(xì)胞的代謝和結(jié)構(gòu),最終導(dǎo)致細(xì)胞癌變。在實(shí)驗(yàn)室的前期研究中,我們發(fā)現(xiàn)無論是直接將幽門螺桿菌加入細(xì)胞培養(yǎng)基中,或是在細(xì)胞中誘導(dǎo)表達(dá)外源CagA,都能使細(xì)胞產(chǎn)生外貌的改變,從而變得細(xì)長,這種變化給予細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力,與胃上皮細(xì)胞癌變有密切關(guān)系。這種變化由于形似蜂鳥的嘆,所以被稱為humming bird phenotype。通過藥物篩選,我們發(fā)現(xiàn)抑制mTOR信號(hào)通路的藥物Rapamycin可以阻止CagA帶來的形變。本文以AGS胃癌細(xì)胞構(gòu)筑的tet-off誘導(dǎo)CagA表達(dá)的A10細(xì)胞為模型,通過運(yùn)用基因敲低、蛋白質(zhì)免疫印跡分析、熒光實(shí)時(shí)定量PCR、倒置顯微鏡觀察計(jì)數(shù)等實(shí)驗(yàn)方法,探究mTOR信號(hào)通路與CagA誘導(dǎo)的細(xì)胞形變之間的關(guān)系。通過實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn),對(duì)NF-kB信號(hào)通路進(jìn)行阻斷不能阻斷細(xì)胞形變,唯有m... 

【文章來源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?ＣａｇＡ的結(jié)構(gòu)多樣性［３１］??Ｆｉｇ?ＬＩ?ＣａｇＡ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ??

侵襲和轉(zhuǎn)移［１２５］。有趣的是，即使在Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ存在的情況下，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ還是??能夠促進(jìn)細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。這是如何做到的呢？其中一個(gè)推測(cè)是，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??能夠和ＦＧＦＲ１相結(jié)合，誘導(dǎo)ＭＡＰＫ－ＥＲＫ通路的持續(xù)激活（圖１．３）?［１２６］�；�??．者，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表達(dá)也許能夠增強(qiáng)腫瘤基質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用，促進(jìn)??腫瘤存活和進(jìn)出循環(huán)。確實(shí)也有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在血管中表達(dá)Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的黑??色素瘤細(xì)胞更容易被發(fā)現(xiàn)［１２７］；同樣擁有異常表達(dá)Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的骨髓瘤細(xì)胞能更??頑強(qiáng)地留在骨髓中，并和Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ陽性的成骨細(xì)胞相互作用，造成造成溶骨??性病變，抑制成骨分化［１２８］。Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞的異型??接觸暗示著腫瘤迀移力變強(qiáng)的機(jī)制之一是肌成纖維細(xì)胞的高活動(dòng)性［１２９］。肌成纖??維細(xì)胞能夠分泌許多不同的蛋白酶到腫瘤微環(huán)境中。通過蛋白酶水解切割累積??大量可溶性Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ胞外域能夠刺激內(nèi)皮細(xì)胞的ＦＧＦ信號(hào)，促進(jìn)血管生成??（圖１．３）�？偟膩碚f，以上研宄證明了?Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ在腫瘤發(fā)展過程中的重要正??性作用。??１．３．８?Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ也像Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?—樣能夠促進(jìn)腫瘤遷徙和浸潤，但是也有報(bào)道發(fā)??現(xiàn)Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ具有相反作用例如

＼?ｐ７＜３Ｓ６Ｋ?Ａｋｔ??圖１．３?ｍＴＯＲｃｌ與ｍＴ０Ｒｃ２在胰島素信號(hào)通路中［１４９］??Ｆｉｇ?１．?３?ｍＴＯＲｃｌ／２?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｓｕｌｉｎ?ｓｉｇｎａｌ?ｐａｔｈｗａｙ??能方面處于核心地位［１４９］。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，存在著兩種結(jié)構(gòu)，功能不同的??ｍＴＯＲ?復(fù)合物。ｍＴＯＲｃｌ?含有?ｒａｐｔｏｒ?（ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ?ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｆ?ｍＴＯＲ），??ｍＬＳＴ８和ＰＲＡＳ４０。ｍＬＳＴ８的功能尚不清楚，但ｒａｐｔｏｒ調(diào)控ｍＴＯＲ的方式是作??為骨架來募集ｍＴＯＲ的底物。ＰＲＡＳ４０的Ｔ２４６由Ａｋｔ磷酸化，從而停止它對(duì)??ｍＴＯＲ?的抑制作用。ｍＴＯＲｃｌ?的主要底物為兩個(gè)，４ＥＢＰ１?（ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ?ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ??４Ｅ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｐｒｏｔｅｉｎ－１）和?Ｓ６Ｋ１?（ｒｉｂｏｓｏｍａｌ?ｐ７０Ｓ６?ｋｉｎａｓｅ）＾３Ｇ］，兩個(gè)都是調(diào)控蛋白翻譯??的重要因子。ｍＴＯＲｃｌ在Ｓ６Ｋ１的Ｔ３８０磷酸化并激活它，Ｓ６Ｋ１從而磷酸化并激??活核糖體蛋白Ｓ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Cancer-associated fibroblasts in digestive tumors[J]. Lei Huang,A-Man Xu,Sha Liu,Wei Liu,Tuan-Jie Li.  World Journal of Gastroenterology. 2014(47)



本文編號(hào)：3058668