【研究背景及目的】肝細(xì)胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）約占原發(fā)性肝癌的70-90%,具有起病隱匿、發(fā)展迅速、預(yù)后差、轉(zhuǎn)移率高等特點(diǎn)。近年來其治療雖然有了進(jìn)展,但預(yù)后仍不令人滿意。因而,許多研究者開始著眼于干預(yù)HCC的發(fā)生。但是,HCC早期發(fā)生的分子機(jī)制仍是未知,探索腫瘤起始機(jī)制對于發(fā)展早期發(fā)現(xiàn)手段和有效治療措施至關(guān)重要。性別決定區(qū)Y框蛋白9（sex-determining region Y box protein 9,SOX9）是SOX家族中重要的轉(zhuǎn)錄因子,其在胚胎發(fā)育,維持細(xì)胞干性及組織穩(wěn)態(tài)中具有重要意義,并在某些組織中被認(rèn)為是干細(xì)胞的標(biāo)志物。生理?xiàng)l件下,SOX9在肝臟中主要表達(dá)于膽管細(xì)胞,僅極少量表達(dá)于成熟肝細(xì)胞中。然而,在慢性肝損傷再生過程中,表達(dá)SOX9的肝細(xì)胞明顯增多,這些SOX9陽性細(xì)胞表現(xiàn)為兼性肝干細(xì)胞,參與肝細(xì)胞和膽管細(xì)胞的再生。既往較多研究發(fā)現(xiàn)SOX9是一種促癌因子,在多種惡性腫瘤中都異常高表達(dá),并與前列腺癌、胰腺癌和皮膚基底細(xì)胞癌的發(fā)生密切相關(guān)。SOX9在肝癌組織中亦高表達(dá),且與不良預(yù)后相關(guān)。目前研究表明皮膚、血液、胃腸等多種器官或組... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

Sox9-Flp/Ai65D小鼠基因型鑒定及標(biāo)記原理

1-3. 不同周齡 Sox9-Flp/Ai65D 正常小鼠肝臟中 TdTom 表達(dá)量的情況。（A）齡的 Sox9-Flp/Ai65D 正常未造模小鼠肝臟中 TdTom 陽性的細(xì)胞數(shù)量保持相。Scale bar=200μm。（B）不同周齡的 Sox9-Flp/Ai65D 小鼠肝臟中 TdTom 陽比率的量化統(tǒng)計(jì)圖。紅色熒光用 image protein-plus 軟件進(jìn)行定量（n=3）。

三、肝細(xì)胞表達(dá) SOX9 不是發(fā)生肝癌的必要條件該部分研究在小鼠原發(fā)性肝癌模型中，觀察了肝癌細(xì)胞是否來自曾經(jīng)表達(dá)過SOX9 的肝細(xì)胞。利用 AAV8-TBG-Cre 標(biāo)記 Sox9-Flp/Ai65D 小鼠肝細(xì)胞，再以STZ-HFD 和 DEN×1 次兩種方式誘導(dǎo)小鼠發(fā)生原發(fā)性肝癌。待腫瘤形成后處死小鼠并分析肝細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞表達(dá) TdTom 的情況，進(jìn)而了解肝癌細(xì)胞是否來源于表達(dá)過SOX9 的肝細(xì)胞。1、STZ-HFD 模型同種肝癌模型造模相同時間，與非示蹤小鼠相比（圖 1-4A），Sox9-Flp/Ai65D示蹤小鼠肝臟呈淡紅色，肝臟形態(tài)飽滿，質(zhì)軟，表面可見紅色（細(xì)胞表達(dá)紅色熒光蛋白 TdTom 導(dǎo)致）或白色的小結(jié)節(jié)（圖 1-4B）。進(jìn)一步行免疫熒光檢測，可見腫瘤組織 Ki67 表達(dá)較癌旁組織明顯增加； TdTom+和 TdTom_的肝癌均存在，且兩種腫瘤可能存在于同一只小鼠的肝臟組織中；癌旁組織中肝細(xì)胞大部分被標(biāo)記為紅色（圖 1-4C）。AB

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Novel insight into mechanisms of cholestatic liver injury[J]. Benjamin L Woolbright,Hartmut Jaeschke.  World Journal of Gastroenterology. 2012(36)



本文編號：3055592