Lin28A激活A(yù)R并促進(jìn)ER-/Her2+乳腺癌生長(zhǎng)進(jìn)展的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-02-21 12:53
目的研究ER-/Her2+乳腺癌中Lin28A和AR的表達(dá)并分析它們的表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系;分析Lin28A是否能夠影響AR的表達(dá)情況以及Lin28A是否以及如何影響AR的轉(zhuǎn)錄活性,并研究Lin28A對(duì)AR的轉(zhuǎn)錄影響是否對(duì)ER-/Her2+乳腺癌的生長(zhǎng)和進(jìn)展起作用。方法采用免疫組化分析305例ER陰性Her2陽性(ER-/Her2+)乳腺癌組織中Lin28A和AR的表達(dá)。305例ER-/Her2+乳腺癌Lin28A和AR的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。采用SPSS軟件包種的卡方檢驗(yàn)進(jìn)行組間差異統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,選擇ER-/Her2+的MDA-MB-453和SK-BR-3乳腺癌細(xì)胞系作為本實(shí)驗(yàn)研究模型。采用免疫熒光法檢測(cè)ER-/Her2+乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-453和SK-BR-3中Lin28A和AR的表達(dá),并用Q-RT-PCR和Western-blot檢測(cè)ER-/Her2+乳腺癌細(xì)胞中Lin28A和AR的mRNA以及蛋白表達(dá)水平。ER-/Her2+乳腺癌患者中Lin28A/AR的表達(dá)與預(yù)后關(guān)系采用Kaplan-Meier生存曲線以及Cox回歸模型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。Lin28A干擾質(zhì)粒...
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:106 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
免疫組化連續(xù)切片分析ER/Her2+乳腺癌樣本中Lin28A和AR的表達(dá)Lin28A陽性著色(A)和AR陽性著色(B)(Lin28A+/AR+)(400×);Lin28A陽性著色(C)和AR陰性著色(D)(Lin28A+/AR-)(200×);Lin28A陰性著色(E)和AR陽性著色(F)(Lin28A-/AR+)(400×);
在 SK-BR-3 乳腺癌細(xì)胞中 Lin28A 和 AR 同時(shí)不表達(dá)(圖2M,N,O,P)。圖 2 免疫熒光雙染驗(yàn)證三種乳腺癌細(xì)胞系中 Lin28A 和 AR 的表達(dá)A,E,I,M:Lin28A 染色; B,F
1.2.4 Q-RT-PCR 和 Western-blot 檢測(cè) ER-/Her2+乳腺癌細(xì)胞中 Lin28A 和 AR 的表達(dá)為了進(jìn)一步驗(yàn)證上述結(jié)果,我們采用 Q-RT-PCR 和 Western-blot 檢測(cè)ER-/Her2+乳腺癌細(xì)胞中 Lin28A 和 AR mRNA 以及蛋白的表達(dá)(圖 3)。Q-RT-PCR 結(jié)果顯示 Lin28A 和 AR mRNA 在 MDA-MB-453 乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)高于 MDA-MB-231 乳腺癌細(xì)胞,在 SK-BR-3 乳腺癌細(xì)胞中低于 MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞(圖 3A)。 Western-blot 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 Lin28A 和 AR 蛋白在MDA-MB-453 乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)高于 MDA-MB-231 乳腺癌細(xì)胞,在 SK-BR-3乳腺癌細(xì)胞中低于 MDA-MB-231 乳腺癌細(xì)胞(圖 3B)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]RNA結(jié)合蛋白LIN28A對(duì)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響[J]. 易敏,許文萍,李倩倩,丁晨虹,陳斐,張新. 國際消化病雜志. 2013(03)
[2]靶向c-myc基因小RNA干擾對(duì)膽囊癌細(xì)胞侵襲運(yùn)動(dòng)的影響[J]. 蔡民,李立波. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(09)
本文編號(hào):3044374
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:106 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
免疫組化連續(xù)切片分析ER/Her2+乳腺癌樣本中Lin28A和AR的表達(dá)Lin28A陽性著色(A)和AR陽性著色(B)(Lin28A+/AR+)(400×);Lin28A陽性著色(C)和AR陰性著色(D)(Lin28A+/AR-)(200×);Lin28A陰性著色(E)和AR陽性著色(F)(Lin28A-/AR+)(400×);
在 SK-BR-3 乳腺癌細(xì)胞中 Lin28A 和 AR 同時(shí)不表達(dá)(圖2M,N,O,P)。圖 2 免疫熒光雙染驗(yàn)證三種乳腺癌細(xì)胞系中 Lin28A 和 AR 的表達(dá)A,E,I,M:Lin28A 染色; B,F
1.2.4 Q-RT-PCR 和 Western-blot 檢測(cè) ER-/Her2+乳腺癌細(xì)胞中 Lin28A 和 AR 的表達(dá)為了進(jìn)一步驗(yàn)證上述結(jié)果,我們采用 Q-RT-PCR 和 Western-blot 檢測(cè)ER-/Her2+乳腺癌細(xì)胞中 Lin28A 和 AR mRNA 以及蛋白的表達(dá)(圖 3)。Q-RT-PCR 結(jié)果顯示 Lin28A 和 AR mRNA 在 MDA-MB-453 乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)高于 MDA-MB-231 乳腺癌細(xì)胞,在 SK-BR-3 乳腺癌細(xì)胞中低于 MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞(圖 3A)。 Western-blot 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 Lin28A 和 AR 蛋白在MDA-MB-453 乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)高于 MDA-MB-231 乳腺癌細(xì)胞,在 SK-BR-3乳腺癌細(xì)胞中低于 MDA-MB-231 乳腺癌細(xì)胞(圖 3B)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]RNA結(jié)合蛋白LIN28A對(duì)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響[J]. 易敏,許文萍,李倩倩,丁晨虹,陳斐,張新. 國際消化病雜志. 2013(03)
[2]靶向c-myc基因小RNA干擾對(duì)膽囊癌細(xì)胞侵襲運(yùn)動(dòng)的影響[J]. 蔡民,李立波. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(09)
本文編號(hào):3044374
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