研究背景肺癌是造成全世界發(fā)病率和死亡率較高的主要原因之一,目前已成為全世界死亡率最高的惡性腫瘤,嚴重危害人類的生命健康。正因為肺癌在其早期階段對周圍血管造成的浸潤,進一步導致其發(fā)生遠處轉移,使得失去了手術治療的機會。因此,尋找控制肺癌的浸潤轉移的有效治療靶點變得極為重要。目的1、研究晚期糖基化終產(chǎn)物受體（receptor for advanced glycation end products,RAGE）及其胞內(nèi)信號分子DIAPH1在肺腺癌細胞株A549中的表達及對細胞遷移及凋亡能力的影響。2、觀察RAGE及DIAPH1在非小細胞肺癌組織標本中的表達情況,了解其在肺癌中的臨床價值。方法1、以肺腺癌細胞株A549及正常人支氣管上皮細胞BEAS-2B為研究對象,利用q-RT PCR、Western Blot及免疫細胞熒光染色,檢測RAGE及DIAPH1在二者中的表達及分布;2、RAGE配體CML-AGE及S100B以不同濃度（1μg、10μg、100μg）處理肺腺癌細胞A549,劃痕實驗檢測對A549細胞遷移能力的影響;3、RAGE配體CML-AGE以不同濃度（25μg、50μg、100μg... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

549肺腺癌細胞及BEAS-2B支氣管上皮細胞RAGE及DIAPH1的RNA表達水平

***P＜0.0001, t 檢驗。Figure 1. RAGE and DIAPH1 RNA expression in A549 lung adenocarcinomic cell line and BE2B human bronchial epithelial cell line. q-RT PCR analysis of A549 cells and BEAS-2B cellshowed that the expression levels of RAGE and DIAPH1 in A549 cells are both significantly lothan BEAS-2B cells. ***P＜0.0001, by t-tests.3.2 肺腺癌細胞株 A549 中 RAGE 及 DIAPH1 蛋白質(zhì)表達水平較支氣管上皮細BEAS-2B 中明顯降低經(jīng) Western blot 檢測兩組細胞中 RAGE 及 DIAPH1 蛋白表達水平，并進行度值分析。結果表明，在肺腺癌細胞 A549 中，RAGE 及 DIAPH1 蛋白水平較氣管上皮細胞 BEAS-2B 表達明顯下調(diào)，兩組結果使用 t 檢驗，差異有統(tǒng)計學意（P＜0.0001 ）。見圖 2BEAS-2B A549BEAS-2B A549(A)

圖 3 . BEAS-2B 支氣管上皮細胞及 A549 肺腺癌細胞中 RAGE 及 DIAPH1 蛋白的免疫熒光檢測結果。(A)支氣管上皮細胞 BEAS-2B 中 RAGE 及 DIAPH1 的表達情況；（B）肺腺癌細胞A549 中 RAGE 及 DIAPH1 的表達情況 。Figure 3. Immunocytofluorescence detection of RAGE and DIAPH1 expression in A549 lungadenocarcinomic cell line and BEAS-2B human bronchial epithelial cell line. (A) RAGE andDIAPH1 expression in A549 cells; (B) RAGE and DIAPH1 expression in BEAS-2B cells.3.4 RAGE 配體 CML-AGE 及 S100B 對肺腺癌細胞株 A549 細胞遷移能力的影響劃痕實驗結果顯示，以不同濃度 RAGE 配體 CML-AGE 及 S100B 刺激 A549肺腺癌細胞株。16h 后，相比于空白對照組，CML-AGE 實驗組及 S100B 對細胞遷移能力有明顯抑制作用，其作用呈現(xiàn)出濃度依賴性。組與組之間使用 one-wayANOVA 進行檢驗，差異有統(tǒng)計學意義 。（P＜0.05）。見圖 4

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3039729