SQSTM1/p62為一種泛素結(jié)合蛋白核自噬受體（sequestosome 1,SQSTM1）,有調(diào)節(jié)NRF2、mTOR和NF-κB的作用,這些因子則在腫瘤信號通路中較為重要,SQSTM1的異常積聚提示自噬缺陷,已知乳腺癌、肺癌等疾病也發(fā)現(xiàn)了這種異常聚集小體的存在。本研究為探討SQSTM1不同成瘤性MDCK細胞中的差異表達。培養(yǎng)不同成瘤性的MDCK細胞,通過RT-qPCR來檢測SQSTM1在不同成瘤性MDCK細胞中的表達。結(jié)果表明:SQSTM1在不同成瘤性MDCK細胞中存在差異,在高成瘤性細胞株MEDK-A和MDCK-B中表達高,在低成瘤性細胞株MDCK-C中表達量低,說明該蛋白對MDCK細胞的成瘤性起到一定的調(diào)控作用,為進一步研究SQSTM1在不同成瘤性MDCK細胞中的作用機制奠定理論基礎(chǔ)。 

【文章來源】：甘肅畜牧獸醫(yī). 2020,50(08)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

不同成瘤性細胞中SQSTM1的表達結(jié)果

根據(jù)細胞生長條件需要,對不同細胞采用不同的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。將貼壁細胞培養(yǎng)48 h后置于顯微鏡下用4倍目鏡觀察細胞的生長狀況,如圖1所示,發(fā)現(xiàn)所培養(yǎng)細胞生長狀態(tài)良好,細胞輪廓清晰,懸浮細胞的活力高、結(jié)團少、均一性好。其中MRC-5(圖A)成纖維狀生長;貼壁型MDCK-A(圖B)成上皮樣生長;懸浮型MDCK-B(圖C)呈圓形懸浮生長于無血清培養(yǎng)基中,MDCK-C(圖D)成上皮樣生長;可用于后續(xù)實驗。2.2 TRIzol Reagent提取不同成瘤性細胞總RNA的純度分析

RT-PCR檢測結(jié)果顯示:所設(shè)計的引物特異性高,定量結(jié)果重復(fù)性好(見圖2),以MRC-5為對照組,發(fā)現(xiàn)SQSTM1在高成瘤性MDCK-A和MDCK-B中高表達,而在低成瘤性細胞株MDCK-C中較高成瘤性組大大降低(見圖3)。說明SQSTM1在細胞內(nèi)的表達量可能與細胞成瘤性成正相關(guān),可為進一步研究SQSTM1在MDCK細胞成瘤性的作用機制研究提供理論參考。圖3 不同成瘤性細胞中SQSTM1的表達結(jié)果


本文編號：3038680