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活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷酸脫氨酶通過(guò)脫甲基修飾調(diào)控膀胱尿路上皮細(xì)胞癌致癌網(wǎng)絡(luò)

發(fā)布時(shí)間:2021-02-12 12:58
  目的探討AID(活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷酸脫氨酶)在人體膀胱尿路上皮細(xì)胞癌、癌旁組織中的表達(dá)情況以及與疾病的相關(guān)性;明確AID對(duì)膀胱尿路上皮細(xì)胞癌細(xì)胞株T24和5637增殖、侵襲、遷移以及凋亡的影響及機(jī)制;AID對(duì)膀胱尿路上皮細(xì)胞癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)增殖和轉(zhuǎn)移的影響。方法運(yùn)用Western Bolt以及免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)16例臨床膀胱尿路上皮細(xì)胞癌組織以及癌旁組織中AID的相對(duì)表達(dá)量;將攜帶有抑制AID表達(dá)的shRNA序列(shAICDA-T24組)或空載序列(NC-T24組)以慢病毒為載體對(duì)T24以及5637細(xì)胞進(jìn)行感染,利用Western Bolt對(duì)T24/5637、NC-T24/NC-5637以及shAICDA-T24/shAICDA組進(jìn)行AID表達(dá)量的檢測(cè);為了提高抑制率,隨后對(duì)轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行單克隆細(xì)胞篩選并通過(guò)Western Bolt結(jié)果選取抑制效果最明顯的組別用于后續(xù)試驗(yàn);然后運(yùn)用細(xì)胞增值試驗(yàn)(CCK8)、流式細(xì)胞術(shù)(凋亡)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞小室實(shí)驗(yàn)(Transwell)檢測(cè)抑制AID的表達(dá)對(duì)T24細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲以及遷移的影響;建立裸鼠皮下成瘤和尾部靜脈注射觀察肺部轉(zhuǎn)... 

【文章來(lái)源】:海南醫(yī)學(xué)院海南省

【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
縮略語(yǔ)
中文摘要
Abstract
前言
1 材料和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果
    2.1 膀胱尿路上皮細(xì)胞癌組織與細(xì)胞中AID的表達(dá)顯著高于癌旁組織和人尿路上皮永生細(xì)胞
    2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染以及單克隆細(xì)胞篩選
    2.3 抑制AID表達(dá)對(duì)膀胱尿路上皮細(xì)胞癌T24 、5637 細(xì)胞表型的影響
    2.4 抑制AID表達(dá)對(duì)膀胱尿路上皮細(xì)胞癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)增殖和轉(zhuǎn)移的影響
    2.5 生物信息學(xué)分析
    2.6 5-氮雜-2’-脫氧胞嘧啶核苷酸對(duì)抗AID沉默引起的MMP14 下調(diào)……
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡(jiǎn)歷
致謝



本文編號(hào):3030898

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