目的:胃癌是消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,每年全球約有超過100萬的新發(fā)病例以及80萬的死亡病例。目前,手術(shù)聯(lián)合放化療、免疫治療以及靶向治療仍然是胃癌治療的有效手段,但由于腫瘤早期癥狀不典型且我國居民體檢意識相對較弱,我國的早期胃癌檢出率較低。因此,發(fā)現(xiàn)并揭示胃癌的特異性標記物及有效治療靶點對疾病的診治具有深遠的意義。研究證實人類基因組中有98%的基因不具備編碼蛋白的能力,因此被稱為非編碼基因。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是指一類長度大于200個核苷酸且不具有開放閱讀框的轉(zhuǎn)錄本。近年來,圍繞lncRNA在胃癌中的作用及機制研究已成為學(xué)術(shù)熱點,大量研究報道lncRNA可影響腫瘤的增殖、侵襲、遷移以及凋亡等表型變化。我們通過分析TCGA（The Cancer Genome Atlas）數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn)lncRNA DLX6-AS1在胃癌中過表達并與預(yù)后相關(guān)。DLX6-AS1是長度為1990bp的轉(zhuǎn)錄組,位于7q21.3染色體上。已有學(xué)者報道DLX6-AS1在肝癌、骨巨細胞瘤、前列腺癌、肺癌、卵巢癌中過表達并起促癌作用。盡管如此,DLX6-AS1在胃癌中... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：124 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

DLX6-AS1在TCGA數(shù)據(jù)庫的胃癌組織中呈高表達且與預(yù)后相關(guān)

為進一步驗證TCGA數(shù)據(jù)庫中的高通量結(jié)果,我們通過qRT-PCR實驗檢測56組胃癌及對應(yīng)癌旁非癌組織的DLX6-AS1表達水平。如圖1.2A所示,DLX6-AS1在胃癌組織的表達水平顯著高于癌旁組織,此結(jié)果也與TCGA數(shù)據(jù)庫的高通量數(shù)據(jù)結(jié)果相一致。我們檢測了DLX6-AS1在胃癌細胞系和胃正常粘膜上皮細胞中的表達水平以進一步闡釋DLX6-AS1在胃癌中的功能及作用機制。將GES-1的表達水平作為標準組,胃癌細胞系中DLX6-AS1均呈過表達,且SGC-7901和AGS細胞系的表達水平最高(圖1.2B)。3.3 DLX6-AS1的表達水平與臨床病理資料的關(guān)系

為進一步證實DLX6-AS1在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用,我們通過轉(zhuǎn)染siRNA-DLX6-AS1下調(diào)胃癌細胞系中DLX6-AS1的表達水平,并通過qRT-PCR實驗進行驗證。如圖2.1所示,轉(zhuǎn)染siRNA-DLX6-AS1后可有效下調(diào)DLX6-AS1在胃癌細胞系SGC-7901和AGS中的表達水平。由于si-DLX6-AS1#2和si-DLX6-AS1#3的轉(zhuǎn)染效率最高,因此我們選擇這兩對序列進行后續(xù)的細胞功能實驗和機制研究。CCK8實驗可以檢測細胞的增殖能力。如圖2.2A所示,與對照組相比,敲除DLX6-AS1后SGC-7901和AGS細胞系的增殖能力明顯下降�？寺⌒纬蓪嶒炓策M一步證實,DLX6-AS1可促進胃癌細胞的增殖(圖2.2B)。應(yīng)用Transwell實驗可進一步驗證細胞的遷移和侵襲能力。如圖2.2C所示,沉默DLX6-AS1后可顯著抑制胃癌細胞的遷移和侵襲功能。

【參考文獻】：
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本文編號：3020896