發(fā)布時間：2021-01-31 23:00

　　當前,中國每年有3%的人死于惡性腫瘤,惡性腫瘤已然成為威脅人類健康的關(guān)鍵因素,因此進一步探究惡性腫瘤的發(fā)病機理對開發(fā)有效的臨床治療方案十分迫切。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是指細胞微環(huán)境受缺氧或營養(yǎng)缺失等某些因素干擾時,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)生理功能發(fā)生紊亂從而導致蛋白錯誤折疊的現(xiàn)象。腫瘤細胞長期暴露于慢性缺血、缺氧等應(yīng)激微環(huán)境中,從而常常處于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激情況下。盡管如此,它們卻仍能維持正常的生理功能和存活。這是由于大部分腫瘤細胞已進化出更強的應(yīng)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的能力,創(chuàng)造有利于自身存活的條件。通常情況下,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激會啟動ERAD（endoplasmic reticulum associated protein degradation,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白降解）,該反應(yīng)可以幫助腫瘤細胞清除內(nèi)質(zhì)網(wǎng)錯誤折疊蛋白以維持自身存活,因此ERAD在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中有著重要作用。但是目前關(guān)于ERAD的相關(guān)研究甚少,本研究旨在揭示調(diào)控ERAD的分子機制,進而為腫瘤的臨床治療提供新理論依據(jù)和新的靶點。本研究前期利用內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激陽性誘導藥物TM、TG處理細胞,發(fā)現(xiàn)TRIM家族蛋白成員TRIM25（tripartite motif-containing ... 

【文章來源】：中國科學院大學(中國科學院深圳先進技術(shù)研究院)廣東省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 質(zhì)粒及細胞系
        2.1.2 主要試劑及抗體
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要溶液的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 克隆TRIM25 表達質(zhì)粒
        2.2.3 構(gòu)建TRIM25 穩(wěn)定敲低細胞系
        2.2.4 Western blot檢測蛋白質(zhì)水平
        2.2.5 RT-qPCR檢測mRNA水平
        2.2.6 流式細胞術(shù)檢測細胞ROS水平和凋亡率
        2.2.7 免疫共沉淀尋找TRIM25 相互作用蛋白
        2.2.8 細胞核質(zhì)蛋白分離
        2.2.9 動物實驗
        2.2.10 統(tǒng)計學分析
第3章 結(jié)果
    3.1 TRIM25 是新型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導蛋白并負反饋調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激
    3.2 TRIM25 調(diào)控ERAD信號通路
    3.3 TRIM25 調(diào)控腫瘤細胞ROS水平和凋亡
    3.4 TRIM25與Keap1 存在相互作用
    3.5 TRIM25 通過E3 泛素連接酶活性降低Keap1 的蛋白穩(wěn)定性
    3.6 TRIM25 調(diào)控腫瘤細胞ROS水平和存活依賴于Nrf2
    3.7 TRIM25 敲低抑制腫瘤的生長
第4章 總結(jié)與討論
參考文獻
附錄 （中英文縮略詞對照表）
致謝
作者簡歷及攻讀學位期間公開發(fā)表的論文



本文編號：3011731