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miR-370靶向EGFR抑制肺腺癌生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-14 21:38
  [目的]研究miR-370在肺癌中的表達(dá)情況及其對(duì)肺腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)、侵襲等生物學(xué)行為的影響;證實(shí)miR-370對(duì)EGFR信號(hào)通路的靶向性調(diào)節(jié);探討miR-370在小鼠體內(nèi)對(duì)肺腺癌移植瘤及轉(zhuǎn)移瘤的抑制作用。[方法]1、利用網(wǎng)絡(luò)預(yù)測(cè)系統(tǒng)預(yù)測(cè)miR-370對(duì)EGFR的靶向性。實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)miR-370,EGFR在四株肺癌細(xì)胞系、一株正常支氣管上皮細(xì)胞系及肺癌組織和相應(yīng)正常組織中的相對(duì)表達(dá)水平;western-blot檢測(cè)EGFR在不同類(lèi)型肺癌細(xì)胞系、正常細(xì)胞系中的相對(duì)表達(dá)水平;構(gòu)建野生型和突變型EGFR3’UTR雙熒光素酶表達(dá)載體及miR-370 mimics,對(duì)H157及XWLC-05兩株肺癌細(xì)胞進(jìn)行共轉(zhuǎn)染后,進(jìn)行雙熒光素酶檢測(cè)。2、合成 miR-370 mimics 和 miR-370 inhibitor,通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染 H1 57 及XWLC-05細(xì)胞;利用MTT實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、平板克隆實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)研究miR-370對(duì)肺癌細(xì)胞增殖、遷移、克隆形成及轉(zhuǎn)移的影響;通過(guò)western-blot檢測(cè) EGFR、AKT/PAKT、ERK/PERK、HIF-1α 等指標(biāo)... 

【文章來(lái)源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】:161 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 肺癌發(fā)病情況
    2 非小細(xì)胞肺癌治療方式
    3 EGFR信號(hào)通路及分子靶向治療
    4 microRNA與腫瘤
    5 microRNA在腫瘤臨床治療中的應(yīng)用
    6 EGFR與miRNA
    7 miR-370
    參考文獻(xiàn)
第二章 miR-370對(duì)肺腺癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及作用機(jī)制研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三章 miR-370體內(nèi)對(duì)肺腺癌的作用及其機(jī)制研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第四章 全文總結(jié)
研究創(chuàng)新性及不足之處
綜述
    參考文獻(xiàn)
博士在讀期間所獲獎(jiǎng)勵(lì)、發(fā)表論文及主持課題
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]肺癌轉(zhuǎn)移瘤動(dòng)物模型的建立[J]. 陳愉生,林小芬,李鴻茹,林獻(xiàn),林明,許能鑾.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2014(05)
[2]云南肺癌高發(fā)地區(qū)肺癌死亡趨勢(shì)分析[J]. 黃云超,趙光強(qiáng),肖義澤,陳小波,馬千里,雷玉潔,楊凱云.  腫瘤防治研究. 2011(01)
[3]小鼠Lewis肺癌原位模型的構(gòu)建[J]. 劉馨,伍治平,左曙光,周永春,陳艷,王熙才.  中國(guó)肺癌雜志. 2010(01)
[4]3,4-苯并芘肺內(nèi)注射構(gòu)建大鼠肺腫瘤模型的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 顧其華,胡成平,夏瑩,馮俊濤.  中國(guó)肺癌雜志. 2007(03)
[5]肺癌細(xì)胞系XWLC-05的建立及其生物學(xué)特性研究[J]. 閆鳳彩,王秦秦,阮永華,馬麗菊,賈建桃,金克煒.  癌癥. 2007(01)
[6]A549人肺癌細(xì)胞系/615-SCID小鼠轉(zhuǎn)移瘤的生物學(xué)特征[J]. 朱惠芳,蘭嵐,趙軾軒,王英,楊純正,劉秋花,楊健,陳輝樹(shù),劉世和,王遠(yuǎn).  中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2003(04)
[7]宣威肺癌流行病學(xué)特征[J]. 徐崇旺,蔣維章,楊儒道.  云南醫(yī)藥. 1989(04)

博士論文
[1]非小細(xì)胞肺癌中PD-L1的表達(dá)調(diào)控及其機(jī)制研究[D]. 林凱龍.第三軍醫(yī)大學(xué) 2015



本文編號(hào):2977596

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