發(fā)布時間：2020-12-04 02:24

　　目的 旨在探索microRNA-552（miR-552）對結直腸腫瘤細胞增殖和遷移的影響,探索miR-552下游靶基因以及二者之間的靶向調控關系,從而闡明miR-552對結直腸腫瘤生物學功能影響的具體分子調控機制。方法1.RT-qPCR方法檢測miR-552在結直腸腫瘤組織及細胞系中的表達。2.構建并驗證miR-552抑制性載體miR-552-inhibitor（miR-552-in）轉染效率。3.MTT和平板克隆形成實驗檢測miR-552對腫瘤細胞增殖能力的影響。4.Transwell和劃痕實驗檢測miR-552對腫瘤細胞遷移能力的影響。5.靶基因預測及篩選,熒光素酶報告實驗驗證miR-552的下游靶基因。6.RT-qPCR和Western blotting檢測miR-552靶基因DACH1的mRNA和蛋白表達。7.Western blotting檢測Wnt/β-catenin信號通路相關蛋白的表達。結果1.MiR-552在結直腸腫瘤組織及細胞系中的表達情況:我們檢測了20對結直腸癌組織和鄰近的正常組織,結果表明:miR-552在癌組織中的表達明顯高于正常組織。同時,與正常結直腸細胞... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

結直腸癌組織及癌旁組織總RNA電泳圖

腸腫瘤組織和鄰近正常組織中檢測了miR-552的表達情況。結果表明：與正常組織相比，miR-552在結直腸癌組織中的表達明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）（圖1-2-1）。同時，在腫瘤細胞系中也檢測了miR-552的表達，與正常結直腸細胞系NCM460相比，miR-552在腫瘤細胞系Lovo、SW620、HCT116中明顯高表達（圖1-2-2），與組織中的表達結果相一致。圖 1-2-1：miR-552在結直腸腫瘤組織中的表達（***P<0.001）圖 1-2-2：miR-552在結直腸腫瘤細胞系中的表達

（P<0.001）（圖1-2-1）。同時，在腫瘤細胞系中也檢測了miR-552的表達，與正常結直腸細胞系NCM460相比，miR-552在腫瘤細胞系Lovo、SW620、HCT116中明顯高表達（圖1-2-2），與組織中的表達結果相一致。圖 1-2-1：miR-552在結直腸腫瘤組織中的表達（***P<0.001）圖 1-2-2：miR-552在結直腸腫瘤細胞系中的表達


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