目的 旨在探索microRNA-552（miR-552）對結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞增殖和遷移的影響,探索miR-552下游靶基因以及二者之間的靶向調(diào)控關(guān)系,從而闡明miR-552對結(jié)直腸腫瘤生物學(xué)功能影響的具體分子調(diào)控機(jī)制。方法1.RT-qPCR方法檢測miR-552在結(jié)直腸腫瘤組織及細(xì)胞系中的表達(dá)。2.構(gòu)建并驗(yàn)證miR-552抑制性載體miR-552-inhibitor（miR-552-in）轉(zhuǎn)染效率。3.MTT和平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測miR-552對腫瘤細(xì)胞增殖能力的影響。4.Transwell和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測miR-552對腫瘤細(xì)胞遷移能力的影響。5.靶基因預(yù)測及篩選,熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-552的下游靶基因。6.RT-qPCR和Western blotting檢測miR-552靶基因DACH1的mRNA和蛋白表達(dá)。7.Western blotting檢測Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果1.MiR-552在結(jié)直腸腫瘤組織及細(xì)胞系中的表達(dá)情況:我們檢測了20對結(jié)直腸癌組織和鄰近的正常組織,結(jié)果表明:miR-552在癌組織中的表達(dá)明顯高于正常組織。同時(shí),與正常結(jié)直腸細(xì)胞... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

結(jié)直腸癌組織及癌旁組織總RNA電泳圖

腸腫瘤組織和鄰近正常組織中檢測了miR-552的表達(dá)情況。結(jié)果表明：與正常組織相比，miR-552在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）（圖1-2-1）。同時(shí)，在腫瘤細(xì)胞系中也檢測了miR-552的表達(dá)，與正常結(jié)直腸細(xì)胞系NCM460相比，miR-552在腫瘤細(xì)胞系Lovo、SW620、HCT116中明顯高表達(dá)（圖1-2-2），與組織中的表達(dá)結(jié)果相一致。圖 1-2-1：miR-552在結(jié)直腸腫瘤組織中的表達(dá)（***P<0.001）圖 1-2-2：miR-552在結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞系中的表達(dá)

（P<0.001）（圖1-2-1）。同時(shí)，在腫瘤細(xì)胞系中也檢測了miR-552的表達(dá)，與正常結(jié)直腸細(xì)胞系NCM460相比，miR-552在腫瘤細(xì)胞系Lovo、SW620、HCT116中明顯高表達(dá)（圖1-2-2），與組織中的表達(dá)結(jié)果相一致。圖 1-2-1：miR-552在結(jié)直腸腫瘤組織中的表達(dá)（***P<0.001）圖 1-2-2：miR-552在結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞系中的表達(dá)


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