發(fā)布時間：2020-07-09 15:23

【摘要】：研究背景:乳腺癌是我國女性最常見腫瘤,ER陽性乳腺癌內(nèi)分泌治療抵抗是嚴(yán)峻的臨床課題。Prohibitin(PHB)是一種在正常和癌細(xì)胞中具有多種功能的進(jìn)化保守蛋白,PHB在癌細(xì)胞中的作用尚有爭議。AR在乳腺癌中高表達(dá),且在ER陽性和ER陰性乳腺癌中所起作用不同。在前列腺癌細(xì)胞中,PHB顯示出抑制AR活性。在ER陽性乳腺癌細(xì)胞中,PHB能否調(diào)節(jié)AR的表達(dá)我們還無從知曉,目前國內(nèi)外未見相關(guān)文獻(xiàn)報道。研究目的:明確PHB表達(dá)在乳腺癌生存預(yù)后中的作用,進(jìn)一步明確PHB對ER陽性乳腺癌中AR表達(dá)的調(diào)控。研究方法:我們首先用免疫組化法檢測121例乳腺癌患者腫瘤組織和相應(yīng)的癌旁正常乳腺組織中PHB和AR的蛋白表達(dá),分析它們的表達(dá)與乳腺癌患者臨床病理特征的相關(guān)性以及二者之間的相關(guān)性。為研究PHB和AR在ER陽性乳腺癌患者臨床結(jié)局中的作用,我們用Kaplan-Meier plotter在線乳腺癌生存分析數(shù)據(jù)庫,進(jìn)行了薈萃分析。隨后的體外試驗中,我們用PHB質(zhì)粒轉(zhuǎn)染ER陽性乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和T47D,檢測轉(zhuǎn)染后PHB mRNA和PHB蛋白的表達(dá),以驗證PHB質(zhì)粒是否成功轉(zhuǎn)染。MTT法檢測轉(zhuǎn)染PHB質(zhì)粒后細(xì)胞株的增殖情況,流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后ER陽性乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的變化。實時定量PCR和免疫印跡法分別檢測轉(zhuǎn)染后AR mRNA和AR蛋白的表達(dá)。最后用免疫熒光染色法(IF)驗證PHB和AR的蛋白表達(dá),并顯示其亞細(xì)胞定位。結(jié)果:PHB和AR在人乳腺癌組織中低表達(dá),PHB表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.034)、ER(P0.001)、PR(P0.001)和 HER-2 的表達(dá)(P=0.009)相關(guān)。AR表達(dá)與患者年齡(P=0.014)、ER(P=0.016)和E-鈣粘蛋白表達(dá)(P=0.043)相關(guān)。Spearman等級相關(guān)性分析表明,PHB和AR表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r = 0.521,P0.001)。低表達(dá)PHB和AR與ER陽性乳腺癌患者更短的OS、DMFS正相關(guān)。PHB質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染MCF-7和T47D細(xì)胞株后,在mRNA和蛋白水平均檢測到PHB表達(dá)顯著升高,提示轉(zhuǎn)染成功。PHB過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株中,細(xì)胞增殖速度明顯減慢,細(xì)胞周期阻滯于S/G2期,細(xì)胞凋亡增多。轉(zhuǎn)染組細(xì)胞株中,AR mRNA和AR蛋白表達(dá)均顯著增加,與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P.05)。IF顯示AR主要定位于細(xì)胞核,轉(zhuǎn)染后AR蛋白在核水平的表達(dá)顯著增加(P0.05)。結(jié)論:PHB在乳腺癌組織中低表達(dá),PHB低表達(dá)與乳腺癌患者的不良預(yù)后正相關(guān)。PHB過表達(dá)可抑制ER陽性乳腺癌細(xì)胞的增殖,改變細(xì)胞周期分布,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,顯著增加AR在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。在乳腺癌組織中,PHB和AR表達(dá)呈顯著正相關(guān)。結(jié)果表明,PHB可以促進(jìn)ER陽性乳腺癌中AR的活化,PHB和AR有望成為ER陽性乳腺癌治療的潛在分子靶點。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.9
【圖文】：

了這１２１例乳腺癌組織和相應(yīng)的１２１例癌旁正常乳腺組織（ｎｏｎｃａｎｃｅｒｏｕｓ邋ｔｉｓｓｕｅｓ，逡逑ＮＣＴｓ）中ＰＨＢ和ＡＲ的蛋白表達(dá)。ＰＨＢ和ＡＲ蛋白免疫組織化學(xué)染色的代表逡逑性顯微照片見圖２－１。我們發(fā)現(xiàn)，在乳腺癌組織中ＰＨＢ和ＡＲ蛋白均顯示為低逡逑２８逡逑

Ｆｉｇ２－２Ａ逡逑圖２－２．ＰＨＢ低表達(dá)與乳腺癌的不良預(yù)后相關(guān)。逡逑圖２－２Ａ．在１４０２例乳腺癌患者中，通過Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ方法分析ＰＨＢ表達(dá)與患者總生存時逡逑間的關(guān)系�；谧詣舆x擇最佳臨界值將患者分為ＰＨＢ邋“低表達(dá)”和ＰＨＢ邋“高表達(dá)”。ｌｏｇ－ｍｎｋ逡逑檢驗計算Ｐ值。逡逑Ｆｉｇ．２－２．邋Ｌｏｗ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋ＰＨＢ邋ｉｓ邋ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｐｏｏｒ邋ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ邋ｏｆ邋ｂｒｅａｓｔ邋ｃａｎｃｅｒ．逡逑Ｆｉｇ．邋２－２Ａ．Ｔｈｅ邋ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ邋ｂｅｔｗｅｅｎ邋ＰＨＢ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ａｎｄ邋ｏｖｅｒａｌｌ邋ｓｕｒｖｉｖａｌ邋ｗａｓ邋ａｎａｌｙｚｅｄ邋ｂｙ逡逑Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ邋ｍｅｔｈｏｄ邋ｉｎ邋１４０２邋ｂｒｅａｓｔ邋ｃａｎｃｅｒ邋ｐａｔｉｅｎｔｓ．邋Ｐａｔｉｅｎｔｓ邋ｗｅｒｅ邋ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ邋ｉｎｔｏ邋４邋ｌｏｗ５邋ａｎｄ逡逑４ｈｉｇｈ！邋ＰＨＢ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｂａｓｅｄ邋ｏｎ邋ａｕｔｏ邋ｓｅｌｅｃｔ邋ｂｅｓｔ邋ｃｕｔｏｆｆ．邋Ｐ－ｖａｌｕｅｓ邋ｗｅｒｅ邋ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｌｏｇ－ｒａｎｋ逡逑ｔｅｓｔ．逡逑３６逡逑

邐０逡逑Ｆｉｇ２－２Ａ逡逑圖２－２．ＰＨＢ低表達(dá)與乳腺癌的不良預(yù)后相關(guān)。逡逑圖２－２Ａ．在１４０２例乳腺癌患者中，通過Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ方法分析ＰＨＢ表達(dá)與患者總生存時逡逑間的關(guān)系�；谧詣舆x擇最佳臨界值將患者分為ＰＨＢ邋“低表達(dá)”和ＰＨＢ邋“高表達(dá)”。ｌｏｇ－ｍｎｋ逡逑檢驗計算Ｐ值。逡逑Ｆｉｇ．２－２．邋Ｌｏｗ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋ＰＨＢ邋ｉｓ邋ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｐｏｏｒ邋ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ邋ｏｆ邋ｂｒｅａｓｔ邋ｃａｎｃｅｒ．逡逑Ｆｉｇ．邋２－２Ａ．Ｔｈｅ邋ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ邋ｂｅｔｗｅｅｎ邋ＰＨＢ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ａｎｄ邋ｏｖｅｒａｌｌ邋ｓｕｒｖｉｖａｌ邋ｗａｓ邋ａｎａｌｙｚｅｄ邋ｂｙ逡逑Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ邋ｍｅｔｈｏｄ邋ｉｎ邋１４０２邋ｂｒｅａｓｔ邋ｃａｎｃｅｒ邋ｐａｔｉｅｎｔｓ．邋Ｐａｔｉｅｎｔｓ邋ｗｅｒｅ邋ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ邋ｉｎｔｏ邋４邋ｌｏｗ５邋ａｎｄ逡逑４ｈｉｇｈ！邋ＰＨＢ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｂａｓｅｄ邋ｏｎ邋ａｕｔｏ邋ｓｅｌｅｃｔ邋ｂｅｓｔ邋ｃｕｔｏｆｆ．邋Ｐ－ｖａｌｕｅｓ邋ｗｅｒｅ邋ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｌｏｇ－ｒａｎｋ逡逑ｔｅｓｔ．逡逑３６逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Enrico Cortesi;Michela Palleschi;Valentina Magri;Giuseppe Naso;;The promise of liquid biopsy in cancer:a clinical perspective[J];Chinese Journal of Cancer Research;2015年05期

2 Michael P. Trimarchi;Mary Mouangsavanh;Tim Hui-Ming;;Cancer epigenetics: a perspective on the role of DNA methylation in acquired endocrine resistance[J];癌癥;2011年11期

本文編號：2747634