【摘要】：目的：本研究就I3C對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡及其與p53/MDM2的蛋白表達(dá)水平的變化之間的關(guān)系,闡明I3C對(duì)喉癌細(xì)胞的作用機(jī)制,為喉癌治療的藥物篩選提供理論依據(jù)。方法：本文采用RPM1640培養(yǎng)基行喉癌Hep-2細(xì)胞的培養(yǎng)。運(yùn)用MTT比色法,檢測(cè)了不同時(shí)間點(diǎn)(0、12h、24h、72h)不同濃度的I3C (0μM、75μM、150μM)對(duì)Hep-2細(xì)胞存活率的影響；運(yùn)用半定量RT-PCR法,檢測(cè)150μM的I3C對(duì)Hep-2處理72h后細(xì)胞內(nèi)p53、MDM2、BAX及Bcl-2 mRNA的表達(dá)情況；運(yùn)用Western Blotting法,檢測(cè)150μM的I3C對(duì)Hep-2處理72h后細(xì)胞內(nèi)p53、MDM2、BAX及Bcl-2蛋白的表達(dá),探討其抑制Hep-2細(xì)胞增殖的具體作用機(jī)制。結(jié)果：1.MTT結(jié)果顯示,與對(duì)照組(TO)相比,給藥組細(xì)胞的OD值隨藥物作用時(shí)間的延長而降低(P0.05)；給藥后的同一時(shí)間點(diǎn),高濃度組(150μM)細(xì)胞的OD值均低于低濃度組(75μM),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)2.PCR結(jié)果顯示,使用150μM的I3C作用于Hep-2細(xì)胞72h后,與對(duì)照組相比,細(xì)胞內(nèi)MDM2及Bcl-2 mRNA的表達(dá)降低(P0.05),而p53及BAX mRNA的表達(dá)增高(P0.05)。3. Western Blotting結(jié)果顯示,使用150μM的I3C作用于Hep-2細(xì)胞72h后,與對(duì)照組相比,細(xì)胞內(nèi)MDM2及Bcl-2蛋白的表達(dá)減少(P0.05),而p53及BAX蛋白的表達(dá)增多(P0.05)。結(jié)論：1.I3C對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞增殖的抑制作用具有時(shí)間依賴性及濃度依賴性。2.I3C通過上調(diào)BAX/Bcl-2促進(jìn)了喉癌細(xì)胞的調(diào)亡。3.I3C通過下調(diào)p53泛素化達(dá)到抑制喉癌Hep-2細(xì)胞的增殖的作用。
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.65
【圖文】：

小時(shí)（Ｔ３）進(jìn)行測(cè)量的結(jié)果顯示：給藥組與對(duì)照組（ＴＯ）相比，隨著藥物作巧時(shí)間的逡逑延長，光密度，也就是吸光度（ｏｐｔｉｃａｌｄｅｎｓｉｔｙ，邋ＯＤ值）逐漸降低（尸＜０．０５），結(jié)果逡逑見圖１，說明細(xì)胞存活率逐漸降低；給藥后的同一時(shí)間點(diǎn)，高濃度組（１５０｜＿ａＭ）逡逑的ＯＤ值均低于低濃度組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（戶＜０．０５），結(jié)果見表２。逡逑邐表２不同濃度Ｉ３Ｃ對(duì)Ｈｅｐ－２細(xì)胞X椫車奈舛讓紓櫻В跡埃埃靛五義希奘奔溴瘟隋澹板瘟隋澹卞瘟隋澹插危鑠義嚇ǘ儒五五義希罰靛危埃梗

本文編號(hào)：2730198