【摘要】：目的：本研究就I3C對人喉癌Hep-2細胞凋亡及其與p53/MDM2的蛋白表達水平的變化之間的關(guān)系,闡明I3C對喉癌細胞的作用機制,為喉癌治療的藥物篩選提供理論依據(jù)。方法：本文采用RPM1640培養(yǎng)基行喉癌Hep-2細胞的培養(yǎng)。運用MTT比色法,檢測了不同時間點(0、12h、24h、72h)不同濃度的I3C (0μM、75μM、150μM)對Hep-2細胞存活率的影響；運用半定量RT-PCR法,檢測150μM的I3C對Hep-2處理72h后細胞內(nèi)p53、MDM2、BAX及Bcl-2 mRNA的表達情況；運用Western Blotting法,檢測150μM的I3C對Hep-2處理72h后細胞內(nèi)p53、MDM2、BAX及Bcl-2蛋白的表達,探討其抑制Hep-2細胞增殖的具體作用機制。結(jié)果：1.MTT結(jié)果顯示,與對照組(TO)相比,給藥組細胞的OD值隨藥物作用時間的延長而降低(P0.05)；給藥后的同一時間點,高濃度組(150μM)細胞的OD值均低于低濃度組(75μM),具有統(tǒng)計學差異(P0.05)2.PCR結(jié)果顯示,使用150μM的I3C作用于Hep-2細胞72h后,與對照組相比,細胞內(nèi)MDM2及Bcl-2 mRNA的表達降低(P0.05),而p53及BAX mRNA的表達增高(P0.05)。3. Western Blotting結(jié)果顯示,使用150μM的I3C作用于Hep-2細胞72h后,與對照組相比,細胞內(nèi)MDM2及Bcl-2蛋白的表達減少(P0.05),而p53及BAX蛋白的表達增多(P0.05)。結(jié)論：1.I3C對喉癌Hep-2細胞增殖的抑制作用具有時間依賴性及濃度依賴性。2.I3C通過上調(diào)BAX/Bcl-2促進了喉癌細胞的調(diào)亡。3.I3C通過下調(diào)p53泛素化達到抑制喉癌Hep-2細胞的增殖的作用。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.65
【圖文】：

小時（Ｔ３）進行測量的結(jié)果顯示：給藥組與對照組（ＴＯ）相比，隨著藥物作巧時間的逡逑延長，光密度，也就是吸光度（ｏｐｔｉｃａｌｄｅｎｓｉｔｙ，邋ＯＤ值）逐漸降低（尸＜０．０５），結(jié)果逡逑見圖１，說明細胞存活率逐漸降低；給藥后的同一時間點，高濃度組（１５０｜＿ａＭ）逡逑的ＯＤ值均低于低濃度組，具有統(tǒng)計學差異（戶＜０．０５），結(jié)果見表２。逡逑邐表２不同濃度Ｉ３Ｃ對Ｈｅｐ－２細胞X椫車奈舛讓紓櫻В跡埃埃靛五義希奘奔溴瘟隋澹板瘟隋澹卞瘟隋澹插危鑠義嚇ǘ儒五五義希罰靛危埃梗

本文編號：2730198