【摘要】：外泌體是一種由細胞內(nèi)多泡體與細胞膜融合后分泌到細胞外的膜性囊泡,直徑在40～120nm,呈杯狀或碟狀小體。其內(nèi)包含脂類、蛋白及微小RNA等多種成分,在免疫監(jiān)視、神經(jīng)塑形、組織修復、干細胞存活、凝血功能等方面扮演重要角色。有研究表明,干細胞來源的外泌體能夠促進腫瘤發(fā)生,轉移。但也有研究者持反對意見,認為干細胞來源的外泌體抑制了腫瘤的生長。因此,本論文重點研究了人誘導多能干細胞(iPSc)外泌體的分離鑒定及其刺激人肺腺癌A549細胞增殖、侵襲和遷移的能力。研究目的:分離鑒定人iPS細胞外泌體及其刺激人肺腺癌A549細胞增殖、侵襲和遷移的能力。研究方法:改進人iPS細胞和人肺腺癌A549細胞培養(yǎng)條件。采用超速離心法從人iPS細胞培養(yǎng)液上清中分離出人iPS細胞外泌體,并通過透射電子顯微鏡觀察外泌體形態(tài),利用Western blot蛋白質(zhì)印跡法檢測其表面跨膜蛋白的表達。采用細胞活力測定MTS法、Transwell小室法分別檢測外泌體對人肺腺癌A549細胞增殖侵襲作用的影響;采用劃痕法了解人iPS細胞外泌體對人肺腺癌A549細胞遷移能力的影響。研究結果和結論:分離獲得人iPS細胞外泌體,透射電鏡觀察呈圓形或橢圓形杯口狀,大小均勻,直徑在1OOnm左右,Western Blot鑒定外泌體表面具有豐富的CD63蛋白;MTS結果顯示人iPS細胞外泌體對A549細胞具有促進增殖的作用,且具有時間及濃度依賴的特征(P0.05);Transwell小室法結果顯示,人iPS細胞外泌體具有增強A549細胞侵襲能力的作用(P0.05);劃痕法結果表明人iPS細胞外泌體具有促進A549細胞遷移運動的作用(P0.05)。結果表明人iPS細胞外泌體能促進人肺腺癌A549細胞增殖、增強其侵襲、遷移運動的能力。
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第三章實驗結果第三章實驗結果逡逑．邋１人肺腺癌Ａ５４９細胞的形態(tài)特征逡逑人肺腺癌Ａ５４９細胞剛傳代時為分散的圓形球狀，，懸浮在培養(yǎng)基中；貼壁上皮樣生長，多為多角形、長梭形等。由于人肺腺癌Ａ５４９細胞增殖及分化很強，因此也能觀察到細胞之間相互擠壓形成的不規(guī)則多邊形狀。（圖３．邋１）。逡逑

３．邋３人ｉＰＳ細胞外泌體的電鏡結果逡逑通過透射電子顯微鏡下的觀察結果顯示，ｉＰＳ細胞外泌體多呈圓形或楠圓形逡逑小囊泡，典型呈杯口狀，大小均勻，直徑在ｌＯＯｎｍ左右（圖３．３）。逡逑２８逡逑
【學位授予單位】：廈門大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R734.2

【參考文獻】

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1 王丹丹;陳建中;亢春彥;;BMSCs來源的外泌體對小鼠乳腺癌細胞4T1增殖、侵襲的影響及機制探討[J];山東醫(yī)藥;2015年35期

2 Kim-Son H Nguyen;Joel W Neal;Heather Wakelee;;Review of the current targeted therapies for non-small-cell lung cancer[J];World Journal of Clinical Oncology;2014年04期

本文編號：2684100